西京医院科技创新基金(XJCX04M004)
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 相关作者：卢春光惠延年胡丹更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：西京医院科技创新基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺病毒介导BDNF基因转染的雪旺细胞对大鼠视神经损伤修复的保护作用被引量：10
- 2006年
- 目的研究经腺病毒介导,转染有人脑源性神经营养因子(brain-derivedneu-rotrophicfactor,BDNF)基因的SD大鼠雪旺细胞(Schwanncells,SCs)对成年SD大鼠视神经夹伤后修复的保护作用。方法将人BDNF基因转染到体外培养的SCs内,采用酶联免疫反应(enzyma-linkedimmumosorbentassay,ELISA)检测培养液上清中BDNF的表达量。80只成年SD大鼠随机分为转染有BDNF基因的SCs治疗组(A组)、正常SCs治疗组(B组)、DMEM治疗组(C组)和手术对照组(D组),每组20只,每只右眼建立视神经夹伤模型,D组大鼠左眼作为空白对照组(E组)。夹伤前7d进行荧光金(fluorogold,FG)逆行标记视网膜神经节细胞(retinalganglialcells,RGCs)。夹伤后即刻向A、B、C组伤眼玻璃体腔内注入相应液体各10μL。分别在伤后第7d、14d、21d、28d时进行闪光视觉诱发电位(flashvisualevokedpotentials,FVEP)检测和全视网膜铺片、记数RGCs。结果转染有BDNF基因的SCs的BDNF表达量明显高于正常SCs。A组的P1波幅比随观察时间延长呈下降趋势,但在夹伤后第14d、21d、28d时仍明显高于其他各组(P<0.05)。夹伤后第21d和第28d时,A组RGCs数分别为(1591±82)·mm-2、(1516±91)·mm-2,明显高于除E组外的其他各组(P<0·01)。结论视神经夹伤后,玻璃体腔内注射转染有BDNF基因的SCs能够促进RGCs轴突的修复,提高RGCs存活率,保护视神经功能,对视神经损伤修复具有明显的保护作用。
- 卢春光胡丹惠延年
- 关键词：视神经损伤脑源性神经营养因子雪旺细胞重组腺病毒基因转染
- 腺病毒介导脑源性神经营养因子基因在培养的雪旺细胞中的表达被引量：5
- 2006年
- 目的:观察腺病毒介导人脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)基因在培养的雪旺细胞(Schwanncell,SC)中的表达,为视神经损伤修复提供可靠的组织工程用的种子细胞。方法:在293细胞中培养扩增BDNF重组腺病毒(adenovirallydeliveredBDNF,Ad-BDNF),采用蚀斑形成试验测定其感染滴度。体外培养SD大鼠源性的SC,以Ad-BDNF感染培养的SC,用逆转录—聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymersechainreaction,RT-PCR)检测BDNFmRNA的表达,用免疫印迹技术(immunoblotassay,WesternBlotting)和酶联免疫反应检测(enzyma-linkedimmumosorbentassay,ELISA)培养液上清中BDNF的表达。结果:Ad-BDNF经扩增后可获得较高感染滴度的重组腺病毒载体。在正常培养条件下未经Ad-BDNF感染的SC低表达BDNF,而感染3d后的SC其BDNF表达明显升高,表达量随时间延长而增加,并能在感染21d后仍维持高表达趋势。结论:Ad-BDNF可以介导BDNF基因转染到培养的SC中,后者可以在较长时间内高效表达BDNF。
- 卢春光胡丹惠延年
- 关键词：视神经损伤脑源性神经营养因子细胞重组腺病毒基因转染
