广东省医学科学技术研究基金(B2012330) 作品数:12 被引量:58 H指数:5 相关作者: 魏杨辉 黄耀 张卫星 杨莉涛 郭雄波 更多>> 相关机构: 广东医学院附属福田医院 南方医科大学 东南大学 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 深圳市科技计划项目 深圳市福田区科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
pIRES-IL-24-TRAIL基因载体的构建及其对肝癌细胞迁移和凋亡的影响 2014年 目的构建真核表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,探讨其对肝癌细胞迁移和凋亡的影响。方法以人胎盘组织总RNA为模板,采用RT-PCR二步法,扩增TRAIL的cDNA序列,将其克隆入pIRES载体,扩增IL-24的cDNA序列,将其克隆入pIRES-TRAIL载体,构建其真核瞬时表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,以Lipofectamine2000转染技术,将TRAIL、IL-24基因导入肝癌细胞Bel-7402和PLC,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验比较不同组间细胞迁移情况。结果①克隆到TRAIL、IL-24基因的cDNA序列,成功构建其真核表达载体;②流式细胞仪发现,实验组比对照组凋亡率高(P<0.05);③细胞划痕实验显示实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论 pIRES-IL-24-TRAIL构建成功,并能诱导肝癌细胞凋亡、降低其迁移能力。 魏杨辉 黄耀 刘娟 张卫星 吴爱国关键词:凋亡 穴位注射治疗胃手术后胃瘫综合征疗效观察 被引量:9 2014年 目的了解穴位注射对胃手术后胃瘫综合征的疗效。方法将33例胃手术后胃瘫综合征患者按随机数字表随机分成对照组16例和治疗组17例,对照组接受常规治疗和肌肉注射,治疗组在常规治疗基础上行穴位注射,比较两组的恢复情况。结果治疗组肠鸣音恢复时间〔(9.06±3.61)d比(16.94±5.27)d〕和胃功能恢复时间〔(10.12±3.89)d比(17.69±5.76)d〕均短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在常规治疗的基础上采用穴位注射治疗胃瘫综合征操作简单,效果良好。 李艳 范晓萍 郭雄波 魏杨辉 肖钟 余璟玮关键词:胃瘫综合征 穴位注射 survivin、galectin-3、Ki-67在乳腺癌组织中的表达及其意义 被引量:5 2013年 目的检测乳腺癌及癌旁正常组织中survivin、galectin-3、Ki-67蛋白的表达,探讨三者的相关性及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测120例乳腺癌组织、120例癌旁乳腺正常组织中survivin、galectin-3、Ki-67的表达。结果乳腺癌组织中survivin蛋白阳性表达率为70.83%,高于癌旁正常组织的5.00%(P<0.05),且与淋巴结转移有关(P<0.05),但与乳腺癌的病理分级无显著相关(P>0.05)。galectin-3和Ki-67在乳腺癌组织中阳性表达率分别为75.00%、62.50%,高于癌旁正常组织的8.33%、6.67%(P均<0.05),并与乳腺癌病理分级、腋窝淋巴结转移有关(P均<0.05)。乳腺癌组织中survivin表达与galectin-3和Ki-67表达呈正相关(P均<0.05)。结论 survivin、galectin-3、Ki-67蛋白相互协同作用,通过抑制细胞凋亡,对乳腺癌发生和发展起重要作用。 魏杨辉 张宗明 杨莉涛 黄耀 刘娟 张卫星 吴爱国关键词:乳腺癌 生存素蛋白 KI-67蛋白 Galectin-3表达抑制对BT-549细胞系增殖和凋亡影响观察 被引量:1 2013年 目的:观察抑制Galectin-3表达与BT-549细胞系增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为三阴性乳腺癌基因治疗方法的可行性。方法:设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并顺势转染乳腺癌细胞系BT-549(为Galectin-3siRNA组),以未转染细胞为空白对照,以转染阴性干扰为阴性对照,荧光倒置显微镜和实时定量PCR验证干扰结果,XTT方法观察干扰后24、48、72和96h各组细胞增殖吸光度(A值),流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况,以上实验均重复3次。结果:空白对照组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组Galectin-3mRNA相对含量分别为(0.078±0.003)、(0.069±0.004)和(0.015±0.001),差异有统计学意义,F=486.97,P<0.001。XTT法检测结果显示,同一组不同时间点之间差异有统计学意义,P值均<0.001;同一时间点各组之间差异亦有统计学意义,P值均<0.001。随着时间推移,空白组和阴性对照组细胞继续生长,Galectin-3siRNA组细胞生长抑制,数量逐渐减少,干扰时间和实验分组之间存在交互效应,F=26.43,P<0.001。流式细胞仪检测结果显示,Galectin-3siRNA组、空白对照组和阴性对照组凋亡率分别为(26.83±2.15)%、(2.73±0.18)%和(5.86±0.51)%,差异有统计学意义,F=24 537.92,P<0.001。空白对照组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组愈合率分别为(91.47±4.39)%、(82.36±3.68)%和(52.26±1.95)%,差异有统计学意义,F=213.71,P<0.001。转染Galectin-3siRNA的乳腺癌细胞浸润穿过Matrigel膜的细胞数(169.36±23.71)要比空白对照组(480.80±30.80)和阴性对照组(320.70±28.12)的细胞数显著减少,差异有统计学意义,F=115.20,P<0.001。结论:Galectin-3siRNA成功转染入BT-549细胞,并抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低其迁移侵袭能力,为三阴性乳腺癌基因治疗提供实验依据。 魏杨辉 张宗明 杨莉涛 黄耀 刘娟 张卫星 吴爱国关键词:乳腺肿瘤 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡 扩张皮瓣联合游离植皮在局部晚期乳腺癌手术中的应用 被引量:8 2015年 目的探讨扩张皮瓣联合游离植皮修复局部晚期乳腺癌手术后巨大软组织缺损的应用价值。方法对11例局部晚期乳腺癌行4个疗程化疗,化疗前先以亚甲蓝在肿瘤的体表轮廓纹身标记,并在患侧乳房下方腹壁皮下埋植扩张器,化疗期间逐渐注水扩张皮瓣,在完成乳腺癌改良根治术后即时取出水囊,利用扩张皮瓣和下腹壁游离皮瓣修复胸壁巨大软组织缺损。结果化疗过程顺利,11例患者皮瓣扩张良好,手术顺利,扩张皮瓣及游离植皮有效覆盖手术创面并实现Ⅰ期愈合,患者放疗耐受性好,短期随访未发现肿瘤胸壁复发。结论应用邻近扩张皮瓣联合游离植皮修复乳癌术后胸壁巨大软组织缺损的效果良好。 叶正青 钟琰 张王山 丁海 魏杨辉 郭雄波关键词:扩张皮瓣 乳腺癌 化疗 游离植皮 RNA干扰技术抑制Galectin-3表达对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响 被引量:3 2013年 目的观察半乳凝集素-3(Galectin-3)表达与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为抗肿瘤基因治疗的方法。方法设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231(Galectin-3siRNA组),以未转染细胞为空白对照组,以转染无关siR-NA为阴性对照组。荧光倒置显微镜和实时定量PCR检测干扰结果,MTT法观察干扰后24、48、72、96 h各组细胞增殖吸光度(A)值,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况。结果①转染后24 h,荧光倒置显微镜显示转染效率为(80.60±5.62)%,实时定量PCR提示Galectin-3siRNA转染后相应Galectin-3的表达明显下降(P<0.01);②干扰后24、48、72、96 h Galectin-3siRNA组细胞继续生长,但细胞生长减慢,抑制率低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);③流式细胞术分析发现,Galectin-3siRNA组比空白对照组和阴性对照组凋亡率高(P<0.01);④Transwell侵袭实验显示Galectin-3siRNA组穿膜细胞数少于空白对照组和阴性对照组。细胞划痕实验显示Galectin-3siRNA组细胞迁移能力明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01)。结论RNA干扰能抑制Galectin-3的表达以及MDA-MB-231细胞的增殖,并诱导细胞凋亡、降低其迁移侵袭能力。 魏杨辉 张宗明 杨莉涛 黄耀 刘娟 张卫星 吴爱国关键词:三阴性乳腺癌 RNA干扰 凋亡 IL-24-TRAIL基因载体的构建及其对乳腺癌干细胞迁移和凋亡的影响 2013年 目的构建真核表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,探讨其对乳腺癌干细胞迁移和凋亡的影响。方法以人胎盘组织总RNA为模板,采用RT-PCR二步法,扩增TRAIL的cDNA序列,将其克隆入pIRES载体,扩增IL-24的cDNA序列,将其克隆入pIRES-TRAIL载体,构建重组真核表达载体pIRESIL-24-TRAIL,以Lipofectamine2000转染技术,将质粒pIRES-IL-24-TRAIL导入乳腺癌干细胞MCF-7和MDA-MB-231,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验比较不同组间细胞迁移情况。结果(1)克隆到TRAIL、IL-24基因的cDNA序列,成功构建其真核表达载体。(2)流式细胞仪发现,实验组比对照组细胞凋亡率高(P<0.05)。(3)细胞划痕实验显示实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论 pIRES-IL-24-TRAIL构建成功,并能诱导乳腺癌干细胞凋亡、降低其迁移能力。 魏杨辉 张宗明 黄耀 刘娟 张卫星 吴爱国关键词:乳腺癌干细胞 迁移 凋亡 快速康复外科理念在胰十二指肠切除术围手术期管理中的价值 被引量:20 2015年 目的探讨快速康复外科(FTS)理念应用于胰十二指肠切除术围手术期管理的效果。方法前瞻性分析2010年7月至2014年9月深圳市第四人民医院收治的60例胰头及壶腹周围癌患者的临床资料。患者均行胰十二指肠切除术,按照随机数字表法将患者分为FTS组(30例)和对照组(30例)。FTS组采用FTS理念指导下的围手术期处理措施,对照组采用传统围手术期处理措施。结果与对照组对比,FTS组患者手术时间更短,术中出血量更少,腹腔引流管拔除时间、术后肛门排气时间、术后住院时间更短,住院费用更少,术后1、3、5 d血清C反应蛋白水平更低,肝功能恢复更快以及术后并发症发生率更低(P均<0.05)。结论 FTS理念应用于胰十二指肠切除术术围手术期的管理安全有效,能降低患者术后应激反应,加速患者的康复进程。 魏杨辉 黄耀 张卫星 杨莉涛关键词:胰十二指肠切除术 胰头癌 壶腹周围癌 快速康复外科 围手术期 经脐切口与脐周切口在腹腔镜阑尾切除术中应用效果比较 被引量:9 2013年 目的探讨经脐切口与脐周切口在腹腔镜阑尾切除术中的应用效果。方法回顾性研究2011—2012年度在我院接受腹腔镜手术的化脓性阑尾炎患者200例,采用随机数字表法将患者分为经脐组和脐周组,每组各100例。经脐组取脐切口,脐周组取脐周切口,均使用传统的腹腔镜阑尾切除术完成手术。观察两组患者手术时间、术中出血量、术后下床时间、住院时间、使用抗生素时间、曲马朵用量、疼痛视觉模拟评分(VAS评分)、患者对伤口满意度及并发症发生情况。结果两组患者手术时间、术中出血量、术后下床时间、住院时间、使用抗生素时间、曲马朵用量、VAS评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者对伤口满意度评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经脐组1例(1%)发生脐部感染,脐周组3例(3%)发生脐部感染,均无伤口疝、血肿形成,两组并发症发生率比较差异无统计学意义(χ2=1.020,P=0.312)。两组均无套管针插入造成器官伤害。结论经脐切口和脐周切口的并发症发生率是无区别,经脐切口是一种安全可行的替代方案,而且更容易操作,并具有更好的美容效果。 魏杨辉 吴爱国 张卫星 黄耀 刘娟 张宗明关键词:阑尾切除术 腹腔镜检查 手术后并发症 腹腔镜联合胆道镜经胆囊管治疗胆总管结石的疗效观察 被引量:1 2015年 目的评价腹腔镜联合胆道镜经胆囊管治疗胆总管结石的疗效。方法回顾性分析2012年1月至2014年9月在广东医学院附属福田医院治疗的195例胆总管结石患者,按照术式分为腹腔镜联合术中胆道镜经胆囊管胆道探查取石术(LTCBDE)组(43例)、腹腔镜胆道探查"T"管引流(LCBDE)组(65例)和剖腹胆囊切除、胆总管探查取石、"T"管引流术(OCBD)组(87例)。比较三组患者手术时间、术中出血量、术后肛门排气时间、视觉模拟评分法(VAS)评分、并发症发生率,以及三组治疗前后CRP、PA、TBIL和ALT水平的变化。结果 3组患者均成功进行手术,LTCBDE组除手术时间比OCBD组长外,术中出血量、术后VAS评分、肛门排气时间、术后住院时间和并发症明显少于LCBDE和OCBD组(P<0.001)。LTCBDE组的并发症发生率为4.7%,明显低于LCBDE组的15.4%和OCBD组的23.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,三组的CRP、TBIL和ALT水平比治疗前明显降低(P<0.001),而PA水平比治疗前明显升高(P<0.001)。LTCBDE组的降低和升高水平比其余两组更为明显(P<0.001)。结论 LTCBDE具有创伤小、并发症少、费用低、术后生活质量高等优点,是一种有效、安全及经济的术式。 魏杨辉 黄耀 张卫星 杨莉涛关键词:胆总管结石 腹腔镜 胆道镜