国家自然科学基金(30370538)
- 作品数：7 被引量：46H指数：3
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- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
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- 甲亢大鼠心肌细胞缩短幅值-频率关系的变化被引量：1
- 2008年
- 目的:观测实验性甲状腺功能亢进症(甲亢)大鼠不同时期心功能变化的特征,以探明甲亢大鼠心力衰竭的可能机制。方法:采用大鼠无创尾套法测量血压与脉率,离体工作心脏模型观测心功能,利用离体单心肌细胞测量心肌收缩性能的变化。结果:实验性甲亢大鼠心率明显增快,心肌细胞宽度增加而长度未见明显改变。2周甲状腺素(T4)处理组离体工作心脏模式下,心输出量较对照组明显增强;在固有心率下,前负荷对心功能的调节机制保持正常。2周T4处理组心肌细胞无负荷缩短幅值,在1与2 Hz较对照组显著增加,但在4 Hz下与对照组无差别;随刺激频率增大,缩短幅值逐步降低。4周T4组心肌细胞缩短幅值进一步增大,亦呈随频率增加而幅值降低的现象。两个T4组心肌细胞收缩时程均较对照组明显缩短。在1与2 Hz作用下,心肌细胞的无负荷缩短与舒张速率均明显高于对照组;4 Hz下2周T4组缩短与舒张速率仍高于对照组,4周T4组则与对照组间无显著差别。结论:4周甲亢大鼠单心肌细胞无负荷缩短幅值-频率关系早于整体心脏功能发生变化。
- 王云英余志斌焦博张子泰邓敬兰
- 关键词：甲状腺功能亢进症心肌细胞心肌收缩
- 增加刺激频率不影响大鼠萎缩比目鱼肌强直收缩疲劳性被引量：3
- 2005年
- 为观察模拟失重对大鼠比目鱼肌(soleus,SOL)与趾长伸肌(extensor digitorum longus,EDL)间断强直收缩功能的影响, 以及对刺激频率的调节作用,采用离体骨骼肌条灌流技术,观测其产生强直收缩最大张力的最适刺激频率、疲劳性与疲 劳后恢复过程。结果表明:对照组大鼠SOL强直收缩的最适刺激频率为60 Hz,尾部悬吊1周大鼠SOL的最适刺激频率 亦为60 Hz,尾部悬吊2周后,其最适刺激频率增高为80 Hz,4周后则为100 Hz;在最适刺激频率作用下,悬吊大鼠 SOL间断强直收缩的最大张力(Po)在悬吊1与2周未见改变,第4周才呈现显著性降低(P<0．01)。间断强直收缩5 min后, 对照组大鼠SOL张力降低到22．8％Po;悬吊1、2与4周组疲劳性均增加,与其同步对照组相比均有显著性差异(P< 0．01)。疲劳性强直收缩后,在20 min内对照大鼠SOL张力基本恢复到疲劳前水平,而悬吊1、2与4周组则不能完全恢 复(P<0．05)。对照组大鼠EDL的最适刺激频率为120 Hz,悬吊1、2与4周组EDL的最适刺激频率、疲劳性以及疲劳后恢 复过程均未发生改变。以上结果提示,增加刺激频率可对悬吊1与2周大鼠SOL强直收缩最大张力的降低有代偿作用,但 不能代偿悬吊4周大鼠SOL最大收缩张力的降低,亦不影响悬吊大鼠SOL间断强直收缩疲劳性的增加与疲劳后恢复的减缓。
- 高放余志斌
- 关键词：模拟失重肌肉收缩肌肉疲劳
- 低压恒流灌流分离成年大鼠心肌细胞被引量：18
- 2005年
- 目的:探寻合适的初始灌流压力与定量确定酶消化终止点,以提高恒流灌注分离成年大鼠心肌细胞的产量与质量。方法:采用Langendorff装置,行主动脉插管逆向灌流,0.08%胶原酶I消化大鼠心脏,监测灌流压力的变化。结果:调节灌流流速以15 kPa初始压力恒流灌流时(n=4),灌流压力明显升高(压力峰值>25 kPa),造成左心室在松弛状态下明显扩张,使分离的心肌细胞存活率降低,且收缩功能显著降低。以10 kPa初始压力行恒流灌流时,酶消化引起的压力升高均低于18.75 kPa,左心室扩张不明显;当酶消化过程中压力降至10 kPa(n=3)或5kPa(n=4)时终止消化,心肌细胞分别呈消化不足或过度的形态,且心肌细胞存活率均低于10%,恢复正常细胞外液钙离子浓度后,大部分心肌细胞死亡。当酶消化时灌流压降至7.5 kPa时终止消化(n=15),分离即刻心肌细胞存活率为82.6%±4.8%,复钙后心肌细胞存活率为30.4%±4.5%,复钙后4 h的存活率仍为24.8%±5.4%。细胞形态完好,边缘锐利、横纹清晰,无明显博动,收缩功能正常。结论:为获得存活率较高的成年大鼠心肌细胞,宜采用低压恒流灌流分离方法,即初始灌流压力保持在10 kPa,胶原酶I消化的终止压力为7.5 kPa。
- 王云英张然余志斌
- 关键词：成年大鼠心肌细胞
- 心肌肌钙蛋白Ⅰ的磷酸化与非磷酸化调节被引量：2
- 2008年
- 由于心肌肌钙蛋白复合体Ⅰ亚基(TroponinⅠ,TnⅠ)特殊的分子结构,使其在心肌收缩过程中起"分子开关"的重要作用。心肌TnⅠ具有6个磷酸化位点,第23/24位丝氨酸残基可被蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶D(PKD)和蛋白激酶G(PKG)磷酸化,发挥正性肌力作用;第43/45位丝氨酸残基以及第144位酪氨酸残基可被蛋白激酶C(PKC)磷酸化,可能主要起负性肌力作用;蛋白激活激酶(PAK)磷酸化第149位丝氨酸残基后的作用尚待探明。另外,经蛋白水解酶calpain降解含磷酸化位点的片段,产生去磷酸化作用;亦可通过降解一些特定片段来改变TnⅠ空间构象,引起非磷酸化调节作用。
- 张琳余志斌
- 关键词：心肌收缩性能磷酸化
- 模拟失重降低大鼠心肌细胞对异丙肾上腺素的反应性被引量：3
- 2007年
- 本文旨在研究模拟失重对大鼠单个心肌细胞无负荷收缩功能的影响以及对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)反应性的变化。采用大鼠尾部悬吊法在地面模拟失重状态,4周后以胶原酶Ⅰ消化分离心肌细胞,分别对左、右两心室心肌细胞进行收缩功能测量。结果显示,悬吊4周大鼠(悬吊组)左、右心室心肌细胞的长度和宽度与正常大鼠(对照组)相比均无显著差异。随刺激频率增加,对照组与悬吊组大鼠心肌细胞缩短幅值均逐步增加。在1.0、2.0与4.0 Hz刺激下,对照组大鼠左心室心肌细胞缩短幅值分别为(8.50±1.26)%、(9.00±1.38)%与(9.23±1.83)%,右心室心肌细胞缩短幅值分别为(9.80±2.48)%、(10.03±2.48)%与(10.28±2.27)%:与对照组大鼠相比,在1.0与2.0 Hz刺激下,悬吊组大鼠左心室心肌细胞无负荷缩短幅值分别降低12.2%、10.9%(P<0.05),右心室则分别降低16.5%、16.3%(P<0.05);但是在4.0 Hz刺激下却无显著性改变。与同一频率刺激下的对照组大鼠相比,悬吊组大鼠左、右心室心肌细胞达到缩短峰值的时程(time to peak shortening,TPS)明显缩短(P<0.05);而从缩短峰值至75%舒张的时程(TR_(75))则明显延长(P<0.05)。在各刺激频率下,悬吊组大鼠左、右心室心肌细胞缩短(+dL/dt_(max))与舒张(-dL/dt_(max))速度均未发生明显改变。用1、5、10 nmol/L ISO灌流达稳态水平后,对照组大鼠心肌细胞缩短幅值分别增加了(10.63±0.83)%、(35.06±5.22)%和(71.64±6.83)%;而悬吊组大鼠心肌细胞缩短幅值仅增加(5.75±0.76)%、(23.97±4.50)%和(26.38±8.13)%,均有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。用10、50、100 nmol/L forskolin灌流达稳定水平后,对照组大鼠心肌细胞缩短幅值分别增加了(3.04±0.27)%、(9.81±2.66)%、(20.20±3.47)%;而悬吊组大鼠心肌细胞缩短幅值仅增加了(1.42±0.53)%、(3.83±1.71)%、(5.49±4.08)%,均有显著性差异(P<0.05)。以上结果表明,模拟失重4周降低大鼠心肌细胞无负荷缩短�
- 张琳王云英余志斌
- 关键词：模拟失重心肌细胞
- 成年小鼠心肌细胞分离技术被引量：23
- 2004年
- 为进行成年小鼠心肌细胞培养与收缩功能研究,首先必须获得高产量与高质量的心肌细胞.本实验采用Langendorff装置行恒流灌流心脏,同时监测灌流压力的变化.根据小鼠鼠龄微调灌流流速,使初始灌流压力保持在40 mmHg.用0.05%单一粗制胶原酶在37℃条件下消化心脏,当灌流压力下降至28 mmHg时,即刻终止消化.轻轻吹散心肌细胞后,用含1%牛血清白蛋白的Joklik's MEM培养液保存,逐步法恢复细胞外钙离子浓度.获得的心肌细胞存活率大于70%,复钙后耐钙心肌细胞静置4 h,心肌细胞存活率仍能保持在(40～50)%.其中,90％以上存活的长杆状心肌细胞无明显搏动,细胞膜表面光滑,横纹清晰,两端边缘锐利,折光性较强,复钙后保存4 h或5.0 Hz刺激5 min后,仍能保持正常形态.在1.0 Hz刺激条件下,心肌细胞缩短幅度为(9.72±0.43)%;2.0 Hz刺激下为(11.28±0.43)%;在5.0 Hz刺激下,达到(11.40±0.45)%.这些结果表明,采用本方法可获得高产量与高质量的成年小鼠心肌细胞,且易于操作,重复性较好.
- 张然余志斌王云英
- 关键词：小鼠心肌细胞
- 低压恒流灌流分离成年大鼠心肌细胞
- [目的]分离得到大量健康的成年大鼠心肌细胞,将有助于观测心肌细胞的生理功能、细胞收缩功能以及进行心肌细胞的培养。本实验目的为探寻合适的初始灌流压力与定量确定酶消化终止点,以提高恒流灌注分离成年大鼠心肌细胞的产量与质量。[...
- 王云英张然余志斌
- 关键词：成年大鼠心肌细胞
- 文献传递
- 国际空间站上的空间生命科学研究与进展被引量：4
- 2008年
- 第一批长期考查组进驻国际空间站(ISS)开始长期载人飞行活动,揭开了人类航天史上崭新的一页,迄今已成功完成14批长期考查组飞行任务。在航天飞行中,航天员受到微重力、辐射、昼夜节律变化、隔离等异常环境因素的影响。为保障航天员长期飞行的健康,在ISS上已开展或将要开展的空间生命科学研究共计59项。这些研究探讨了长期失重引起骨皮质下骨质丧失与恢复的速度,骨骼肌萎缩与功能降低的特点,脊髓兴奋性降低,以及免疫功能降低与病毒再度活化的关系。另外,亦观察了长期隔离导致航天员心理与行为的变化,昼夜快速转换对睡眠的影响,并发现长期辐射可能引起白内障与肿瘤,也可能导致生殖、神经系统的损害,甚至会诱发遗传性病变。同时在飞行过程中检验了药物、运动、营养与振动等对抗措施的有效性,并进一步观测这些对抗措施对不同系统的防护效果。这些研究结果为发展新一代、针对性更强的对抗措施奠定了坚实基础。
- 李辉余志斌
- 关键词：国际空间站空间生命科学生理学变化
