广东省科技计划工业攻关项目(2011B031800201)
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 相关作者：段建民李洪涛文军李斯翰吴补领更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院南方医科大学南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 富血小板血浆应用于间充质干细胞体外培养的研究进展被引量：1
- 2014年
- 富血小板血浆(PRP)富含大量的生长因子,这些生长因子的协同作用可以促进间充质干细胞(MSCs)的增殖,同时保持干细胞表面特异性标志物的表达,维持干细胞的多向分化能力和免疫抑制能力。PRP可替代胎牛血清(FBS)应用于MSCs的体外扩增,从而避免FBS作为MSCs培养基可能引起的伦理、科学及安全等问题。目前,亟需解决PRP制备方法和性状的标准化,使科研和临床更具可靠性和重复性。
- 文军李东段建民
- 关键词：富血小板血浆间充质干细胞胎牛血清
- 改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞增殖与免疫原性的作用被引量：3
- 2013年
- 背景:课题组前期实验发现改良富血小板血浆对人牙髓细胞增殖的促进作用具有浓度依赖性,以10%浓度尤为明显。目的:观察不同浓度改良富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞体外生长增殖的作用效果,以及最佳浓度改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞免疫原性的影响。方法:使用健康志愿者捐献骨髓血培养的第三四代人骨髓间充质干细胞,行流式细胞术及成脂、矿化诱导分化鉴定。将由同一志愿者采集的静脉血制备的改良富血小板血浆作用于人骨髓间充质干细胞,以CCK-8法测定细胞增殖变化,绘制生长曲线。选取最适合人骨髓间充质干细胞增殖的改良富血小板血浆浓度,以体积分数10%FBS培养基为对照,通过流式细胞术测定连续培养3代的人骨髓间充质干细胞表面Stro-1的表达率。结果与结论:5%-10%的改良富血小板血浆在培养第6,8天均显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖,其中以10%浓度组尤为显著在培养第10天仍显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖且细胞表面Stro-1的表达率连续3代均高于对照组。说明改良富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞增殖的促进作用具有浓度依赖性,10%改良富血小板血浆可以较好地保持人骨髓间充质干细胞的免疫原性。
- 李斯翰段建民李洪涛文军
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞富血小板血浆骨髓血免疫原性
- 改良富血小板血浆促进乳牙牙髓干细胞成骨分化作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的:体外研究改良富血小板血浆(modified platelet-rich plasma,mPRP)促进人乳牙牙髓干细胞成骨分化的作用。方法:以α-MEM作为基础培养基,分别加入1%、2%、5%、10%4种不同浓度mPRP或者10%胎牛血清(对照),对第4代SHED连续培养并诱导矿化,碱性磷酸酶试剂盒检测ALP活性的变化,qRT-PCR方法检测细胞内RUNX2和骨钙素mRNA含量的改变。结果:不同浓度的mPRP均可以促进乳牙牙髓干细胞的ALP活性,且浓度为2%时A值最高;qRT-PCR检测显示2%mPRP可以上调乳牙牙髓干细胞内RUNX2及骨钙素mRNA的含量。结论:一定浓度的mPRP对乳牙牙髓干细胞的成骨分化具有一定的促进作用。
- 文军段建民李洪涛李斯翰李鑫吴补领
- 关键词：富血小板血浆乳牙牙髓干细胞间充质干细胞成骨分化
- 富血小板血浆与洗涤血小板对人牙髓细胞矿化的作用被引量：7
- 2012年
- 背景:此前课题组的研究表明富血小板血浆和洗涤血小板在一定浓度范围内均可促进人牙髓细胞的增殖。目的:进一步观察不同浓度富血小板血浆和洗涤血小板对人牙髓细胞矿化的作用效果。方法:实验使用健康志愿者正畸拔除牙齿内牙髓培养的4～6代牙髓细胞。将由该志愿者采集的静脉血制备富血小板血浆和洗涤血小板作用于牙髓细胞,使用碱性磷酸酶及蛋白定量试剂盒测定矿化诱导7d后牙髓细胞的碱性磷酸酶活性,并通过茜素红染色观测牙髓细胞经矿化诱导10d及20d后的矿化结节形成情况。结果与结论:10%～30%的洗涤血小板与富血小板血浆均明显提高了牙髓细胞碱性磷酸酶活性,其中,以20%浓度尤为明显;10%～30%的洗涤血小板与富血小板血浆均明显促进了矿化诱导后10d的牙髓细胞矿化结节形成,其中,10%浓度在矿化诱导后20d促进牙髓细胞形成的矿化结节最大。但相同浓度的洗涤血小板与富血小板血浆之间在作用效果上没有明显差异。
- 李洪涛段建民片山直
- 关键词：洗涤血小板富血小板血浆牙髓细胞矿化碱性磷酸酶
- 改良富血小板血浆促进乳牙牙髓干细胞增殖的最佳浓度被引量：3
- 2014年
- 背景:课题组前期实验发现用液氮冻融激活的改良富血小板血浆可以促进骨髓间充质干细胞和牙髓干细胞的增殖,且这种促增殖作用具有浓度特异性。目的:体外研究不同浓度的改良富血小板血浆对人乳牙牙髓干细胞增殖的影响。方法:利用全自动血细胞分离机制备血小板浓缩物,反复冻融法激活,获得改良富血小板血浆;以α-MEM作为基础培养基,分别加入体积分数为2%,5%,10%,20%4种不同浓度改良富血小板血浆或者体积分数10%胎牛血清进行培养,观察细胞增殖差异。结果与结论:不同浓度的改良富血小板血浆均能够促进乳牙牙髓干细胞增殖,体积分数2%改良富血小板血浆与体积分数10%胎牛血清促进乳牙牙髓干细胞增殖作用接近。提示体积分数2%改良富血小板血浆可以促进乳牙牙髓干细胞的增殖,有可能代替胎牛血清用于乳牙牙髓干细胞的体外扩增。
- 文军吴补领段建民李洪涛李斯翰李鑫
- 关键词：干细胞富血小板血浆乳牙牙髓干细胞间质干细胞胎牛血清血小板源性生长因子转化生长因子Β
- 人洗涤血小板促进成骨细胞增殖与前列腺素E2的作用被引量：1
- 2012年
- 背景:对于富血小板血浆促进组织再生的理想血小板浓度、哪些成分担当重要作用以及通过何种机制发挥作用等基础问题目前还不是很清楚。目的:观察洗涤血小板对小鼠成骨细胞株——MC3T3-E1的增殖及其产生前列腺素E2作用的相关性。方法:将从健康成人男性志愿者身上采集并制备的洗涤血小板经反复液氮冻溶后作用于小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,分别加入体积分数5%-15%的洗涤血小板、富血小板血浆、乏血小板血浆或和其他样品(消炎痛、肿瘤坏死因子α和转化生长因子β抑制剂SB431542)培养。采用细胞和前列腺素E2测定试剂盒测定细胞增殖与前列腺素E2的生成量,采用RT-PCR测定环氧酶2mRNA的表达。结果与结论:体积分数5%洗涤血小板作用于MC3T3-E1细胞1h后开始表达环氧酶2mRNA、并诱导产生前列腺素E2,作用3h时环氧酶2mRNA的表达达到峰值,而前列腺素E2的产生量在作用后6h达到峰值(40.5μg/L)。随着体积分数的升高,洗涤血小板对MC3T3-E1细胞增殖的促进作用逐渐降低,并且当其体积分数达到15%时呈现对MC3T3-E1细胞增殖的显著抑制作用,而洗涤血小板对MC3T3-E1细胞产生前列腺素E2的作用随着其浓度的倍比增加而显著增强。添加消炎痛会明显抑制5%洗涤血小板对MC3T3-E1细胞增殖及前列腺素E2产生的促进作用,而添加肿瘤坏死因子α(100μg/L)则会明显增大洗涤血小板对MC3T3-E1细胞产生前列腺素E2的促进作用。另外,SB431542(15μmol/L)可明显抑制体积分数5%的洗涤血小板对MC3T3-E1细胞增殖及前列腺素E2产生的促进作用。提示洗涤血小板促进MC3T3-E1增殖与其诱导该细胞生成前列腺素E2有密切的相关性。
- 李洪涛段建民匡威菊地宽高片山直
- 关键词：富血小板血浆洗涤血小板成骨细胞增殖前列腺素E2
- 富血小板血浆应用于活髓保存的研究进展被引量：1
- 2013年
- 富血小板血浆含有大量生长因子,能够促进牙髓细胞的迁移、增殖和分化,应用其直接盖髓可以诱导成牙本质样细胞的形成,有利于形成完整的修复性牙本质桥。本文从富血小板血浆的理化特性、细胞学作用和临床应用等方面对其应用于临床直接盖髓的前景作一展望。
- 文军段建民
- 关键词：富血小板血浆盖髓术血小板源性生长因子间质干细胞
