国家科技重大专项(2010ZX09401-304-105C)
- 作品数：9 被引量：110H指数：6
- 相关作者：孟宪生包永睿王帅杨欣欣康廷国更多>>
- 相关机构：辽宁中医药大学通辽职业学院中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 余甘子总酚酸和总黄酮配伍抑制肝癌细胞增殖及对免疫功能的调节作用被引量：29
- 2012年
- 目的:观察余甘子总酚酸和总黄酮不同配伍比例对癌细胞的抑制作用及观察对免疫系统的影响。方法:在96孔培养板中,每孔加入100μL(含有5 000个/mL肿瘤细胞)RPMI 1640培养液,采用MTT法观察不同配伍比例的余甘子总黄酮和总酚酸对人肝癌细胞株HepG2的体外抑制作用;将64只小鼠随机分成8组,分别为正常对照组和余甘子总酚酸总黄酮配伍后的给药组,每天ig给药1次,连续9 d,采用MTT法测定小鼠脾淋巴细胞的转化增殖,测定小鼠血清白介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)含量,测定不同配伍比例的余甘子总酚酸和总黄酮的免疫调节作用。结果:MTT法测定的结果均显示,不同比例余甘子总酚酸+总黄酮的配伍,对肝肿瘤细胞的抑制作用明显,其中以总黄酮比总酚酸10∶1(110 mg.L-1∶11 mg.L-1)时抑制率最高,抑制率为60.35%。余甘子总黄酮与总酚酸配伍能促进小鼠脾淋巴细胞增殖,其中每天以总酚酸329.5 mg.kg-1总黄酮228 mg.kg-1对小鼠ig给药组脾淋巴细胞增殖率最高,刺激指数比空白组高了0.786。并且促进小鼠淋巴细胞分泌因子的生成。结论:余甘子总酚酸和总黄酮对肝脏肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,并且能增强机体特异性免疫功能和非特异性免疫功能的作用。
- 朱英环孟宪生包永睿康廷国
- 关键词：抗肿瘤免疫调节
- 薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响被引量：15
- 2014年
- 目的研究薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增值的影响及作用机制初探。方法采用MTT法考察不同给药剂量,不同给药时间下薏苡仁脂肪酸类成分对SMMC-7721细胞的增值抑制作用及其与时间、剂量的关系;碘化丙啶PI单染色法检测薏苡仁脂肪酸作用后,SMMC-7721细胞周期DNA水平变化;Annexin V-EGFP/PI双染法研究薏苡仁脂肪酸对SMMC-7721细胞凋亡率的影响。结果不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸作用SMMC-7721细胞24、48、72 h后,均呈现出较好的细胞增殖抑制作用,且具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸处理SMMC-7721细胞22 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,(P<0.001);作用36 h后,可显著降低G2/M期细胞比例,(P<0.001)。结论薏苡仁脂肪酸对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用并可诱导其凋亡,其作用是通过抑制G2/M细胞周期实现的。
- 包永睿王帅孟宪生巩晓杰杨欣欣
- 关键词：细胞周期细胞凋亡
- 延胡索提取工艺的优化及化学成分与药效指标相关性分析被引量：16
- 2012年
- 目的针对延胡索抑制肝癌细胞的作用,结合正交设计法,优选延胡索中延胡索乙素、原阿片碱的提取工艺条件,并对2种生物碱与药效学指标的相关性进行分析。方法采用正交设计法,以延胡索乙素提取率、原阿片碱提取率、SMMC-7721细胞抑制率和出膏率为评价指标,对延胡索中2种生物碱的提取工艺条件进行优选;应用SPSS 13.0统计软件进行Pearson相关系数分析。结果最佳提取工艺为6倍量70%乙醇回流提取2 h,延胡索中2种生物碱的提取率最高,对肝癌细胞的抑制率最高。结论该方法快速、操作简便,可以为确定延胡索中2种生物碱定量测定方法提供实验依据。
- 邹薇张鹤包永睿孟宪生
- 关键词：延胡索延胡索乙素原阿片碱正交设计
- 白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响被引量：16
- 2013年
- 目的研究白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制率、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法研究白茅根水提物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率及抑制率与时间剂量关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究白茅根水提物作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响。结果不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞24,48,72,96 h后,均呈现出显著的细胞增殖抑制作用,抑制作用具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期与细胞凋亡实验结果显示不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞46 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,差异有统计学意义(P<0.001),作用36 h后,可增加S期比例同时降低G2/M期细胞比例,差异有统计学意义(P<0.001)。结论白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的增殖抑制作用并可诱导其凋亡,该作用是通过抑制G2/M期细胞比例,将细胞周期阻滞在S期实现的。
- 包永睿王帅孟宪生杨欣欣王莹
- 关键词：MTT法流式细胞技术人肝癌细胞株SMMC-7721
- 正交试验量效比对法优选卷柏抗SMMC-7721肝肿瘤组分总黄酮的提取工艺被引量：2
- 2014年
- 目的:优选卷柏抗SMMC-7721肝肿瘤组分总黄酮的提取工艺。方法:选取提取时间、提取次数、乙醇用量及体积分数为考察因素,以人肝癌细胞SMMC-7721抑制率为指标的正交试验结果优选总黄酮和穗花杉双黄酮提取量综合评分的权重系数比,并通过SPSS 17.0软件对有效组分与药效学指标进行Pearson相关系数分析。采用HPLC测定穗花杉双黄酮含量,流动相乙腈-0.5%乙酸水(33∶67),检测波长269 nm。结果:最佳提取工艺条件为加10倍量70%乙醇回流提取1次,每次3 h;穗花杉双黄酮含量与总黄酮含量的权重系数分别为0.7,0.3,反映含量指标与抑制率呈一定相关性。结论:以有效成分含量代表药效作为正交试验指标是科学合理的,优选的提取工艺稳定可行,为中药有效成分的提取提供新思路。
- 齐冰包永睿孟宪生王帅
- 关键词：卷柏总黄酮噻唑蓝
- HPLC法同时测定黄藤素注射液中黄藤素和盐酸药根碱的含量被引量：2
- 2012年
- 目的:建立同时测定黄藤素注射液中黄藤素和盐酸药根碱含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为GraceAlltimaC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.4%二乙胺-0.8%冰醋酸-乙腈(梯度洗脱),检测波长为345nm,柱温为40℃。结果:黄藤素和盐酸药根碱的进样浓度分别在5.39～215.50、0.39～15.50μg.mL-1范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.9999);平均加样回收率分别为99.1%和99.7%,RSD分别为1.6%和0.8%(n均为6)。结论:该方法简便、快速、准确、专属性强,可作为黄藤素注射液中黄藤素和盐酸药根碱的含量测定方法。
- 张慧王义明谢媛媛康廷国孟宪生罗国安
- 关键词：黄藤素注射液高效液相色谱法黄藤素盐酸药根碱
- 藏药余甘子抗肿瘤活性成分的提取工艺优化及含量测定被引量：14
- 2012年
- 以藏药余甘子体外药效为指标,采取正交设计试验优选得到藏药余甘子药材抗肿瘤活性成分的最佳提取工艺,即以10倍量70%乙醇回流提取(2 h×2)。并建立了HPLC多波长融合法定量测定余甘子抗肿瘤活性成分中的没食子酸(1)、表儿茶素(2)和鞣花酸(3)。采用C18色谱柱,以0.2%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长分别为230 nm(1)、254 nm(2)和280 nm(3)。三者的线性范围分别为0.88～5.28 g、0.30～1.80 g和0.28～1.68 g。平均回收率分别为98.5%、98.6%和98.2%,RSD分别为1.02%、1.00%和1.06%。
- 张云坤包永睿孟宪生王帅康廷国
- 关键词：正交设计抗肿瘤活性
- 防己生物碱类成分提取纯化工艺研究被引量：15
- 2014年
- 目的优化防己治疗湿热痹证生物碱类成分的提取、纯化工艺,确定最佳提取、纯化工艺相关技术参数,为防己药材的合理利用及开发奠定实验基础。方法以粉防己碱、防己诺林碱的量和干膏收率的综合指标为考察指标,采用单因素和正交试验设计法优化相关提取工艺参数;采用大孔吸附树脂法,对纯化工艺参数进行考察,筛选并确定最佳纯化工艺。结果防己生物碱类成分最佳提取工艺为8倍量70%乙醇回流提取3次,每次3 h;最佳纯化工艺为选用AB-8型号树脂,3倍柱体积水除杂,8倍量90%乙醇,药材树脂用量比1∶1(g/mL),以粉防己碱、防己诺林碱的量计,纯化后纯度约为50%。结论此工艺方法先进合理,适合工业生产,具有简便、快速、准确等优点,为防己药材的进一步研究及开发奠定一定的基础。
- 杨欣欣包永睿王帅孟宪生朱瑞卿朱明香
- 关键词：防己粉防己碱防己诺林碱纯化工艺
- 决明子发酵前后5种蒽醌类成分变化研究被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨固态发酵对决明子中5种蒽醌类成分含量的影响。方法:采用高效液相色谱法测定决明子发酵前后芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量并进行对比研究。色谱柱为C18-ODS反相柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1mL.min-1,检测波长为280nm。结果:决明子经过发酵后,游离型蒽醌含量呈上升趋势。以未发酵成分含量为100%计算,5种成分变化分别为104.6%、102.2%、93.4%、215.6%、134.8%,其中芦荟大黄素、大黄酸和大黄素变化不明显,大黄酚与大黄素甲醚分别增加至2.15倍和1.34倍,可见发酵增加了蒽醌苷元的含量。结论:决明子通过发酵,有利于增加活性成分蒽醌苷元的含量。
- 金玲孟宪生包永睿郭小瑞
- 关键词：决明子发酵高效液相色谱法
