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国家重点基础研究发展计划(2006cb500700): 作品数：65 被引量：156H指数：5; 相关作者：汪华侨唐北沙郭纪锋严新翔陈生弟更多>>; 相关机构：中南大学中山大学上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术哲学宗教更多>>

应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应检测常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征的parkin基因外显子重排突变被引量：5: 2009年; 目的建立应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应（Real—time PCR，RT—PCR）检测parkin基因外显子重排突变的技术平台，应用该技术对常染色体隐性遗传早发型帕金森综合征（autosomal recessive early—onset parkinsonism，AREP）家系进行parkin基因外显子重排突变分析。方法应用SYBR Green I RT—PCR技术对32个中国AREP家系进行parkin基因外显子重排突变分析。结果14个家系先证者存在parkin基因外显子重排突变，其中3个为纯合缺失突变、3个为复杂杂合缺失突变和8个杂合缺失突变，未发现外显子重复突变，突变主要累及第2～4号外显子。结论建立了应用SYBR Green IRT-PCR技术检测parkin基因外显子重排突变的基因检测平台；中国AREP家系的parkin基因外显子重排突变频率为43．8％，与国外报道相似。; 聂利珞郭纪锋张海南张学伟王磊沈璐江泓夏昆唐北沙严新翔; 关键词：帕金森障碍有机化学品

老年性痴呆的蛋白质组学研究进展被引量：4: 2007年; 蛋白质组学是全景式研究蛋白质网络及其动态变化的一门新兴科学,其研究成果为疾病临床诊断、发病机制等提供了理论依据和技术基础。双向电泳技术、质谱技术和生物信息学是蛋白质组学的三大支撑技术。本文阐述了蛋白质组学在老年性痴呆患者脑脊液、脑组织、外周血中的研究进展,重点阐述其在探索发病机制、寻找诊断标志物等方面的应用。; 任美峰范海虹汪华侨; 关键词：老年性痴呆双向电泳技术发病机制生物信息学诊断标志物

过表达OGCP对鱼藤酮和突变型Parkin致HEK293细胞毒性的保护作用: 2010年; 目的研究α-酮戊二酸载体蛋白(2-oxoglutarate carrier protein,OGCP)和Parkin对HEK293细胞功能的影响。方法采用流式细胞术检测经鱼藤酮、OGCP和/或Parkin处理的HEK293细胞细胞凋亡、线粒体膜电位和细胞内活性氧水平。结果①野生型Parkin和OGCP能够提高经鱼藤酮诱导的HEK293细胞的线粒体膜电位,降低细胞内活性氧和细胞凋亡率,而突变型Parkin(R42P和T240R)则降低HEK293细胞尤其是经鱼藤酮诱导的HEK293细胞的线粒体膜电位,增加细胞内活性氧,促进细胞凋亡;②此外,还发现OGCP可以抑制由于Parkin突变(R42P和T240R)导致的线粒体膜电位降低和活性氧增加,减少Parkin突变(R42P和T240R)导致的细胞凋亡。结论①Parkin蛋白和OGCP可能与维持线粒体正常功能相关;②过表达突变型Parkin(R42P和T240R)蛋白可能抑制线粒体功能,促进细胞凋亡;③过表达OGCP可能对鱼藤酮和突变型Parkin蛋白细胞毒性有一定的保护作用。; 王春喻唐北沙张海南汤建光郭纪锋严新翔谭利明; 关键词：PARKIN

帕金森病相关蛋白的作用研究进展: 2006年; 帕金森病（Parkinson disease，PD）是第二常见的神经变性疾病。其主要临床特征是静止性震颤、肌强直、运动减少和姿势平衡障碍等；主要病理改变是中脑黑质多巴胺能神经元进行性变性坏死，残存神经元中Lewy小体形成。5～10％帕金森病患者有家族史。虽然，大部分帕金森病病例为散发型，但阐明家族性帕金森病的分子机理对于整个帕金森病发病机制的研究有着重大的意义。本文就目前已经明确的帕金森病相关蛋白的作用机理作一综述。; 肖彬郭纪峰唐北沙; 关键词：家族性帕金森病相关蛋白中脑黑质多巴胺能神经元神经变性疾病姿势平衡障碍静止性震颤

阿尔茨海默病免疫异常及Aβ免疫应答功能的调节被引量：2: 2006年; 近年研究表明免疫功能异常与阿尔茨海默病(AD)的发生密切相关,免疫炎症机制在AD发生发展过程中具有重要作用。来自实验及临床的研究资料提示AD动物模型及AD患者的体液免疫反应和细胞免疫反应功能异常。AD患者与健康同龄老人血清和脑脊液中T细胞、B细胞及细胞因子等出现明显差异。本文就AD发病的免疫异常机制和AD的特异性细胞免疫、体液免疫及细胞因子进行综述,并简要概述β淀粉样蛋白免疫应答功能的调节。; 郑敏汪华侨; 关键词：阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白体液免疫细胞免疫

hTERT基因转染对人胚胎大脑皮质神经元生长的影响被引量：7: 2008年; 目的观察hTERT基因转染后对人胚胎大脑皮质神经元生长活力的影响。方法制备pSU-CMV-hTERT腺病毒,以MOI感染人胚胎大脑皮质神经元。免疫细胞化学荧光染色观察神经元内hTERT表达。MTT法测量接种病毒后24h、72h、1周、2周、3周的神经元活力。结果经鉴定正确的重组质粒pSU-CMV-hTERT与骨架质粒正确重组,经包装扩增后得到含hTERT基因的腺病毒。病毒转染24h时荧光染色可见神经元内有hTERT表达,第3周末表达减弱。hTERT基因转染后的神经元平均活力较对照组高,转染病毒后24h、72h、1周、2周、3周,hTERT基因转染对神经元的保护率分别为27.4%、42.4%、17.3%、7.4%和15.9%。结论hTERT基因转染对人胚胎大脑皮质神经元有一定的保护作用。; 张洁廖亚平吴灵芝孔令平郑敏汪华侨; 关键词：端粒酶大脑皮质神经元

脊髓小脑性共济失调14型的研究进展: 2008年; 脊髓小脑性共济失调14型（spinocerebellar ataxia 14，SCA14）是一种常染色体显性遗传的神经系统退行性疾病，表现为共济失调、构音障碍、眼球震颤等，其致病基因——蛋白激酶Cγ基因（PRKcG）已被定位及克隆，并已证实PRKCG点突变而非核苷酸重复突变。; 易继平唐北沙; 关键词：脊髓小脑性共济失调神经系统退行性疾病常染色体显性遗传蛋白激酶C 构音障碍眼球震颤

线粒体DNA缺失细胞（ρ^0细胞）的构建与鉴定被引量：3: 2010年; 目的探讨构建线粒体缺失细胞(ρ0细胞)的方法,为后继研究提供细胞模型。方法采用5μg/mL和7.5μg/mL两种浓度溴化乙锭持续作用于SH-SY5Y细胞构建线粒体缺失细胞,透射电镜观察和PCR法鉴定。结果 SHSY5Y细胞经过7.5μg/mL溴化乙锭持续作用95d后可见细胞线粒体肿胀变圆,基质消失,变成只剩外壳的"鬼影样"结构,线粒体嵴极少且变形;mtDNAPCR扩增未见目的条带。结论成功构建线粒体缺失细胞,为后继研究奠定细胞模型基础。; 刘妍孔令平陈胜国汪华侨; 关键词：溴化乙锭线粒体

18/19F-PET药物自动化合成模拟实验的教学实践被引量：1: 2017年; 放射性药物是PET显像的核心技术之一，其制备过程要求快速、高效、自动化完成。随着PET技术的快速推广，各国对放射性药物专业人才的需求不断增加。为培养本科生对放射化学应用技术的兴趣、普及放射性药物知识，在国家973、863项目资助下，将科研成果转化为教学实践：自2012年起，开设“本科生综合设计实验”课程——18／19F-PET药物自动化合成模拟实验，在自行研制的具有模拟合成PET药物功能、便于拆装的Synth8型自动化合成装置上完成教学实验，并利用TLC和LC-MS／MS方法定性和定量分析产物。本课程与当前放射性药物的实际应用紧密结合，将最新科研成果转化为教学实践，有助于拓展大学生科研思路，培养科学素养，提升科研能力。; 姚新月张利芳曹建花张岩乔晋萍李崧朱霖; 关键词：自动化合成 LC-MS/MS

应用实时荧光定量PCR技术检测常染色体隐性遗传性早发型帕金森综合征的DJ-1基因外显子重排突变被引量：1: 2010年; 目的:建立应用实时荧光定量PCR技术(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测DJ-1基因外显子重排突变的技术平台,并应用该技术对常染色体隐性遗传性早发型帕金森综合征(autosomal recessive early-onset Parkinsonism,AREP)DJ-1基因进行外显子重排突变分析。方法:应用实时荧光定量PCR分析方法,对22个AREP家系先证者和30个正常对照的DJ-1基因进行外显子重排突变分析。结果:本研究中获得了扩增效率和特异性均满意的DJ-1基因各编码外显子实时荧光定量PCR反应条件及各外显子引物;本组AREP患者未发现DJ-1基因的外显子重排突变。结论:建立了应用实时荧光定量PCR技术进行DJ-1基因外显子重排突变检测的技术平台;中国人群AREP患者DJ-1基因外显子重排突变可能罕见。; 张海南肖彬聂利珞郭纪锋王春喻王磊何丹严新翔唐北沙; 关键词：DJ-1基因实时荧光定量PCR

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