上海市教育委员会创新基金(09YZ90)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：高同斌陈方马晓荣周君梅张胜利更多>>
- 相关机构：上海交通大学附属儿童医院上海交通大学上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会创新基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
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- 人羊水来源干细胞以类胚体样结构形式向心肌样细胞分化的可行性被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨人羊水来源干细在体外以类胚体形式向心肌样细胞分化的可行性.方法 在B型超声引导下穿刺抽得孕中期羊水,体外分离、培养得到羊水来源干细胞.取第四代细胞消化计数,悬滴法培养5d后,采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测干细胞相关mRNA表达情况；更换诱导培养液以贴壁培养方法诱导类胚体细胞向心肌样细胞分化2周.RT-PCR、免疫荧光染色方法鉴定心肌细胞特异mRNA及蛋白的表达.结果人羊水来源干细胞体外悬滴培养后24h即可形成类胚体样结构；类胚体样结构直径随培养时间逐渐增大,第5天时,类胚体样结构平均直径为（237.3±26.7）μm,形成率为93.5％；RT-PCR检测到干细胞相关mRNA表达；类胚体形式下,经诱导后,免疫荧光染色检测类胚体中羊水来源干细胞表达心肌细胞部分表型：肌结蛋白（Desmin）、肌钙蛋白Ⅰ（TnⅠ）和横纹肌辅肌动蛋白（α-Actinin）；RT-PCR检测类胚体中羊水来源干细胞表达心肌细胞相关mRNA：肌结蛋白（Desmin）、肌动蛋白（α-Actin）、肌钙蛋白I（TnⅠ）、肌钙蛋白T（Tn T）、T-box、NK2.5.而对照组呈阴性.结论人羊水来源干细胞体外悬滴培养后可形成形态均一的类胚体样结构.5-氮杂脱氧胞苷（5-Aza）能诱导类胚体样结构中的羊水来源干细胞向心肌样细胞分化.
- 马晓荣谢华张胜利高同斌王雪尚亚峰周君梅陈方
- 关键词：干细胞心肌细胞分化
- 膀胱组织工程中平滑肌种子细胞来源的研究进展被引量：1
- 2010年
- 近年来,组织工程学的蓬勃发展为膀胱替代提供了崭新的思路.其中种子细胞是组织工程膀胱构建及应用研究中的首要环节和基本要素之一.构建膀胱组织工程平滑肌的种子细胞有平滑肌细胞、平滑肌祖细胞、胚胎干细胞和各种组织来源的成体干细胞如骨髓来源干细胞、羊水来源干细胞、脂肪来源干细胞等.对膀胱组织工程学种子细胞来源的研究现状进行回顾,并对其研究前景作一展望.
- 高同斌马晓荣周君梅陈方
- 关键词：平滑肌干细胞分化膀胱
- 人羊水来源干细胞与生物可降解材料体内外复合培养构建组织工程膀胱平滑肌被引量：1
- 2011年
- 目的探讨体外高效地诱导人羊水来源干细胞向平滑肌样细胞的分化，评估细胞与聚羟基乙酸（PGA）支架复合物的生物相容性，由此探讨该复合物用于组织工程膀胱平滑肌重建的可行性。方法孕中期B超引导下穿刺抽取羊水，体外分离挑选原代人羊水来源的干细胞（hAFCSCs），取第三代细胞用肌源性生长因子（PDGF-BB）和转化生长因子β1（TGF-β1）和左旋维生素C（LAA）在体外分别诱导分化3周、4周和5周，然后光镜下观察诱导后细胞生长的形态变化，免疫荧光细胞染色和RT-PCR检测平滑肌细胞的标志物。取第四代人羊水来源干细胞种植到非编织PGA材料上，体外诱导培养4周后移植到裸鼠背部皮下，4周后取材进行体内外种植效果的评价。结果hAFC-SCs体外增殖能力强，RT-PCR、免疫荧光细胞染色显示经诱导的hAFCSCs表达平滑肌细胞的标志物平滑肌肌动蛋白（a—SMA），肌钙蛋白（CALP），平滑肌22a（SM22a）和肌球蛋白重链（MHC）。PGA支架上的hAFCSCs在种植4h后开始正常贴附、生长和增殖，细胞形态良好。扫描电镜显示hAFC—SCs紧密贴附到PGA支架材料上并分泌细胞外基质，冰冻切片免疫荧光染色显示组织块中表达平滑肌细胞的标志物。结论hAFCSCs能在肌源性生长因子（PDGF-BB和TGF-β1）和左旋维生素C（L-AA）的诱导作用下高效地分化为平滑肌样细胞。复合hAFCSCs的PGA支架体外具有良好的生物相容性及体内较好的组织相容性，表明以hAFCSCs为种子细胞、PGA为支架构建组织工程膀胱平滑肌具有可行性。
- 高同斌马晓荣张胜利谢华周君梅陈方
- 关键词：羊水干细胞
