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天津市科技发展战略研究计划项目(06YFGPSH03300)
作品数:
1
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RKIP基因与卵巢上皮性癌转移的关系
被引量:2
2009年
目的探讨一种新的转移抑制基因——RKIP基因与卵巢癌转移的关系。方法应用免疫组化、RT-PCR及蛋白印迹法对卵巢肿瘤的组织标本(卵巢癌组织22份,卵巢交界性肿瘤组织8份,卵巢良性肿瘤组织10份)及卵巢癌细胞系小RKIP基因的表达情况进行检测。将含正义和反义RKIPcDNA的表达载体导入卵巢癌细胞系SKOV3,蛋白印迹法检测转染前后细胞中丝裂原激活的蛋白激酶/细胞外信号调节激酶的激酶(MEK)、细胞外信号调节激酶(ERK)活性的变化。应用四甲基偶氮唑蓝法、双层软琼脂集落形成实验、体外黏附实验、体外侵袭实验、流式细胞仪等观察RKIP基因对卵巢癌细胞生物学行为的影响。结果(1)22份卵巢癌组织中RKIP的表达以阴性(6份,27%)、弱阳性(9份,41%)为主,而10份卵巢良性肿瘤和8份交界性肿瘤组织以强阳性(分别为4份、2份)、阳性(分别为4份、5份)为主。(2)RKIP基因转染后,含正义cDNA的ssRKIP细胞的磷酸化MEK和磷酸化ERK蛋白表达水平下调,ssRKIP#1和ssRKIP#4细胞磷酸化MEK蛋白的相对表达含量分别为0.35和0.34,两者磷酸化ERK蛋白的相对表达含量分别为0.48和0.46。(3)ssRKIP细胞的增殖能力明显低于未转染细胞(P〈0.01)。(4)锚定非依赖性生长能力:ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的集落形成数(83.7±5.7、106.0±9.2)较其对照空载体pcDNA3.1(+)转染细胞(158.3±14.6)明显减少,分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.01)。(5)体外黏附能力:ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的黏附率[分别为(68.3±0.8)%、(64.1±0.9)%]明显低于未转染细胞[(100.0±1.1)%],分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.01)。(6)体外侵袭能力:ssRKIP#1、ssRK]P#4细胞的穿膜细胞数[分别为(24±5)、(25±4)个]明屁低于未转染细胞[(68±5)个],分别比
王越
杨洁
高燕
赵秀兰
李宏钊
姚智
关键词:
卵巢肿瘤
肿瘤转移
细胞系
肿瘤
磷脂酰乙醇胺结合蛋白
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