转基因生物新品种培育专项(2008ZX08010-004)
- 作品数：10 被引量：42H指数：4
- 相关作者：李成伟丁锦平李付广刘冬梅张福丽更多>>
- 相关机构：周口师范学院商丘师范学院中国农业科学院棉花研究所更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家重点基础研究发展计划河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 商丘地区棉花黄萎菌的分离与鉴定被引量：1
- 2009年
- 从河南商丘各县区采集棉花黄萎病病株,对其进行黄萎病菌的分离和鉴定。采用连续稀释法和单孢分离法分离得到16个单菌系,并以这些单菌系作为研究对象,利用真菌通用引物ITS1和ITS4对所分离的单菌系内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增,得到543 bp大小的片段,经过克隆测序和在GenBank中进行BLASTn分析,与安阳棉花黄萎菌的ITS序列的同源性均达到98%以上,证明了这些片段来自大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)的ITS区。同时将这些序列在NCB I的GenBank进行了登记,获得5个登记号:FJ715500、FJ715501、FJ715502、FJ715503、FJ715504。
- 刘冬梅丁锦平陈静李成伟李付广
- 关键词：棉花黄萎菌ITS序列
- 农杆菌介导的植物转基因影响因素被引量：12
- 2012年
- 农杆菌介导法是植物转基因常用的方法,具有费用低、拷贝数少、重复性好以及能转移较大片段等独特优点。转化率是农杆菌介导的植物转基因中的关键问题,多种因素影响着转化率的高低,包括菌株和载体的组合类型、农杆菌的生长状态和菌液浓度、抑菌抗生素、筛选系统中的筛选剂种类和选择压及筛选方法、共培养时间和共培养基的pH值、培养环境的光照度和温度、以及外植体接种方式等方面。
- 张福丽陈龙李成伟
- 关键词：农杆菌介导植物转基因影响因素
- 棉花突变体的获得及其应用研究进展被引量：11
- 2009年
- 介绍了棉花突变体的获得方法,并分别阐述了各种方法产生变异的机制。为了便于查找棉花突变体材料,将国内突变体收集保存情况进行了总结。另外,还描述了5个重要的棉花突变体及其在棉花遗传育种、基因克隆及功能基因组研究中发挥的重要作用。
- 刘冬梅丁锦平李成伟李付广
- 关键词：棉花突变体
- 核黄素对棉花枯萎病菌生长影响的研究被引量：2
- 2012年
- 探讨不同浓度核黄素对棉花枯萎菌生长的影响,找出影响枯萎菌生长的最佳浓度。采用PDA培养基中加入不同浓度的核黄素,观察棉花枯萎病菌菌丝、菌落及孢子的生长变化。结果表明:菌丝生长、菌落形态及孢子形态均有不同程度变化,当核黄素浓度大于0.5mg/mL的核黄素能明显抑制菌丝生长,而且抑制效果随着处理浓度的增大而增强;当核黄素浓度大于1mg/mL的核黄素处理可诱导初生菌丝发生肿胀,分枝增多且菌体分隔增加及体细胞发生畸形等形态变化;当核黄素浓度大于1mg/mL时,孢子发生畸形。利用核黄素可以抑制棉花枯萎病病菌的生长,对开拓植物病害新的防治方法有一定的参考价值。
- 丁锦平魏理宋超李成伟
- 关键词：核黄素棉花枯萎病菌拮抗作用
- 2种棉花叶片总蛋白质纯化方法比较研究被引量：4
- 2009年
- 以三氯乙酸—丙酮沉淀法粗提的棉花总蛋白为材料,比较了丙酮沉淀法、醋酸铵沉淀法纯化棉花总蛋白的效果.结果显示:与三氯乙酸—丙酮沉淀法提取的棉花总蛋白干粉加入裂解液后直接电泳相比较,经丙酮沉淀法和醋酸铵沉淀法处理后的总蛋白杂质干扰少、电泳结果蛋白条带清晰,蛋白含量较高,相比醋酸铵沉淀法丙酮沉淀法效果较好,适合于棉花蛋白质组学研究中纯化总蛋白质.
- 丁锦平刘冬梅周瑞阳李付广李成伟
- 关键词：蛋白质纯化
- 棉花NBS抗病基因的发掘被引量：1
- 2012年
- 根据已克隆的R基因的保守序列设计引物,在棉花不同抗性品种中克隆出500 bp左右大小片段,克隆测序并在NCBI上进行Blast分析,发现这些序列除一个序列外均与已经克隆的抗病基因类似物(RGAs)同源,且同源性高达98%以上。将这些从棉花中克隆的RGAs和植物中已克隆的几个典型的R基因序列建立进化树,棉花中的RGAs序列分别聚在3个不同的亚家族,可以通过后续的功能验证来确定这些序列片段的功能。
- 丁锦平张庆琛魏理李成伟
- 关键词：棉花抗病基因抗病基因类似物
- L-半胱氨酸对农杆菌介导的大豆子叶节转化的影响被引量：1
- 2012年
- 通过在共培养基中添加L-半胱氨酸,研究了L-半胱氨酸对农杆菌介导的大豆子叶节转化的影响。结果表明:L-半胱氨酸对大豆子叶节的转化有明显的促进作用,其中质量浓度为500 mg/L时转化效率最为显著。以此浓度为基础,通过GUS染色和分子检测,得到了大豆转基因植株,使转化效率由不加L-半胱氨酸的1.17%提高到了2.21%。
- 张福丽张怡周玲谭光轩陈龙苑保军豆颖丰鲁四海李成伟
- 关键词：农杆菌介导大豆子叶节
- 黄萎菌诱导棉花活性氧及保护酶系的变化研究被引量：2
- 2012年
- 以棉花耐黄萎病品种中棉41和感黄萎病品种冀棉11为材料,通过测定黄萎菌诱导前后活性氧积累及保护酶系活性的变化,研究其与棉花抗性的关系。结果表明:在接种黄萎菌后36h,2个品种的棉花叶片O2-产生速率均达到高峰,而中棉41O2-产生速率明显高于冀棉11;同时,叶片内丙二醛(MDA)的含量也均达到一个高峰,中棉41中MDA含量高于冀棉11;在接种后24h和36h,冀棉11和中棉41棉花叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性分别达到一个高峰,且冀棉11变化幅度大于中棉41;对于过氧化物酶(POD)的活性,在接种后24h,2个品种均达到一个高峰,但是耐病品种中POD活性增加幅度不及感病品种。在棉花与黄萎病菌互作的过程中,活性氧和保护酶系参与不同的抗性反应途径。
- 丁锦平张庆琛魏理裴冬丽李成伟
- 关键词：棉花黄萎菌活性氧保护酶过氧化物酶
- 棉花黄萎病菌ITS序列的获得及系统进化分析被引量：5
- 2011年
- 为探明从河南安阳棉区分离的棉花黄萎病菌的系统进化关系,利用真菌内转录间隔区通用引物ITS1和ITS4对来自安阳地区的棉花黄萎病菌内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增,得到542bp大小的片段,经过克隆、测序和在GenBank中进行BLASTN分析,证明了该片段来自大丽轮枝菌的ITS区,也进一步证明该棉花黄萎病菌是大丽轮枝菌。同时,对该序列在NCBI的GenBank进行了登记,登记号为EU835817。利用该ITS序列与GenBank中搜索到的黄萎病菌ITS序列一起构建了相应黄萎病菌的系统进化树,在进化树上所搜索到的13个大丽轮枝菌都聚类到一个进化枝上,而且中国报道的植物黄萎病菌,包括安阳地区黄萎病菌在内的3个大丽轮枝菌在进化树上处于相邻的位置,表明:这3个菌可能具有相同的起源。这些结果有助于理解棉花黄萎病安阳菌株的进化地位,该ITS序列还可以应用于棉花黄萎病安阳菌株的特异分子鉴定。
- 丁锦平刘冬梅李付广朱荷琴李成伟
- 关键词：棉花黄萎病菌ITS序列系统进化树
- 大豆整体子叶节再生体系的建立及应用于农杆菌介导遗传转化初探被引量：3
- 2012年
- 以中黄20、周豆02005、周豆11和周豆18整体子叶节为材料,以MSB为基本培养基,通过L9(34)正交设计研究了6-BA、IBA和KT 9种浓度组合对大豆整体子叶节丛生芽再生的影响;并将大豆的整体子叶节应用于农杆菌介导的遗传转化研究。结果表明:9种激素组合中以MSB+3.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IBA+0.5 mg.L-1KT最适合周豆02005丛生芽的诱导,而MSB+3.5 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1IBA+0.2 mg.L-1KT最适宜周豆11、周豆18和中黄20的丛生芽诱导;4个大豆基因型中,以中黄20的丛生芽数最多;丛生芽用于诱导生根时,IBA为0.8 mg.L-1、NAA为0.8～1.0 mg.L-1时较适合大豆生根,其中以中黄20生根数最多。以中黄20整体子叶节为材料,进行了农杆菌介导的遗传转化研究。PCR分析和GUS染色初步表明,外源基因转入了大豆的基因组中,转化率为7.8%,得到转基因植株的周期为35～42 d。
- 张福丽舒文涛张怡高丹张丽陆亚杰罗祥李成伟
- 关键词：大豆农杆菌介导
