国家高技术研究发展计划(2006AA108447)
- 作品数：4 被引量：42H指数：3
- 相关作者：王鸣华施海燕李波叶永浩王俊东更多>>
- 相关机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程生物学医药卫生更多>>
- 联苯菊酯酶联免疫吸附分析方法研究被引量：32
- 2008年
- 建立了定量测定联苯菊酯的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA)。利用联苯菊酯的代谢物联苯醇合成了联苯菊酯的半抗原LBc(2-甲基-3-苯基苄基氧基羰基丙酸)和LBy(2-甲基-3-苯基苯甲酸)。通过碳二亚胺法将LBc交联于牛血清蛋白(BSA)作为免疫抗原(LBc-BSA),通过活泼酯法将LBc和LBy分别交联于卵清蛋白(OVA)作为包被抗原(LBc-OVA和LBy-OVA),LBc-BSA为免疫原制备了联苯菊酯的兔抗血清,间接非竞争酶联免疫吸附分析方法测得其效价达5.12×104。通过同源异源分析,发现异源分析的灵敏度较高,对pH值、离子强度、甲醇含量等影响因素进行了研究,0.3mol/L钠离子强度的磷酸缓冲液(pH7.5)和30%的甲醇确定为联苯菊酯间接竞争酶联免疫吸附分析方法的最佳工作条件,该方法的IC50为2.16±0.32mg/L,检出限(LDL)为0.016±0.002mg/L。对大部分拟除虫菊酯,如三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯和拟除虫菊酯的代谢物3-苯氧基苯甲酸没有明显的交叉反应。
- 李波施海燕王鸣华
- 关键词：联苯菊酯多克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 精恶唑禾草灵酶联免疫吸附分析方法研究被引量：8
- 2009年
- 建立了测定精恶唑禾草灵的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),合成了精恶唑禾草灵的半抗原精恶唑禾草酸(hapten)。通过碳二亚胺法将精恶唑禾草酸交联于牛血清蛋白(BSA)作为免疫抗原,通过活泼酯法将精恶唑禾草酸交联于卵清蛋白(OVA)作为包被抗原,Hapten-BSA为免疫原制备了精恶唑禾草灵的兔抗血清,间接非竞争酶联免疫吸附分析方法测得其效价达1.024×105。确定了0.3mol/LNa+强度的磷酸盐缓冲液(pH7.5)和10%的甲醇为精恶唑禾草灵间接竞争酶联免疫吸附分析方法的最佳工作条件。本方法的IC50为(0.084±0.012)mg/L,检出限(IC10)为(0.0064±0.002)mg/L。对大部分芳氧苯氧基丙酸酯类除草剂,如精喹禾灵、氰氟草酯、高效吡氟甲禾灵没有明显的交叉反应,对于恶唑酰草胺有一定的交叉反应,这与两者的结构有关。
- 王俊东施海燕叶永浩王鸣华
- 关键词：精恶唑禾草灵多克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 氯氟氰菊酯及其代谢物的人工抗原合成与多克隆抗体的制备被引量：3
- 2007年
- 于氟氰菊酯分子的酸部分连接4-氨基丁酸间隔臂(HCA1)、醇部分连接丁二酸酐间隔臂(HCB2),分别合成了两种不同的半抗原,通过碳二亚胺法将HCA1和HCB2分别与牛血清蛋白(BSA)偶联制备了人工抗原HCA1-BSA和HCB2-BSA,通过混合酸酐法将HCA1、HCAS[3-(2-氯-3,3,3-三氟丙烯基)-2,2-二甲基环丙烷羧酸]和HCB2分别与卵清蛋白(OVA)偶联制备包被抗原,两种人工抗原通过免疫新西兰大白兔制备相应的多克隆抗体。结果表明,用HCA1-BSA获得的多克隆抗体对氯氟氰菊酯和氯氟氰菊酸有免疫反应性(IC50值分别为33.12和0.95mg/L),用HCB2-BSA获得的多克隆抗体对氯氟氰菊酯几乎没有免疫反应性。
- 李波施海燕王鸣华
- 关键词：人工抗原多克隆抗体氯氟氰菊酯酶联免疫吸附测定法
- 乙草胺的酶联免疫吸附分析技术被引量：3
- 2011年
- 为检测环境和农产品中乙草胺的含量,建立间接竞争酶联免疫检测法（ELISA）。以乙草胺和3-巯基丙酸为原料合成半抗原,与牛血清蛋白偶联制备免疫原,免疫新西兰大白兔获得了多克隆抗体;以间接竞争性ELISA法（ic-ELISA）考察了多克隆抗体的特异性并优化了影响该方法的3种因素（甲醇浓度、离子强度和pH值）;在此基础上测定了乙草胺在多种基质中的添加回收率。结果显示：该方法具有很高的灵敏度和很强的特异性,最低检测限为0.024 4 mg/L,与结构相似的农药无明显交叉反应;在自来水、田水、土壤、玉米和大豆样品中的添加浓度为0.5~10.0 mg/L或0.1~1.0 mg/kg,回收率为73.2%~117.6%,变异系数为1.7%~9.2%,符合农药残留分析要求。优化的ELISA检测方法适合环境和农产品中乙草胺的检测。
- 余鹏敏施海燕王鸣华
- 关键词：乙草胺半抗原多克隆抗体ELISA
