国家高技术研究发展计划(2006AA09Z163)
- 作品数：8 被引量：77H指数：7
- 相关作者：梁玉波刘仁沿许道艳刘永健陈冰君更多>>
- 相关机构：国家海洋环境监测中心大连海事大学大连水产学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家908专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学环境科学与工程医药卫生农业科学更多>>
- 抗DDA抗体的制备及其特性研究被引量：3
- 2008年
- 制备抗DDA抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附实验(Indrect Competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay,idc-ELISA)方法,以测定海水样品和海洋贝类中的有机氯农药滴滴涕(DDT)代谢产物。采用碳二亚胺法,将半抗原DDA分别与载体蛋白牛血清白蛋白(Bovine serumalbumin,BSA)和卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联,得到完全抗原。以DDA-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,制备抗DDA抗体。研究表明,5只鼠产生的抗体对DDA都能产生灵敏的特异性免疫反应,以DDA-OVA为包被抗原,用5#抗体建立间接竞争ELISA方法检测海水样品和海洋贝类中的有机氯农药DDT代谢产物DDA,最低检出限为:10.0ng·mL-1,海水加标样平均回收率122%,批间变异系数30%,贝类加标样平均回收率为131%,批间变异系数22%。
- 刘仁沿董玉华许道艳梁玉波
- 关键词：DDADDT酶联免疫吸附实验
- 麻痹性贝毒单克隆抗体的制备和酶联免疫检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 目的:利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备麻痹性贝毒(PSP)的单克隆抗体,以便建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法。方法:采用甲醛法将半抗原石房蛤毒素(STX)与血蓝蛋白(KLH)偶联制备成完全抗原STX-KLH,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,HAT选择培养杂交瘤细胞,利用ELISA方法筛选出分泌抗STX-McAB的杂交瘤细胞株,并通过小鼠体内诱生腹水的方法获得单克隆抗体。结果:共获得4株能稳定分泌麻痹性贝毒抗体的阳性细胞株,建立了分析检测麻痹性贝毒的间接竞争酶联免疫方法。对PSP中STX组分的检出限为20 ng/ml,IC50为220 ng/ml;对GTX2/3的检出限为10 ng/ml,IC50为50 ng/ml。结论:所制备抗体具有高特异性和灵敏性,可用于研制高质量的国产快速检测麻痹性贝毒ELISA试剂盒。
- 许道艳刘磊刘仁沿梁玉波
- 关键词：麻痹性贝毒单克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 赤潮毒素研究进展被引量：16
- 2008年
- 近年来,赤潮是全球最严重的海洋生态灾害之一,在我国也尤为突出。本文就赤潮毒素麻痹性贝毒、腹泻性贝毒、记忆缺失性贝毒、神经性贝毒,以及西加鱼毒的分布特征、产毒藻类、化学组分与结构、毒素转化、致毒机理、食用标准、检测方法等国内外研究进展,进行系统的论述,为我国的赤潮监测和灾害防治提供参考。
- 刘永健刘娜刘仁沿梁玉波
- 关键词：麻痹性贝毒腹泻性贝毒
- 我国麻痹性贝毒的研究现状被引量：15
- 2008年
- 王焕玲梁玉波刘仁沿许道艳
- 关键词：麻痹性贝毒
- 海水和贝类中软骨藻酸的酶联免疫吸附分析方法研究被引量：10
- 2009年
- 目的建立间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)方法测定海水样品和海洋贝类中赤潮毒素记忆缺失性贝毒主要成分软骨藻酸(DA)。方法采用碳二亚胺法,将半抗原DA分别与载体蛋白卵清蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到包被抗原和免疫抗原。以DA-BSA做为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA方法分析检测海水样品和海洋贝类中的软骨藻酸。结果最低检出限为10.0ng/ml(对于贝相当于4μg/g);海水样品回收率为83.2%～124.7%,批内变异系数在4.7%～5.9%之间;贝类样品回收率为85.9%～99.9%,批内变异系数2.4%～7.1%之间。结论建立的ELISA方法检测海洋贝类中DA可以满足国际规定的安全限值。
- 刘仁沿许道艳董玉华梁玉波
- 关键词：软骨藻酸多克隆抗体酶联免疫吸附分析海产品
- 胶体金免疫层析方法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的初步研究被引量：10
- 2008年
- 建立了赤潮毒素腹泻性贝毒软海绵酸的快速胶体金免疫层析检测方法。通过细胞融合,制备抗软海绵酸单克隆抗体,胶体金标记抗体,建立快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。检出限500 ng/mL(50 ng/条),探讨了影响测试方法的因素和提高灵敏度的可能手段。
- 刘仁沿梁玉波陈冰君许道艳梁斌
- 关键词：单克隆抗体胶体金
- 中国沿海贝类腹泻性贝毒的酶联免疫分析方法被引量：12
- 2008年
- 为了解中国近海贝类受腹泻性贝毒污染状况,制备并应用多克隆抗体建立对腹泻性贝毒主要成分软海绵酸(OA)的间接竞争酶联免疫检测方法(idc-ELISA).应用该方法检测中国沿海双壳贝类中腹泻性贝毒的含量,并与小鼠法测试结果进行了对比.结果表明:idc-ELISA方法的检出限为0.1 ng/mL,相当于贝类样品的检出限8 ng/g;idc-ELISA方法和生物小鼠法的符合率为90%;中国沿海贝类受腹泻性贝毒污染严重,部分贝类样品的腹泻性贝毒含量超过了规定的0.2μg/g的食用安全标准.
- 刘仁沿梁玉波张芳许道艳马德毅
- 关键词：腹泻性贝毒多克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究被引量：15
- 2010年
- 腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/mL(0.96纳克/条)。
- 刘仁沿梁玉波陈媛许道艳陈冰君刘永健
- 关键词：单克隆抗体免疫层析胶体金
