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广东省科技计划工业攻关项目(2007803000002)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
张念华
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2010
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人骨形成蛋白7重组腺病毒载体的构建及其在牙周膜细胞中的表达
被引量:1
2010年
目的研究腺病毒介导人骨形成蛋白7(BMP-7)基因转染人牙周膜细胞(PDLC)后目的基因的表达及对人PDLC增殖的影响。方法通过PCR扩增,获得BMP-7基因片段,酶切亚克隆到穿梭质粒pShuttle—CMV-BMP-7上,在293细胞内和质粒pBHGE3同源重组得到腺病毒载体质粒Ad—BMP-7,PCR扩增目的基因鉴定重组腺病毒,扩增纯化后测定滴度。体外培养人PDLC,Ad—BMP-7转染人PDLC,免疫印迹法(Westernblot)检测BMP-7的表达,噻唑蓝(MTY)比色法检测转基因细胞的增殖情况。结果PCR显示BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度为1.785×10^12pfu/ml。Ad—BMP-7转染人PDLC后可检测到BMP-7表达。转染BMP-7对人PDLC增殖没有明显影响。结论构建的BMP.7腺病毒表达载体可有效转染人PDLC。并在体外高效表达。
秦伟
林正梅
高红飞
张念华
宋智
凌均柴
关键词:
骨形态发生蛋白质类
基因疗法
牙周膜细胞
腺病毒载体
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