北京市自然科学基金(6112005) 作品数:4 被引量:15 H指数:3 相关作者: 韩莹琰 范双喜 李婷 任月 李洋 更多>> 相关机构: 北京农学院 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 北京市科技新星计划 北京市属高等学校人才强教计划资助项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
叶用莴苣优异种质资源的鉴定和筛选 [目的与意义]我国叶用莴苣栽培品种主要靠引进国外已有品种,具有自主知识产权的品种和类型很有限,且在品种资源搜集、鉴定上几乎是空白。需要多角度、多方法开展种质资源的创新工作,开发出品质优良的叶用莴苣新品种,来满足当前生产的... 范双喜 韩莹琰 刘超杰 郝敬虹 董洁 李君平 赵真真关键词:叶用莴苣 优异种质资源 高温胁迫下不同耐热性叶用莴苣幼苗Hsp70和Hsp90表达量差异与耐热性指标研究 热休克蛋白Hsp70和Hsp90在植物体中的表达量随温度变化呈现一定的规律性。叶用莴苣喜冷凉湿润的气候条件,夏季生长易受高温影响,提早抽薹,产量和品质下降。探究高温胁迫下Hsp70和Hsp90在不同耐热性叶用莴苣幼苗中的... 范双喜 韩莹琰 刘超杰 郝敬虹 李洋 李君平 赵真真关键词:叶用莴苣 高温胁迫 HSP70 HSP90 表达量 叶用莴苣叶片总蛋白质双向电泳影响因素的研究 被引量:2 2012年 以叶用莴苣叶片为试材,研究17cm固相pH梯度胶条(pH 4~7)体系下双向电泳不同的提取方法、上样体积、定量方法等影响因素,力求确定其理想的双向电泳条件。结果表明,酚-甲醇/醋酸铵沉淀法对蛋白质提取更彻底,效果更好。对于蛋白质定量的试验,相比于常规的Bradford方法,利用无干扰蛋白质定量试剂盒具有更好的准确性。考虑叶片总蛋白质中大量Rubisco的存在,应相对增加上样量,采用考马斯亮蓝染色时取800μg到1 100μg蛋白质进行双向电泳比较合理。 陈曙红 韩莹琰 范双喜 李洋关键词:叶用莴苣 叶片 双向电泳技术 叶用莴苣幼苗幼叶总蛋白SDS-PAGE和Western-blot方法的优化 被引量:3 2012年 为建立一套适合叶用莴苣(Lactuca sativeL.)热激蛋白研究的SDS-PAGE和Western-blot方法。以叶用莴苣W7为材料,采用改进的TCA/Acetone法提取叶片蛋白,比较了2种电压下SDS凝胶分离蛋白质的效果,使用4℃保存2周的抗体稀释液,并且得到了较清晰的热激蛋白70和内参蛋白Rubisco条带,初步确定了叶用莴苣叶片热激蛋白的western-blot实验条件。 李洋 韩莹琰 范双喜 陈曙红关键词:叶用莴苣 热激蛋白 WESTERN-BLOT 叶用莴苣LsHsp70基因的克隆及表达分析 被引量:7 2013年 以叶用莴苣(Lactuca sativa L.)叶片为试材,采用 RT-PCR 结合 RACE 技术,克隆 LsHsp70基因序列,并利用实时荧光定量 PCR 技术检测耐热品种‘Z36’和热敏品种‘S106’在不同高温胁迫下LsHsp70 基因的表达情况。结果表明,LsHsp70 基因的开放阅读框为 2 094 bp,编码 697 个氨基酸,推测蛋白质分子量为 74.1 kD,具有 HSP70 家族 3 个标签序列 IDLGTTNS、VFDLGGGTFDVSVL 和VILVGGSTRIPAV,与拟南芥 Hsp70 同源性高达 92%。高温胁迫能够诱导 LsHsp70 表达;LsHsp70 对 37 ℃高温胁迫的响应比对 42 ℃高温胁迫的响应更为显著和迅速;在相同胁迫温度下,耐热品种‘Z36’比热敏品种‘S106’对高温的应激反应迟缓,持续时间更长,说明该基因的表达与叶用莴苣耐热性有一定的关联。 李婷 韩莹琰 郝敬虹 范双喜 任月关键词:叶用莴苣 克隆 基因表达 高温胁迫 耐热性 叶用莴苣优异种质资源的鉴定和筛选 [目的与意义]我国叶用莴苣栽培品种主要靠引进国外已有品种,具有自主知识产权的品种和类型很有限,且在品种资源搜集、鉴定上几乎是空白。需要多角度、多方法开展种质资源的创新工作,开发出品质优良的叶用莴苣新品种,来满足当前生产的... 范双喜 韩莹琰 刘超杰 郝敬虹 董洁 李君平 赵真真关键词:叶用莴苣 优异种质资源 叶用莴苣荧光定量PCR体系的优化 被引量:4 2013年 为建立一套最适合叶用莴苣(Lactuca sativa L.)基因表达量研究的荧光定量PCR技术体系,以叶用莴苣S24为试材,采用SYBR Green Ⅰ法,利用叶用莴苣内参基因的2对引物组合18SR1和18SR2,分别在10μL和20μL反应体系条件下进行扩增反应。结果表明,分别在10μL和20μL反应体系条件下内参基因引物组合18SR1的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标都优于内参基因引物组合18SR2;2对内参基因引物组合18SR1和18SR2在10μL反应体系中的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标也均优于20μL反应体系。因此叶用莴苣荧光定量PCR内参基因利用18SR1引物组合,反应体系采用10μL比较合理。 李婷 韩莹琰 范双喜 任月关键词:荧光定量PCR SYBR