国家自然科学基金(31001066)
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
- 相关作者：何孔旺李彬温立斌倪艳秀张雪寒更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院华中农业大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 我国长江流域PRRSV ORF3基因的遗传变异分析被引量：3
- 2011年
- 为了确定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点及变异规律,本研究首次对从2006年以来我国长江流域分离到的29株PRRSV的ORF3基因进行了克隆和序列测定,并与国外代表毒株和国内的高致病性PRRSV进行了比较分析。结果表明:所有分离毒株的ORF3基因均编码254个氨基酸,都属于美洲型PRRSV,推导的氨基酸同源性为84.6%～100%,与美洲型PRRSV VR-2332的同源性为85.0%～97.2%;与国内分离的高致病性PRRSV的同源性为86.6%～100%。根据ORF3基因的遗传进化分析,这些毒株可分为两个亚群,毒株HZ24与VR-2332及疫苗株亲缘关系较近,其他分离株与高致病性PRRSV处在同一进化分支。同时,该基因编码蛋白的抗原表位和抗原性也发生了变化。
- 李彬何孔旺温立斌茅爱华王小敏张雪寒倪艳秀周俊明肖少波陈焕春
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因抗原分析
- 断奶仔猪多系统衰竭综合征中多病原混合感染的流行病学调查被引量：3
- 2012年
- 根据GenBank上发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus-2,PCV2)基因组序列、猪博卡病毒(Porcine bo-cavirus,PBoV)的VP1、VP2基因序列和TTV1、TTV2的UTR序列设计合成引物,建立了分别用于检测PCV2、PBoV及TTV1、TTV2的PCR方法。应用建立的PCR方法对送检的205份猪血液和组织样品进行PCV2、PBoV、TTV1和TTV2的检测,并对临床病料和健康猪群进行了比较,综合调查了PMWS猪群中多病原混合感染的情况。试验结果表明,PCV2、PBoV、TTV1、TTV2的阳性率分别为:56.59%,38.05%,26.83%,34.63%。其中,较高的混合感染为:PCV2与PBoV(15.61%)以及PCV2与TTV2(16.59%)。表明该地区PBoV和TTV2感染率升高,且混合感染种类复杂,从而为有效预防和控制这些疾病提供了理论依据。
- 李彬马俊杰赵静静何孔旺倪艳秀温立斌张雪寒周俊明
- 关键词：断奶仔猪多系统衰竭综合征流行病学
- 猪博卡病毒NP1基因的克隆与原核表达被引量：17
- 2011年
- 猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为46 kDa的融合蛋白,蛋白表达量较高,而且蛋白以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western Blot结果显示,表达的NP1蛋白能与His抗体发生特异性的免疫反应,表明原核表达的NP1蛋白具有良好的反应原性。
- 李彬毛立何孔旺温立斌茅爱华张雪寒倪艳秀郭容利马俊杰周俊明吕立新俞正玉
- 关键词：克隆原核表达
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)江苏分离株NJGC ORF5基因的克隆及遗传变异分析被引量：2
- 2011年
- 为了分析江苏省流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异特征,采用RT-PCR方法对江苏地区分离的PRRSV NJGC株的ORF5基因进行了克隆和测序,利用DNAstar软件与国内外代表性毒株进行了同源性分析与序列对比,并绘制了系统进化树。结果表明:NJGC株属于美洲型PRRSV,其ORF5基因与美洲型代表毒株VR-2332的同源性为90.5%,与中国的经典毒株CH-1a的同源性为92.5%,与中国高致病性PRRSV毒株的同源性在98.0%以上;进化树分析结果显示,NJGC株和高致病性PRRSV在同一进化分支,推测其属于高致病性PRRSV,且与2006年分离的SY0608有更近的亲缘关系,体现了PRRSV具有一定的地域性。同时,该基因编码蛋白的抗原表位和抗原性也发生了变化。依据序列推断PRRSV NJGC株属于具有明显地域性的高致病性PRRSV。
- 李彬毛立何孔旺刘彦玲温立斌俞正玉茅爱华王小敏张雪寒郭容利周俊明倪艳秀吕立新
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因抗原分析
