广州市科技计划项目(11C22060787)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 高糖诱导人视网膜血管内皮细胞脯氨酸羟化酶2表达变化和对内皮细胞屏障功能的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察高糖诱导人视网膜血管内皮细胞（HRECs）脯氨酸羟化酶2（PHD2）的表达变化和对内皮细胞屏障功能的影响。方法将培养至融合的HRECs分为三组，分别为正常对照组、甘露醇对照组与高糖组。正常对照组细胞培养液含5mmol／L葡萄糖，甘露醇对照组细胞培养液含5mmol／L葡萄糖和25mmol／L甘露醇，高糖组细胞培养液含30mmol／L葡萄糖。培养24、48h后收集细胞蛋白、上清液及RNA。蛋白免疫印迹法检测细胞PHD2、缺氧诱导因子la（HIF－1a）及紧密连接蛋白occludin的蛋白表达水平；酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中血管内皮生长因子（VEGF）的含量；实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞PHD2、HIF－1a、VEGF及occludin基凶的转录水平；相对分子质量7×104的异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖检测细胞旁通透性。结果与正常对照组相比，甘露醇对照组与高糖组HRECs中PHD2蛋白表达水平均先降低后升高，HIF-1a表达升高，occludin表达降低；高糖组细胞上清液中VEGF含量增加，差异均有统计学意义（PHD2：F=7．618、8．627，P〈0．05；HIF-1a：X2=7．692、7．652，P〈0．05；occludin：F=23．23、7．317，P〈0．05；VEGF：F=10．768、4．562，P〈0．05）。与正常对照组相比，甘露醇对照组与高糖组HRECs的PHD2、HIF-1a、VEGF及occludin基因转录水平升高，差异均有统计学意义（PHD2：F=5．69、14．27，P〈0．05；HIFla：F=6．07、10．47，P〈0．05；VEGF：F=12．31、9．14，P〈0．05；occludin：F=8．77、8．00，P〈0．05）。与正常对照组相比，甘露醇对照组与高糖组细胞旁通透性增加，差异有统计学意义（X2=20．57、F=56．09，P〈0．05）。结论高糖诱导HRECsPHD2表达发生变化。PHD2可能在内皮细胞屏障破坏中发挥一定的调控作用，其机制与HIF-1a、VEGF有关。
- 梁小玲魏丽清周焕娇孙刚杨诚张熙芳杨璐林佩蓉
- 关键词：血管内皮生长因子类动物实验
- 脯氨酰羟化酶在糖尿病大鼠视网膜的表达及其意义被引量：1
- 2012年
- 目的观察探讨糖尿病（DM）大鼠视网膜组织中脯氨酰羟化酶（PHI）12）的表达及意义。方法雄性Wistar大鼠108只，随机分为DM模型组和正常对照组，分别为60、48只。对DM模型组大鼠进行一次性腹腔注射1％链脲霉素枸橼酸（STZ）溶液建模，正常对照组腹腔注射等量的枸橼酸缓冲液。造模后1、3、6个月，荧光显微镜下观察大鼠视网膜血管分布形态。造模后1～6个月，采用伊凡思蓝（EB）灌注视网膜铺片检测视网膜组织内EB浓度；免疫组织化学染色法观察大鼠视网膜PHD-2阳性染色的分布特点；蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测大鼠视网膜中PHD-2、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果荧光显微镜观察结果显示，正常对照组大鼠视网膜血管走行规则，浅深层血管形态清晰；DM模型组大鼠视网膜血管渗漏持续存在。造模后1～6个月，DM模型组大鼠视网膜血管外组织内EB含量较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（t=3．810，2．722，2．845，2．342，2．456，3．823；P〈0．05）。免疫组织化学染色结果显示，DM模型组及正常对照组大鼠视网膜中均可见PHD-2阳性染色，主要分布于视网膜内核层、神经节细胞层及血管壁。Westernblot检测结果显示，DM模型组大鼠视网膜中PHD-2表达在造模后1、2个月时较正常对照组下降（t=16．230，16．390；P〈0．05）；HIF-1α表达在造模后1、2、3个月时较正常对照组明显升高（t=27．073，36．709，10．176；P〈0．05）；VEGF表达在造模后1～6个月均较正常对照组升高（t=13．547，31．984，21．897，8．912，9．019，14．046；P〈0．05）。结论PHD-2在DM大鼠视网膜组织中有丰富表达。PHD-2可能在糖尿病视网膜病变发生发展中有一定的调控作用，其作用途径及机制与VEGF作用通路有关。
- 梁小玲孙刚陈方周焕娇魏丽清杨诚丁运刚张熙芳
- 关键词：动物实验
- von Hippel-Lindau病伴视网膜毛细血管瘤的长期随访被引量：1
- 2014年
- [目的]探讨伴有视网膜毛细血管瘤的von Hippel-Lindau（VHL）病患者的长期预后.[方法]对9例伴有视网膜毛细血管瘤的VHL病患者进行长期随访,观察其眼部及其他系统病变.[结果]随访8～11年,平均9.1年.随访末期所有患者视网膜毛细血管瘤均双眼受累,共18眼,治疗前与随访末期最佳矫正视力不变的有12眼（66.7％）,提高1眼（5.6％）,下降5眼（27.7％）.随访末期5例（56.6％）合并肾肿瘤,5例（56.6％）合并中枢神经系统血管母细胞瘤,2例因肾细胞癌死亡.[结论]伴有视网膜毛细血管瘤的VHL病患者中,眼部视网膜毛细血管瘤病变经早期及时治疗远期效果稳定,中枢神经系统血管母细胞瘤和肾肿瘤是常见的其他系统病变,肾肿瘤的远期预后不良.VHL病的处理需要早期发现,多学科合作,规范随访,及时治疗.
- 黄永盛刘荣娇于珊珊高艺梁小玲
- 关键词：视网膜毛细血管瘤随访研究
