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不同居群栽培牡丹rDNAITS区序列分析及鉴别被引量：4: 2009年; 对我国四个地区牡丹主要栽培品种rDNA ITS区序列进行测定,研究各居群rDNA ITS序列特征及差异,建立不同地区主要牡丹栽培品种的区域性分子标记,参照GeneBank信息(登录号:U27692)利用Clustal X、MEGA3.1分子进化遗传分析软件对测序结果排序。牡丹ITS全序列长度为652 bp,相对于GenBank中牡丹rD-NA ITS全序列在448位少一个C碱基,其中ITS1为267 bp,5.8 S为163 bp,ITS2为222 bp,GC含量为55.7%～56.9%,共有30个变异位点,主要发生在ITS1、ITS2区,5.8S区也存在多个位点的变异。牡丹rDNA ITS区序列特征(SNPs)可用于不同地区主要牡丹栽培品种的鉴别。; 徐纲于超阳勇杨俊艳; 关键词：RDNA ITS 单核苷酸多态性分子标记

牡丹皮基因组DNA提取的影响因素研究被引量：9: 2008年; 目的:研究牡丹皮基因组DNA提取的影响因素。方法:以根皮类中药材牡丹皮为材料,在快速少量抽提(CTAB)法的基础上对提取缓冲液中氯化钠、β-巯基乙醇浓度,水浴温度、时间,RNA酶(RNaseA)、聚合酶链(PCR)反应体系等条件进行考察。结果:使用经过改进后的CTAB法获得的DNA纯度和完整性较好,A260/A280值在1.8～2.0之间,PCR扩增条带清晰且亮,从而为接下来的分子生物学实验打下了良好的基础。结论:本方法经济、快速、高效,可作为根皮类中药材基因组DNA的提取方法,可为大规模生产提供理论依据。; 徐纲于超赵华; 关键词：基因组总DNA 分子标记

不同采收期川丹皮多组分化学成分变化规律研究被引量：14: 2006年; 目的明确不同采收期川丹皮药材多组分化学成分的变化规律,确定川丹皮最佳生长期与采收期,并为丹皮药材建立一种更符合中医理论的质量控制方法。方法运用HPLC法在273nm测量各样品中丹皮酚含量;在242nm建立各样品的色谱指纹图谱,并以丹皮酚成分峰为参照计算其它成分的相对含量,图表分析展现牡丹皮多组分化学成分的动态变化规律。结果(1)垫江牡丹皮药材中丹皮酚的平均含量为1.25%,10月份川丹皮样品丹皮酚平均含量最高;(2)川丹皮中多组分化学成分在第5年11月份达到最高,其变化规律与丹皮酚不呈正相关。结论中药材多组分化学成分色谱指纹图谱技术是一种全面评价中药材质量的现代仪器分析方法,可以更广泛地应用于生产、流通领域中药材的质量控制。; 白志川; 关键词：色谱指纹图谱采收期

白术药材HPLC色谱指纹图谱研究被引量：21: 2006年; 目的应用HPLC法建立酉阳规范化种植白术的指纹图谱,为白术药材的质控提供依据.方法采用Symmetry C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;以甲醇-水（65%～100%）连续梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min;在254 nm波长下检测.测定11批药材的色谱图,确立标准指纹图谱.结果白术药材有11个共有峰,多数峰可以达到较好分离.该分析方法具有很好的精密度、重现性和稳定性,各批次间共有峰的相对保留时间的RSD均小于1%,相对峰面积符合指纹图谱相关要求.结论建立的指纹图谱检测标准可以作为白术质量评价和品种鉴别的主要依据之一.; 于超阳勇刘世尧白志川张小梅王婷婷; 关键词：白术高效液相色谱指纹图谱

川丹皮药材HPLC色谱指纹图谱研究被引量：9: 2006年; 目的：应用HPLC法建立规范化种植药用牡丹皮的指纹图谱，为丹皮药材的质控提供依据。方法：以丹皮酚为参照物，采用SHIMADZUVP．DDSC18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；以甲醇-水（0％～100％）连续梯度洗脱，流速1mL／min；在242nm波长下检测。测定10批药材的指纹图谱。结果：丹皮药材有11个共有峰，多数峰都可以达到较好分离。该分析方法具有很好的精密度、重现性和稳定性，各批次间共有峰的相对保留时间的RSD均小于2％，相对峰面积的RSD符合指纹图谱相关要求。结论：建立的指纹图谱检测标准，可以作为丹皮质量评价和品种鉴别的主要依据之一。; 于超刘世尧范俊安白志川阳勇张小梅; 关键词：牡丹皮高效液相色谱指纹图谱

影响共聚焦荧光法检测单细胞中蛋白表达的因素探讨: 2009年; 采用免疫荧光技术联合共聚焦技术研究不同培养细胞中蛋白的表达及定位.结果发现:①同样以丙酮固定293细胞,不用0.5%Triton X-100处理,着丝粒蛋白E亚型(CENP-E)在分裂期细胞核周浓聚,核内未见;而用0.5%TritonX-100处理后,CENP-E呈散点状分布于分裂期细胞的核内.②分别以甲醇、95%乙醇和4%多聚甲醛固定并以1%TritonX-100处理k562细胞,不同固定剂处理组间结果无明显差异,信号转导与转录激活因子(STAT3)均定位于胞浆.共聚焦系统PMT=511时,显示胞核染色适中,核仁染色明显,而PMT=593时,整个核呈饱和染色状,微细结构不清楚.③以2%甲醛联合0.5%TritonX-100处理平滑肌细胞,固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)在整个细胞中呈弥散性分布,核内含量较高,高尔基体上SCAP无特异性高表达.结论:是否使用TritonX-100处理对293细胞中核蛋白CENP-E的定位具有较大影响;k562细胞对醛类固定剂及醇类固定剂无特殊选择性,图片采集时共聚焦参数PMT对蛋白定位结果也有影响;醛类固定剂和Triton联用可准确定位SCAP在平滑肌细胞中的表达.; 修芸王应雄于超; 关键词：激光共聚焦蛋白定位固定剂

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重庆市自然科学基金(7351)