国家自然科学基金(30070236)
- 作品数:4 被引量:8H指数:1
- 相关作者:吕海燕黄建华王瑶李崇辉钟大光更多>>
- 相关机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生理学更多>>
- ^(19)F磁共振波谱分析CD基因在人结肠癌细胞的表达被引量:1
- 2004年
- 为了研究^(19)F-NMR波谱分析胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在人结肠癌细胞中表达的可行性,通过逆转录病毒介导方法,将编码大肠杆菌的CD基因转染到人结肠癌细胞系SW1116。通过RT-PCR、MTT方法和^(19)F-NMR波谱分析了 CD基因在人结肠癌细胞中的表达状况。结果显示转基因的肿瘤细胞SWCD_2 中表达CD基因,对前药 5-氟胞嘧啶(5-FC)的敏感性较亲本肿瘤细胞 SW1116明显增高,50%细胞生长抑制率(IC_(50))为 66 μmol/L,而 SW1116细胞IC_(50)为16 mmol/L。^(19)F-NMR波谱分析显示,转导CD基因细胞在774μmol/L 5-FC浓度培养24 h后的样品,在δ-91.7和δ-93.3显示了2个双峰,分别是5-FC和5-氟尿嘧啶(5-FU)的^(19)F-NMR的信号,提示5-FU是 SWCD_2细胞内的 CD酶催化 5-FC的代谢产物。这些结果表明^(19)F-NMR分析是一种能够用于检测CD基因在人结肠癌细胞中表达的新方法,它将有助于对临床基因治疗方案实施监测。
- 黄建华王瑶李崇辉邱本胜钟大光吕海燕
- 关键词:结肠癌细胞基因治疗5-氟胞嘧啶CD基因
- CD基因在结肠癌细胞表达的分子成像研究
- 2006年
- 目的:研究CD基因在结肠癌细胞表达的分子成像分析。方法:通过逆转录病毒介导方法,将编码大肠杆菌的CD基因转染到人结肠癌细胞系SW1116。通过19F-NMR波谱分析CD基因在人结肠癌细胞中的表达状况,MTT方法检测5-FC的细胞毒作用。结果:19F-NMR波谱分析显示,转导CD基因细胞在774μmol/L5-FC浓度培养24h后的样品,在δ-91.7和δ-93.3显示了2个双峰,分别是5-FC和5-FU的19F-NMR的信号,提示5-FU是SWCD2细胞内的CD酶催化5-FC的代谢产物。转基因的肿瘤细胞SWCD2中表达了CD基因,对前药5-FC的敏感性较亲本肿瘤细胞SW1116明显增高,50%细胞生长抑制率(IC50)为66μmol/L,而SW1116细胞IC50为16000μmol/L。结论:CD基因表达的代谢产物不但对结肠癌细胞恶性生长具有抑制作用,而且CD基因具有分子成像标记基因的功能。
- 黄建华王瑶吕海燕郭佳金婷杨若佳林星石
- 关键词:肠肿瘤氟胞嘧啶
- 胞嘧啶脱氨酶基因联合5-Fc治疗结肠癌的实验研究被引量:6
- 2005年
- 目的 研究胞嘧啶脱氨酶基因 (CD)联合前体药物 5 氟胞嘧啶 (5 Fc)对结肠癌细胞的生长抑制作用。方法 应用逆转录病毒介导的方法 ,将逆转录病毒载体pLXSN中含有大肠杆菌CD基因的重组质粒pCD2 转染到病毒包装细胞PA317后 ,感染人结肠癌细胞株SW1116。对转基因的细胞进行RT PCR检测和体内外药物敏感实验。结果 获得了稳定表达EC CD基因的结肠癌细胞株SWCD2 ,与野生型SW1116细胞相比 ,SWCD2 细胞对基本无毒性的原药 5 Fc的敏感性增加 ,5 0 %细胞生长抑制率 (IC50 )浓度由野生型SW1116细胞的 16 0 0 0 μmol/L降低到SWCD2 的 6 6 μmol/L。经 5 Fc治疗后 ,SWCD2 细胞的裸鼠移植瘤生长明显缩小。结论 CD基因联合 5 Fc对人结肠癌细胞具有实验性基因治疗作用。
- 黄建华王瑶李崇辉钟大光吕海燕
- 关键词:胞嘧啶脱氨酶基因CD基因结肠癌细胞人结肠癌逆转录病毒介导
- CD基因表达诱导结肠癌细胞的凋亡作用被引量:1
- 2006年
- 目的:研究胞嘧啶脱氨酶(cytosinedeaminase,CD)基因表达是否具有诱导结肠癌细胞凋亡的作用。方法:用不同浓度的5氟胞嘧啶(5flurocytosine,5FC)加至CD基因阳性人结肠癌细胞株SW1116培养,MTT法检测5FC药物对结肠癌细胞生长抑制作用。AnnexinV/PI法分析细胞凋亡率,用透射电镜观察细胞结构改变。结果:与未导入基因的SW1116细胞相比,CD基因阳性细胞对5FC的敏感性明显增加,50%细胞生长抑制率(IC50)浓度由SW1116细胞的16000μmol/L降低到SWCD2的66μmol/L。CD基因导入细胞能够增加5FC诱导的细胞凋亡率。SW1116细胞凋亡率:未加药为2.52%,加药24h为4.61%,48h为2.25%,72h为8.41%;而SWCD2的凋亡率:未加药为4.81%,加药后24h为4.73%,48h为20.78%,72h为32.92%,细胞凋亡率的增加与给药时间成正比。电镜下可见明显的凋亡细胞形态特征。结论:CD基因表达对人结肠癌细胞生长的抑制作用涉及肿瘤细胞凋亡机制。
- 黄建华王瑶吕海燕金婷杨若佳林星石
- 关键词:结肠肿瘤比色法