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狗蔷薇细胞分裂素氧化酶基因RcCKX5的克隆及表达分析被引量：7: 2014年; 利用RACE技术从狗蔷薇(Rosa canina)类根体中克隆得到1个细胞分裂素氧化酶基因cDNA全长,命名为RcCKX5。序列分析表明,RcCKX5 cDNA全长1 815 bp,5′UTR 104 bp,ORF 1 626 bp,3′UTR85 bp,编码541个氨基酸,具有CKX家族典型的FAD(黄素腺嘌呤二核苷酸)结合域和CK(细胞分裂素)结合域。氨基酸序列多重比对和系统进化树分析显示RcCKX5与可可TcCKX5亲缘关系最近,与拟南芥AtCKX5、乌拉尔图小麦TuCKX5同源性较高。荧光定量PCR分析表明,狗蔷薇RcCKX5在其根、茎、叶、花、果实中均有表达,根中相对表达量最高,花和果实中相对表达量较高。在狗蔷薇类根体形成发育过程中RcCKX5的相对表达量不断升高,21 d时达到最高,随后稍有下降,表明其可能参与了类根体的形成。6-BA处理结果表明RcCKX5能够快速响应6-BA的诱导,表达量显著上调,2.5 mg·L-1 6-BA处理120 h时,RcCKX5的相对表达量达到最高峰。; 王玲高彬温超郗琳刘凤栾马男赵梁军

植物类原球茎的研究与应用被引量：7: 2012年; 本文从植物类原球茎的定义、诱导条件、起源与性质、发生发育机理及应用等方面介绍了国内外的研究进展。综合国内外的研究认为,类原球茎是胚胎发生与器官发育的复合体,是植物在组培条件下产生的人工种子,在植株高效再生、遗传转化、次生代谢物质生产、细胞工程、植物发育生物学研究等领域均有广泛的应用前景。; 姜福星刘凤栾赵梁军; 关键词：类原球茎整合体

狗蔷薇RaWUS基因组成型表达对烟草叶片形态的影响被引量：3: 2012年; 为验证从狗蔷薇类原球茎克隆的RaWUS基因的功能,构建了组成型表达载体,并用根瘤农杆菌介导的叶盘转化法对烟草进行了遗传转化。通过除草剂草丁膦筛选,获得了转基因植株并对其进行了表型观察和RT-PCR分析。结果显示转基因烟草叶片形态和叶脉表现出形态变化,包括叶片浅裂、叶片边缘波浪状、叶脉紊乱,甚至叶片的主脉上有不定芽的产生等。RT-PCR分析表明,RaWUS基因仅仅在经过草丁膦筛选的抗性转基因烟草中强烈表达,在野生型烟草中没有表达。表明RaWUS基因已经被成功转入烟草中,并可能通过改变激素的水平和调控维管束的发育来影响叶片形状。; 姜福星刘凤栾马男张建甫赵梁军; 关键词：组成型表达转基因烟草

狗蔷薇类原球茎遗传转化体系的建立被引量：7: 2012年; 在本实验室建立的狗蔷薇(Rosa canina)类原球茎(PLB)再生途径基础上,以类原球茎为转化受体,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,GV3101菌株)介导法,通过评价类原球茎GUS基因瞬时表达率,采用正交试验设计优化狗蔷薇遗传转化条件,建立遗传转化体系。最佳转化条件为:用OD600值为0.6的农杆菌菌液侵染狗蔷薇类原球茎30min,然后在含有100μmol/L乙酰丁香酮的MS培养基上共培养2d,利用此优化的转化系统,经组织化学染色及PCR检测获得了转GUS基因阳性植株。; 毕玲刘凤栾董爱香周晓阳马男赵梁军; 关键词：类原球茎根癌农杆菌

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国家自然科学基金(31171993)