国家高技术研究发展计划(2003AA223480)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：韩春梅饶春明王军志赵阳王吉更多>>
- 相关机构：中国药品生物制品检定所北京市药品检验所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 首批甘精胰岛素国家对照品的研制
- 2006年
- 目的:建立甘精胰岛素国家对照品。方法:用质谱测定分子量、HPLC法肽图鉴别及测定纯度。结果:以氮含量、纯度扣除法以及外标法结果综合考虑,最终确定首批甘精胰岛素国家对照品的含量为93.7%。即每1mg含甘精胰岛素0.937mg。
- 张慧杨化新李克坚李晓东梁成罡郝苏丽王大梅刘月娥李群代红
- 关键词：甘精胰岛素对照品
- 重组人酸性成纤维细胞生长因子C-末端测序
- 2006年
- 目的:应用蛋白质 N-末端序列分析仪测定重组人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)C-末端氨基酸序列。方法:应用多肽分析软件选择合适的蛋白内切酶完全酶切 aFGF,酶切后用 RP-HPLC 进行分离,收集软件预测 C-末端肽段保留时间处的肽段峰,用蛋白质 N-末端序列分析仪直接测得该肽段氨基酸全序列。结果:实测肽图图谱与软件预测理论图谱一致,所得到的肽段为 aFGF C-末端肽段,经测序其结果与理论序列完全一致。结论:通过选择合适的蛋白内切酶,可运用 RP-HPLC和蛋白质 N-末端序列分析仪测定基因工程产品 C-末端氨基酸序列。
- 史新昌饶春明杨英刘兰韩春梅赵阳张翊王军志
- 关键词：重组人酸性成纤维细胞生长因子
- 乙型脑炎病毒(JEV)单克隆抗体的制备及初步应用被引量：3
- 2006年
- 目的制备乙型脑炎病毒(JEV)单克隆抗体,应用于猪源性生物制品中JEV的检测。方法提纯病毒抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA方法筛选和有限稀释法三次克隆获得4株杂交瘤细胞,并应用琼脂扩散、酶联免疫吸附试验和免疫荧光方法进行抗体鉴定和样品检测。结果获得4株稳定分泌JEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株G10、F4、C10、A5,免疫荧光抗体实验证实是特异的抗JEV抗体,其免疫球蛋白亚类G10和F4为IgG1,A5为IgM,C10未鉴定出其亚类。G10和F4腹水效价为105以上,C10和A5腹水效价为102以上。结论成功制备了抗JEV单克隆抗体,建立了以单抗介导的间接ELISA和间接IFA检测方法,并应用于猪源性生物制品中JEV的检测。
- 王吉卫礼巩薇贺争鸣邢瑞昌
- 关键词：乙型脑炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞
- 重组腺病毒人内皮抑素的质量标准研究被引量：1
- 2005年
- 目的:建立重组腺病毒人内皮抑素的质量标准和检测方法。方法:PCR法鉴定腺病毒载体的E2B区和插入基因,琼脂糖凝胶电泳检查重组病毒DNA酶切图谱。分光光度法测定病毒颗粒数,TCID50法测定病毒感染滴度。感染人肝癌细胞HepG2测定插入基因的表达量,感染人血管内皮细胞HM2测定表达产物的生物学活性。病毒的纯度分析采用A260/A280比值和HPLC法进行。采用A549细胞进行复制型腺病毒的检测。结果:腺病毒载体E2B区和插入基因PCR扩增结果与理论相符,重组病毒DNA的酶切图谱与标准品一致。原液病毒颗粒数为2.4×1012VP/ml,滴度为1.53×1011IU/ml,比滴度为6.4%IU/VP;成品病毒颗粒数为1.0×1012VP/ml,滴度为3.75×1010IU/ml,比滴度为病3.8%IU/VP.以50MOI重组腺病毒感染HepG2细胞48h后培养上清人内皮抑素表达量为332ng/ml。50MOI重组腺病毒对血管内皮细胞生长的抑制率为55%。A260/A280为1.29,HPLC纯度为99.7%。复制型腺病毒为≤1RCA/3×1010VP。其他各项检测指标均符合规定。结论:建立了重组腺病毒人内皮抑素的质量标准及其检测方法,并用于该产品的质量控制。
- 李永红饶春明赵阳高凯袁力勇韩春梅李响王军志
- 关键词：腺病毒载体内皮抑素基因治疗
