国家自然科学基金(30070232)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：朱应葆韩云于廷曦童坦君孙艳更多>>
- 相关机构：北京大学第三医院北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 异染色质蛋白HP1α参与辐射损伤修复的研究
- 2004年
- 目的 研究HP1α对辐射损伤修复的影响。方法 用反义技术单独抑制HP1α和联合抑制HR2 4L表达 ,观察细胞对辐射敏感性的影响 ,用免疫共沉淀法观察HP1α是否参与修复蛋白复合物的形成。结果 单独抑制HP1α,细胞对辐射敏感性与正常细胞相比差异无显著性 ,联合抑制HP1α和HR2 4L时 ,细胞对辐射的敏感性比单独抑制HR2 4L时显著增加 ;2 0Gyγ射线照射后 8h ,可检测出HR2 4L与HP1α复合物的存在。结论 HP1α与修复蛋白相互作用 ,参与DNA损伤修复 ,从而影响细胞对辐射的敏感性。
- 赵剑韩云朱应葆
- 关键词：HP蛋白细胞异染色质
- 辐射损伤诱导HR24L多种修复蛋白复合物的形成被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨辐射损伤后HR2 4L修复蛋白复合物的形成 ,为HR2 4L参与切除修复和重组修复提供生化证据。方法 利用质粒共转染和免疫共沉淀技术检测HR2 4L复合物中关键修复蛋白的存在及其在辐射损伤后的变化。结果 2 0J m2 紫外线照射损伤后 2h ,可检测到HR2 4L ,复合物中存在有XPA。 2 0Gyγ射线照射后 2h ,检测到Ku70参与HR2 4L复合物的形成 ,照射后 8h可见Rad5 2存在。结论 辐射损伤后 ,切除修复蛋白和重组修复蛋白参与HR2 4L复合物形成的生化证据 ,进一步支持HR2 4L参与多种修复途径的论点。
- 韩云孙艳朱应葆
- 关键词：蛋白切除HR复合物生化
- HR24L基因过表达抑制细胞凋亡被引量：2
- 2002年
- 目的 :研究人类DNA损伤修复基因HR2 4L与细胞凋亡的关系。方法 :PCR方法扩增HR2 4L基因开放阅读框序列 ,克隆入逆转录病毒载体pDOR neo ,转染HeLa细胞 ,筛选阳性克隆 ;Southern印迹验证HR2 4L基因的整合状况。Northern印迹检查HR2 4LmRNA的细胞内表达水平。过氧化氢、丁酸钠及血清饥饿诱导凋亡 ,流式细胞计数仪检测凋亡比例 ,电泳观察DNALadder,Western印迹检测凋亡相关蛋白质的表达。结果 :获得转染有HR2 4L基因的HeLa细胞。与HeLa细胞相比 ,HeLa HR2 4L细胞HR2 4LmRNA表达明显上升。HR2 4L基因过表达导致Bcl 2的表达升高 ,抑制caspase 3和Bax的表达 ,而对p53却无明显的影响。HR2 4L基因过表达抑制过氧化氢和血清饥饿诱导的细胞凋亡 ,但对丁酸钠诱导的细胞凋亡却无抑制作用。结论 :HR2 4L基因过表达抑制细胞凋亡。
- 于廷曦朱应葆童坦君
- 关键词：细胞凋亡基因表达基因转染
- 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α下游新靶基因PTG的克隆
- 2005年
- 为了进一步研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)下游靶基因,应用基因芯片技术比较经过氧化物酶体增殖物(peroxisomeproliferators,PPs)处理和未处理鼠肝RNA,获得经PPs处理而上调的一个EST(expressedsequencetag),C3f.用5′RACE法获得其全长cDNA,并命名为PTG.Northern法检测PTG的组织分布.结果显示,在小鼠心脏、肝脏、肾脏、睾丸等组织,PTG有高表达.Northern印迹检测AOX敲除的小鼠发现,PTG转录水平明显升高,而在Wy14643处理的AOXPPARα双敲除的小鼠没有发现升高.实时监测PPs处理小鼠肝脏PTG表达水平的变化,发现处理2h后,PTG表达水平提高了2倍,这说明PTG是PPARα的早期反应基因.利用PTGEGFP表达质粒转染NIH3T3细胞,显示PTG蛋白定位于质膜下.进一步用Rab5aEGFP和PTGDsRed双定位载体共转染,结果表明,PTG蛋白定位于早期内吞体.
- 赵剑韩云朱应葆
- 关键词：PPARΑ基因定位小鼠过氧化物酶体
