武汉市卫生局临床医学科研项目(WX08A04)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
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- 靶向Survivin的小分子干扰RNA对骨肉瘤细胞的体内外抑制作用被引量:2
- 2010年
- 目的 观察靶向Survivin基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体对人骨肉瘤细胞MG-63的体内外抑制作用.方法 体外构建Survivin siRNA表达载体pSilence2.1-neo-Survivin,转染骨肉瘤细胞株MG-63、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学(SP)法检测转染前后Survivin mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡,建立裸鼠移植瘤模型,记录瘤体形成时间及肿瘤生长.结果 转染后MG-63细胞Survivin基因mRNA水平和蛋白表达显著下降,转染后mRAN表达抑制率为85.08%,增殖指数为空白组的28.20% 细胞周期分析显示:shRNA组G0/G1期细胞明显增多,而G2/M期、S期细胞数目减少 吖啶橙染色显示转染组细胞出现明显核碎裂等凋亡改变,转染组凋亡率为24.54% 稳定转染组细胞裸鼠体内致瘤能力降低,转染组成瘤时间为(13.2±2.0)d,空白组为(6.5±1.6)d,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).4周时同空白组相比转染组瘤体体积小62.89%(P<0.01),重量轻59.07%(P<0.01).结论 靶向Survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制骨肉瘤细胞MG-63增殖,促进细胞凋亡 明显抑制人骨肉瘤细胞的致瘤活性及裸鼠移植瘤的生长.
- 李鲲马德彰勘武生李鹏肖军王威
- 关键词:骨肉瘤裸鼠移植瘤