广州市科技计划项目(2008J1-C251-2)
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 相关作者：王小兰刘顺枝唐馨杨礼香张美更多>>
- 相关机构：广州大学新疆大学中国科学院华南植物园更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目国家自然科学基金广州市属高校科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- OsWRKY79基因克隆和植物表达载体的构建
- 2011年
- WRKY是植物体中重要的转录因子,克隆水稻OsWRKY79基因将为其在植物体内的定位和功能研究奠定基础。根据GenBank公布的OsWRKY79基因序列设计特异引物,以RT-PCR法从水稻幼苗中克隆OsWRKY79基因,将其亚克隆至含有GFP基因的pBinGFP表达载体中,经菌落PCR和酶切鉴定,成功构建了重组质粒pBinGFP-OsWRKY79。
- 唐馨刘忠渊王小兰
- 关键词：绿色荧光蛋白基因克隆
- 八氢番茄红素脱氢酶(Pds)基因果实特异表达载体的构建被引量：3
- 2010年
- 八氢番茄红素脱氢酶(Pds)是番茄红素合成的关键酶,本研究通过PCR法获取pds基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pMD1中,构建了含果实特异表达启动子的pds基因的植物表达载体。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定。结果表明:番茄果实特异性表达pds的重组质粒构建成功;通过农杆菌直接转化技术将其成功转入转化农杆菌LBA4404、EHA105中,为下一步pds在番茄果实中特异表达奠定了基础。
- 刘顺枝孙莉丽杨礼香王小兰
- 关键词：八氢番茄红素脱氢酶果实特异性启动子
- At3g13600截短型蛋白的原核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 拟南芥基因At3g13600编码一种钙调素结合蛋白,序列分析表明,该基因cDNA序列全长1 818 bp,编码一个具有606个氨基酸残基的多肽,推测分子量为68.9 kD;在At3g13600蛋白的N端存在IQ钙调素结合构象.为了从实验上进一步研究该蛋白的钙调素结合特性,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增含IQ序列与否的不同长度的编码区cDNA序列,构建到原核表达载体pET32 a+中.测序结果表明:目的序列已正确克隆到表达载体上,为进一步表达目的蛋白及研究其功能奠定了基础.
- 王小兰周宇彭慧峰刘顺枝田长恩
- 关键词：钙调素结合蛋白表达载体构建
- 八氢番茄红素合成酶(PSY2)基因果实特异表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 八氢番茄红素合成酶是番茄红素合成的关键酶,通过PCR法获取PSY2基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pBI101.2中,构建了果实特异表达启动子的八氢番茄红素合成酶基因植物表达载体。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定。结果表明,番茄果实特异性表达PSY2蛋白的重组质粒构建成功;通过农杆菌直接转化技术将其成功转入转化农杆菌LBA4404、EHA105,为下一步PSY2蛋白在番茄果实中特异表达奠定了基础。
- 刘顺枝朱雪娇杨礼香王小兰
- 关键词：果实特异性启动子
- 水稻OsWRKY78与GFP融合基因的拟南芥转化及亚细胞定位
- 2012年
- [目的]确定OsWRKY78蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY78全序列设计引物,进行OsWRKY78的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY78基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinGFP重组,并对重组载体进行菌液PCR和酶切验证,最后利用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥中,对其亚细胞定位进行研究。[结果]试验克隆得到了pBinGFP-OsWRKY78重组载体,经菌落PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确,其转化到拟南芥中后得到了转基因植株,荧光显微镜检测结果表明,OsWRKY78基因表达产物主要定位在细胞核中。[结论]该研究结果为深入研究OsWRKY78基因的功能及其在相关信号传导中的作用奠定了基础,也为进一步研究OsWRKY78基因与褐飞虱之间的关系提供了理论依据。
- 刘顺枝张美唐馨王小兰
- 关键词：绿色荧光蛋白基因亚细胞定位
- 水稻OsWRKY17基因定位表达载体的构建
- 2012年
- [目的]研究水稻OsWRKY17基因的生理生化特性,确定OsWRKY17蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中Os-WRKY17全序列设计引物,进行OsWRKY17的RT-PCR扩增,克隆了该基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinG-FP重组,将构建正确的表达载体pBinGFP-OsWRKY17通过农杆菌介导的花蕾浸泡法转化到拟南芥中。[结果]经菌落PCR与酶切鉴定表明成功构建了OsWRKY17基因与GFP融合的植物表达载体pBinGFP-OsWRKY17,并成功将OsWRKY17基因整合到拟南芥的基因组中,获得了抗性植株。[结论]OsWRKY17基因表达载体的构建为研究该基因的生理生化特性奠定了基础。
- 王小兰唐馨刘忠渊
- 关键词：GFP基因
- 水稻OsWRKY78与GFP融合基因的拟南芥转化及亚细胞定位(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]确定OsWRKY78蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY78全序列设计引物,进行OsWRKY78的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY78基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP) 基因的质粒载体pBinGFP重组,并对重组载体进行菌液PCR和酶切验证,最后利用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥中,对其亚细胞定为进行研究。[结果]试验克隆得到了pBinGFP-OsWRKY78重组载体,经菌落PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确,其转化到拟南芥中后得到了转基因植株,荧光显微镜检测结果表明,OsWRKY78基因表达产物主要定位在细胞核中。[结论]该研究结果为深入研究OsWRKY78基因的功能及其在相关信号传导中的作用奠定了基础,也为进一步研究OsWRKY78基因与褐飞虱之间的关系提供了理论依据。
- 刘顺枝张美唐馨王小兰
- 关键词：GENEFLUORESCENTGENEVECTORSUBCELLULAR
