国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-44)
- 作品数：63 被引量：114H指数：6
- 相关作者：王芳范志宇胡波魏后军薛家宾更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院中国农业科学院蜜蜂研究所扬州大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 青岛市蜜蜂授粉现状与发展前景探讨
- 2022年
- 青岛都市现代农业居全国前列。蜜蜂授粉对农作物增产提质、农业绿色发展具有重要作用,是部分农作物尤其是设施作物生产过程中不可或缺的重要环节。随着现代农业的发展,蜜蜂授粉将在未来授粉市场中占据主导地位。从2018年起,青岛市以构建蜜蜂参与的现代绿色生态农业发展体系为目标,大力发展蜜蜂授粉,笔者通过统计、实地调查等掌握了青岛市蜜蜂授粉现状、存在问题,并提出了对策建议。
- 李培培宋心仿黄晓祝贵华韩婷婷张珍珍刘锡武杨世红王建华
- 关键词：都市现代农业蜜蜂授粉绿色生态农业增产提质农作物
- 蜂胶提取方法研究进展
- 2022年
- 本文在对蜂胶常用的提取方法作简要介绍的基础上,着重介绍了固相萃取、天然低共熔溶剂和高压萃取等三种新型提取方法的特点及其在蜂胶提取中应用的可行性,为寻求适宜的蜂胶提取新方法和建立标准化提供参考。
- 祝梅斐李珊珊胡福良
- 关键词：蜂胶固相萃取
- 不同赖氨酸水平对熊蜂幼年工蜂发育及代谢影响
- 2022年
- 为了解熊蜂饲养和授粉中对氨基酸的营养需求,以18种氨基酸与糖水混合物为试验材料,设置4组不同赖氨酸水平(总氨基酸含量占比分别为0%、2%、4%、6%),研究其对幼年地熊蜂工蜂生长发育及生理代谢的影响。对1日龄工蜂饲喂20 d,记录工蜂死亡数量,测定工蜂胸部肌肉蛋白含量,采用LC-MS代谢组学方法分析工蜂血淋巴中代谢物差异。结果表明,饲粮中赖氨酸为6%时,工蜂胸部肌肉蛋白含量最高,死亡数量最少。代谢组学分析表明,饲粮缺乏赖氨酸组与6%赖氨酸组血淋巴代谢物明显分离,筛选共鉴定出28种差异代谢物,包括氨基酸、嘌呤等。差异代谢物富集分析发现,差异极显著的通路有组氨酸代谢(P<0.01),差异显著的通路有丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、精氨酸生物合成、嘌呤代谢、泛酸和辅酶A生物合成(P<0.05)。综合考虑上述指标,6%赖氨酸处理组的地熊蜂胸肌蛋白含量和寿命更优,但此水平下工蜂血淋巴代谢物组胺、腺苷、腺嘌呤呈下调趋势,因此地熊蜂日粮中赖氨酸比例为4%~6%更适合幼年工蜂的生长发育与生存。揭示了幼年地熊蜂工蜂对赖氨酸需求与胸部肌肉蛋白含量及寿命之间的关系,分析了不同水平赖氨酸对其代谢影响,为熊蜂规模化饲养和授粉应用中的营养补充提供理论依据。
- 郝冬梅樊莹徐进郭岳琴李继莲姚军
- 关键词：赖氨酸
- 家兔γ干扰素基因的原核表达及其表达产物的单克隆抗体的制备
- 2014年
- 将PCR扩增的家兔γ干扰素基因克隆至pET-28a(+)原核表达载体上,构建重组载体pET-28a(+)-IFN-γ。重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导、HisTrap亲和柱纯化,获得IFN-γ重组蛋白。以IFN-γ重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术获得4株抗IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为3H8、4G4、4F10、6C12,它们的亚型分别为IgG1、κ链,IgG2b、κ链,IgG1、κ链,IgG1、κ链。分别制备单克隆抗体腹水,结果,4株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10-4~10-5之间。本试验通过制备抗家兔IFN-γ单克隆抗体,为研究和检测IFN-γ提供了一种重要的工具。
- 彭伟宋艳华胡波范志宇魏后军王芳王芳
- 关键词：家兔Γ干扰素原核表达单克隆抗体
- 应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位被引量：8
- 2012年
- 以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位。将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用ELISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性。结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆;测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列GTDDMDPGTTAA,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序DXXDP为表位中的核心氨基酸;制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔RHDV高免血清也具有较好的反应性。因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性。该研究为RHDV抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料。
- 杨廷亚王芳姜平胡波范志宇魏后军薛家宾
- 关键词：兔出血症病毒单克隆抗体噬菌体展示技术模拟表位
- RHDV VLPs单克隆抗体的制备及其识别表位的初步定位被引量：1
- 2015年
- 为了筛选兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)的特异性单抗,并进一步分析单抗识别表位的分布情况,将重组杆状病毒r Ac V-Bac-VP60接种Sf9昆虫细胞,收获细胞培养物,电镜观察显示重组VP60蛋白获得有效表达,并可组装成病毒样粒子(VLPs)。将RHDV VLPs作为免疫原与等量弗氏佐剂乳化,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经3次亚克隆后,获得11株能稳定分泌抗RHDV VLPs抗体的阳性杂交瘤细胞株。间接ELISA、IFA和Western Blot鉴定结果表明,这11株单克隆抗体均能够特异地识别RHDV VLPs和天然RHDV。11株单抗均为Ig G1,其中1D4和3F7的轻链为Lambda型,其余均为Kappa型。截短表达结果显示,单抗5A3针对RHDV VP60的NTA区,5F3针对RHDV VP60的S区,单抗1B8、1D4、3D11、3F7、4C2、4G2、5G2、5H3和6B2针对RHDV VP60的P区。研究为RHDV VLPs抗原表位的鉴定和RHDV结构功能的研究奠定了基础,同时为RHDV的检测和新型疫苗研究提供物质基础。
- 宋艳华胡波范志宇彭伟魏后军薛家宾徐为中王芳
- 关键词：RHDVVLPS单克隆抗体表位
- 太湖流域中蜂简约式养殖技术解析(五)——供蜂蜂场人工育王管理技术要点
- 2023年
- 前几期所介绍的“太湖流域中蜂简约式养殖技术”中关于“购蜂育王、繁蜂取蜜、售蜂授粉”的方法与技巧,重点针对阶段性饲养的业余养殖户。本期将着重介绍全年饲养中,售蜂后供蜂蜂场的管理,主要包括蜂王的培育与使用。每年1月底,蜂农在利用中蜂完成枇杷蜜生产后,售卖约90%蜂群为大棚草莓授粉,选留10%作为组织育王群的核心群;3月份进行第一次蜂群繁育,将群体数量增加2~3倍;6月份经第二次繁育至蜂群数量约为核心群10倍。本文以苏州东山金如兴蜜蜂养殖场为例介绍管理供蜂蜂场的核心要素——人工育王及扩繁技术。
- 何敏柯亚露黄峰王伟金如兴孙俊鹏蔺哲广吉挺
- 关键词：人工育王核心群育王群取蜜扩繁技术
- 牡丹江设施草莓蜜蜂授粉技术
- 2023年
- 近年来,随着社会进步和人们生活水平的提高,人们对物质生活的追求也越来越高,绿色、环保的消费理念被越来越多的人所追求和崇尚。休闲农业、观光农业成为当今时代背景下顺理成章的一种自然选择[1]。草莓(Fragaria gracilis Losinsk.)属蔷薇科草莓属多年生草本植物,草莓果实鲜红美艳,柔软多汁,营养丰富,果实中含有丰富的维生素B1、B2、C以及钙、磷、铁、钾、锌、铬等人体必需的矿物质和部分微量元素,同时还含有大量的糖类、蛋白质、有机酸等营养物质,是老幼皆宜的上乘水果,被誉为“水果皇后”[2]。对便秘、高血压、糖尿病及结肠癌均有很好的辅助治疗作用[3]。
- 潘春磊陶靓张致豪吕洋王静吕云岭高夫超
- 关键词：设施草莓多年生草本植物草莓属蜜蜂授粉技术辅助治疗作用观光农业
- 西方蜜蜂采集蜂上颚腺中高表达基因的筛选与表达分析
- 2022年
- 【目的】本研究旨在筛选西方蜜蜂Apis mellifera采集蜂上颚腺中高表达基因,为进一步筛选和研究蜜蜂采集行为相关基因提供依据。【方法】基于前期测序的西方蜜蜂5种不同职能工蜂(3日龄工蜂、10日龄哺育蜂、10日龄采集蜂、21日龄哺育蜂和21日龄采集蜂)上颚腺转录组数据,筛选采集蜂上颚腺的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对这些DEGs进行GO和KEGG分析;qRT-PCR检测随机选取的8个DEGs在10日龄哺育蜂和10日龄采集蜂上颚腺以及两个关键DEGs(Δ-1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因Amp5cs和细胞色素P4509e2基因CYP9Q 3)在工蜂不同发育时期和采集蜂各组织中的表达量。【结果】筛选到22个DEGs在21日龄采集蜂上颚腺中的表达量显著高于在3日龄工蜂、10日龄哺育蜂和21日龄哺育蜂上颚腺中的表达量,同时在10日龄采集蜂上颚腺中的表达量也显著高于在10日龄哺育蜂上颚腺中的表达量。GO和KEGG富集分析显示这些DEGs主要富集在胆固醇代谢、半乳糖代谢、淀粉和蔗糖代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、细胞凋亡-果蝇、氨基酸生物合成等方面。qRT-PCR结果表明,8个DEGs(LOC100576395,LOC411983,LOC410235,LOC725581,LOC410527,LOC406131,LOC408453和LOC410253)的表达模式与转录组数据的表达模式一致;2个关键DEGs Amp5cs和CYP9Q 3在工蜂各发育阶段均有表达,且在采集蜂中表达量最高;Amp5cs在采集蜂腹、胸、上颚腺和触角中高量表达,P4509e 2在采集蜂触角和足中表达量显著高于在其他组织中的。【结论】本研究在减小日龄因素干扰下筛选了西方蜜蜂采集蜂上颚腺中22个高表达的DEGs,这些DEGs可能主要参与采集蜂上颚腺生理发育以及能量供应、外源性物质解毒、花蜜转化等代谢通路,进而影响蜜蜂的采集行为。这些结果为西方蜜蜂上颚腺的功能研究提供理论参考,同时也为采集力强的新品种培育奠定了基础。
- 李秋方高艳梁立强李正汉卿朱雅楠张娟杨尚宁傅云熙苏松坤聂红毅
- 关键词：西方蜜蜂
- VP60 loop区的突变对RHDV VLP功能的影响被引量：2
- 2016年
- [目的]从病毒样颗粒（VLP）的形成、血凝特性以及受体组织血型抗原（HBGA）结合特性方面,分析VP60 loop区在兔出血症病毒（RHDV）VLP功能中的作用。[方法]针对RHDV VP60蛋白的loop区411-417位氨基酸对应的基因设计引物,通过SOE法将411-417位氨基酸等量替换成柔性氨基酸GSGGSGG,获得重组基因VP60-411-417,利用杆状病毒表达系统获得重组病毒r Ac-VP60-411-417。将重组病毒接种Sf9细胞,通过IFA、SDS-PAGE和Western blot等方法证明嵌合蛋白P411-417的表达。通过负染透射电镜观察嵌合蛋白VLP的形成,利用血凝试验分析嵌合蛋白的血凝特性,利用合成多糖结合试验分析嵌合蛋白的受体结合特性。[结果]Western blot、IFA和负染透射电镜试验结果显示,嵌合蛋白P411-417得到有效表达,且能够形成完整的VLP;合成多糖结合试验结果显示,嵌合蛋白能够特异性结合HBGA,但其血凝特性消失。[结论]411-417位氨基酸的突变显著影响RHDV的血凝特性,不影响VLP的形成以及结合HBGA的能力,说明该区域是血凝特性的相关位点,但不是HBGA受体结合的关键位点。
- 宋艳华李珊珊王芳胡波范志宇魏后军薛家宾徐为中
- 关键词：重叠延伸PCR嵌合蛋白血凝特性
