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常州市卫生局重大招标项目: 作品数：21 被引量：72H指数：5; 相关作者：罗光华江勇张晓膺蒋敬庭郑璐更多>>; 相关机构：苏州大学附属第三医院常州市第一人民医院瑞典隆德大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省卫生厅面上科研课题常州市社会发展科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

碱基淬灭探针技术单管检测线粒体DNA 12Sr RNA A1555G及C1494T突变被引量：5: 2012年; 目的应用碱基淬灭探针技术建立单管同时检测线粒体DNA12Sr RNA A1555G和C1494T突变的方法。方法探针的一端标记6-羧基荧光素，同时构建4个载体做为扩增模板，分别代表可能的4种基因型组合。对117例耳聋患者外周血标本进行线粒体DNA12Sr RNA A1555G和C1494T突变的检测，同时选取15例样本进行DNA测序，验证所建立方法的可靠性和准确性。结果根据熔解曲线可以清晰地对线粒体DNA12Sr RNA1555位点和1494位点的基因型做出判断。117例耳聋患者中3例携带A1555G突变（2．56％），1494位点未检出突变；基于碱基淬灭探针技术的单管检测方法与DNA测序的结果一致。结论碱基淬灭探针单管检测技术可用于临床线粒体DNA突变耳聋基因检测。; 郑璐罗光华张俊张晓膺徐宁; 关键词：DNA突变分析听觉丧失

不同时间的缺血预处理对脂肪肝缺血再灌注损伤的保护作用被引量：5: 2011年; 目的探讨缺血预处理(IP)对脂肪肝缺血再灌注(IR)损伤的保护作用,以及取得最佳效果的预处理时间。方法通过建立大鼠脂肪肝模型,给予不同时间的IP(5-10、8-10、10-10、15-10 min)和IR(缺血30 min,再灌注30 min),检测血清AST、ALT、LDH及NO水平,肝组织中MDA、SOD、MPO含量的变化和肝脏病理学变化。以脂肪肝未行IP组和正常肝脏未行IP组及正常肝脏行10-10 min IP作对照。结果 IR后,脂肪肝未行IP组血清肝功能的变化、肝组织病理学改变及炎性浸润程度显著重于正常肝脏未行IP组。在脂肪肝组中,5或8-10 min IP组血清学及肝组织MDA、MPO水平低于其余组和未行IP组,而其SOD水平显著升高(P<0.05)。各IP组中的NO水平明显高于其对应的IR组(P<0.05)。脂肪肝IP组中,5或8-10 min IP组血清NO水平明显高于其余组(P<0.05)。结论脂肪变性加重肝脏IR损伤,IP对脂肪肝的IR损伤具有保护作用,本实验认为5～8 min缺血和10 min再灌注的IP方案可能是中重度脂肪肝时的最佳预处理方案。; 汤建军江勇罗光华远博; 关键词：脂肪肝缺血预处理再灌注损伤

谷胱甘肽-S-转移酶P1基因多态性与晚期胃癌患者对顺铂化疗疗效的相关性研究被引量：3: 2011年; 目的基因多态性通过影响药物的代谢、转运和作用靶点从而导致药物疗效和毒性的个体差异,寻找明确的生物学标记来识别获益人群已成为最大的挑战。本研究旨在观察谷胱甘肽-S-转移酶P1(GSTP1)基因多态性与以顺铂(DDP)为基础的化疗方案治疗晚期胃癌疗效间的关系。方法收集经病理学确诊的晚期胃癌患者59例。所有病例化疗前抽取外周静脉血,提取脱氧核糖核酸(DNA),用连接酶检测反应技术(PCR-LDR)检测研究对象的GSTP1基因型。所有患者经多西他赛(DOCETAXEL)/DDP/5-氟尿嘧啶(5-FU)联合方案化疗,化疗结束后观察疗效及其与GSTP1基因多态性的关系。结果 59例晚期胃癌患者中,15例(25.4%)为GSTP1G/G基因型,21例(35.6%)为GSTP1G/A基因型,23例(39.0%)为GSTP1A/A基因型。其中4例完全缓解,14例部分缓解,19例稳定,22例进展,总有效率为30.5%(18/59)。GSTP1G/G基因型患者的化疗有效率(73.3%)明显高于G/A基因型患者(19.0%)(χ2=10.616,P=0.005),同样明显高于A/A基因型患者(13.0%)(χ2=14.202,P=0.001)。G/A基因型患者的化疗有效率与A/A基因型患者之间差异无统计学意义(χ2=0.31,P=0.856)。突变基因型(G/G+G/A)对化疗较敏感,其化疗有效率是野生基因型(A/A)的3.2倍(95%CI1.442～7.302,P=0.004)。结论 GSTP1基因型对预测以DDP为基础化疗方案治疗晚期胃癌的疗效具有较好的临床意义。; 季枚吴昌平蒋敬庭徐斌吴骏赵伟庆张红宇周文杰; 关键词：胃肿瘤谷胱甘肽转移酶顺铂

亚甲基四氢叶酸还原酶C667T基因多态性对以5-氟尿嘧啶为基础化疗的晚期胃癌患者生存期的影响被引量：4: 2013年; 目的观察亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C667T基因多态性与5一氟尿嘧啶（5．Fu）为基础的化疗方案治疗晚期胃癌的疗效。方法收集经病理学确诊的晚期胃癌59例。所有病例化疗前抽取外周静脉血，提取DNA，用连接酶检测反应技术（LDR）检测研究对象的MTHFR基因型。患者均采用经5一Fu为基础的联合化疗方案。结果59例晚期胃癌患者MTHFRrr／T基因型患者的无进展生存期（PFS）明显优于C／C型（8．70个月比5．47个月,X2：9．209，P〈0．01），MTHFRrr／T基因型患者的PFS明显优于C／T型（8．70个月比5．08个月，∥=9．405，P〈0．01），MTHFRC／T基因型患者的PFS与C／C型比较差异无统计学意义（5．47个月比5．08个月,X2=0．092，P〉0．05）。结论MTHFR基因型对预测以5．Fu为基础化疗方案治疗晚期胃癌的疗效有较好的临床意义。; 季枚蒋敬庭徐斌吴骏赵伟庆吴昌平; 关键词：胃癌亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性化学治疗

克罗恩病的免疫调节机制研究进展被引量：3: 2012年; 克罗恩病（CD）是一种不明病因的慢性非特异性、胃肠道肉芽肿性炎症，常累及回肠远端和结肠。其临床表现复杂多样，易误诊、复发率高且预后不良。; 庄耘陈建平蒋敬庭; 关键词：克罗恩病免疫调节机制慢性非特异性肉芽肿性炎症预后不良复发率

不同时间的缺血预处理对肝硬化大鼠缺血再灌注损伤的保护作用被引量：2: 2011年; 目的探讨缺血预处理(IPC)对肝硬化大鼠缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,并寻找对肝硬化I/R保护作用的最佳有效时间窗和理想方案。方法通过构建正常大鼠及肝硬化大鼠模型,以正常肝脏I/R(A组)和正常肝脏10-10 min-IPC方案(B组)为对照组,肝硬化组则分别施行单纯I/R(C组)、5-10 min(D组)、8-10min(E组)、10-10 min(F组)及15-10 min(G组)的IPC方案,每组18只,分别在术后1 h、4 h及24 h三个时间点采静脉血,检测血清ALT、AST、LDH及肝组织中MDA、MPO、NO、SOD水平,评价肝功能及肝脏组织炎性浸润及抗损伤程度。结果肝脏缺血30 min后肝脏功能受损明显,表现为各组的ALT、AST、LDH水平升高,尤以再灌注4 h时显著(P<0.05),但经过缺血预处理后,各IPC组中的NO、MDA、MPO及SOD水平亦显著高于其对应的I/R组,以E组的差别有显著意义(P<0.05)。结论 10-10 min的IPC方案对于正常肝脏I/R确有保护作用,而8-10 min的IPC方案能最有效地启动对肝硬化大鼠肝脏I/R的保护作用。; 远博江勇吴宝强黄伯华屈振; 关键词：肝硬化缺血预处理缺血再灌注损伤

单核苷酸多态性的碱基淬灭探针技术检测方法的建立被引量：13: 2009年; 目的研发建立1种成本低、效率高、操作简便的单核苷酸多态性（SNP）检测技术。方法参照待测SNP所在DNA序列，设计并合成引物及探针。探针的一端标记6-羧基荧光素，依据碱基淬灭荧光的原理，应用PCR技术结合熔解曲线的方法进行SNP分型。同时通过建立检测载脂蛋白M（apolipoprotein M，apoM）基因T-778C多态性位点（rs805296）、磷脂酶A2（PLA2G7，rs1051931和rs1805017）、单核细胞趋化蛋白（MCPI，rs1024611）和L-ficolin（rs3124953、ss32469537、ss32469544和m7851696）等8个多态性位点的方法阐明碱基淬灭探针技术的工作原理；并用DNA测序技术鉴定其准确性。结果8个SNP均只需1对引物和1个单荧光基团标记的探针即可成功进行基因分型，整个实验可在60-90min内完成检测；目的基因不同等位基因的纯合子在2个不同的熔解温度出现熔解曲线谷。4种碱基淬灭探针中G．淬灭探针的最大荧光增加速度[Max（dF／dT）]约为A、T、C淬灭探针的1／2（t=7．569、7．726、10．36，P〈0．01）；一致性Kappa检验显示，4种碱基淬灭探针检测SNP方法与DNA测序技术的检测结果一致（Kappa=1；P=0．00）。结论碱基淬灭探针检测SNP技术简单、快速、准确，适用于大批量基因分型研究。; 张俊罗光华郑璐张晓膺徐宁; 关键词：基因型核酸探针

冠心病患者脂蛋白相关磷脂酶A2基因多态性研究被引量：7: 2009年; 目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H和A379V多态性位点与冠心病遗传易感性的关系。方法采用单荧光标记探针技术检测261例冠心病患者、263例正常对照者脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H和A379V基因型。结果（1）92H等位基因携带者患冠心病的风险是92R等位基因携带者的1．75倍（P〈0．01）；（2）冠心病组中单倍型379A92H的频率分布显着高于对照组（P〈0．01）；（3）Logistic回归分析提示，R92H位点等位基因92H是冠心病的独立危险因素。结论脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与汉族人冠心病遗传易感性独立相关。; 徐敏孙建辉罗光华白江涛柯海燕刘亚平; 关键词：脂蛋白相关磷脂酶A2 基因多态性冠心病

金属硫蛋白2A基因-838G/C多态性与冠心病的关联研究被引量：2: 2009年; 目的:研究中国江苏汉族人群金属硫蛋白2A(Metallothionein2A,MT2A)基因-838G/C多态性与冠心病的关联性。方法:采用单荧光标记探针技术,检测287例冠心病患者和226例健康对照者的MT2A基因-838G/C多态性。结果:MT2A基因-838G/C多态性基因型和等位基因频率分布在冠心病组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。冠心病组MT2A-838C等位基因频率明显高于对照组(31.4%∶24.6%,P=0.016),C等位基因携带者(GC+CC基因型)患冠心病的风险是GG基因型的1.562倍(OR=1.562,95%CI:1.099～2.218,P=0.013),Logistic回归分析显示,携带C等位基因是冠心病的独立危险因素(P<0.05)。冠心病组C等位基因携带者的冠状动脉Gensini积分明显高于非C等位基因携带者(P<0.05)。结论:MT2A基因-838G/C多态性与中国江苏汉族人群冠心病的发生有关联,C等位基因可能是冠心病发病的遗传易感基因,并影响冠状动脉病变的严重程度。; 杨晓宇孙建辉罗光华张国柱徐敏; 关键词：冠状动脉疾病金属硫蛋白多态性单核苷酸

脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与汉族人群冠心病易感性的关系被引量：3: 2008年; 目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与冠心病遗传易感性及冠状动脉病变程度的关系。方法采用单荧光标记探针技术检测261例冠心病患者及263例正常人脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性。结果冠心病组RH基因型和H等位基因频率显著高于对照组(P<0.05和<0.01)。RH基因型、H等位基因人群冠心病风险增高(P均<0.01)。Logistic回归分析显示,R92H多态性是冠心病的独立危险因素(P<0.05)。冠心病组中RH和HH基因型者总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平高于RR基因型者(P<0.05和<0.01),高密度脂蛋白胆固醇水平显著低于RR基因型者(P<0.05)。冠心病组中,RH和HH基因型者多支血管病变率比RR基因型者明显升高(P<0.05)。结论脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与中国汉族人群冠心病相关,携带RH、HH基因型人群发生冠心病风险较高,且与更严重的冠状动脉病变有关。; 徐敏孙建辉罗光华白江涛刘亚平柯海燕; 关键词：内科学脂蛋白相关磷脂酶A2 冠心病冠状动脉病变

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