海南省自然科学基金(30128)
- 作品数：4 被引量：35H指数：2
- 相关作者：方宣钧韩继成谢瑶云吴多能肖海涛更多>>
- 相关机构：海南省热带农业资源开发利用研究所河北省农林科学院海南省人民医院更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 以3种材料为载体体外构建组织工程软骨被引量：1
- 2009年
- 背景:纤维胶原蛋白被公认是非常理想的载体,但其胶性易流动,降解较快,且通透性有待置疑。而海绵状胶原蛋白多微孔,三维立体结构,吸附性好,临时基质与细胞基质相近(Ⅱ型胶原),作者所查文献中作为骨髓间充质干细胞载体用于软骨形成的报道较少。目的:对比观察骨髓间充质干细胞在纤维蛋白海绵、生物蛋白海绵、明胶海绵载体中软骨形成的能力和可行性。设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2004-12/2008-08在海南省人民医院中心实验室完成。材料:纤维胶原蛋白海绵由美国Sigma公司提供,生物蛋白海绵(主要成分为Ⅱ型胶原,并吸附定量的碱性成纤维细胞生长因子)由辽宁绿谷制药有限公司提供,明胶海绵由南京金陵制药有限公司提供。方法:抽取猪髂骨骨髓血,用密度梯度离心法分离出有核细胞,在含转化生长因子β1的DMEM培养液中扩增骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞以载体内多点注射和表面点滴法植于Ⅱ型纤维胶原蛋白海绵、生物蛋白海绵及明胶海绵3种载体上,继续以含有转化生长因子β1的DMEM培养液体外培养。主要观察指标:观察细胞的生长情况,于4周取材进行大体组织观察,组织学分析及超微结构观察。结果:骨髓间充质干细胞在体外分离后可在转化生长因子β1培养液下扩增。纤维胶原蛋白海绵组可见少量的软骨基质与细胞;生物蛋白海绵组可见较多的基质与软骨细胞,细胞生长活跃,明胶海绵组可见少量散在的胶原基质,但无细胞生长。生物蛋白海绵组软骨细胞阳性数量多于纤维胶原蛋白海绵组(P<0.01),两组都明显多于明胶海绵组(P<0.01)。结论:骨髓间充质干细胞在生物蛋白海绵载体中软骨形成能力最强,纤维蛋白海绵次之,而明胶海绵与细胞生长不同步,软骨形成能力最差。
- 宋世锋肖海涛武伟袁素谢瑶芸吴多能杨建国白殿卿谢瑶云彭磊
- 关键词：骨髓间充质细胞软骨形成
- 骨髓干细胞体外组织工程软骨形成的实验研究被引量：2
- 2009年
- [目的]探讨骨髓干细胞(BMSCs)在体外不同载体中软骨形成的能力和可行性。[方法]分离培养猪BMSCs,将第3代BMSCs以载体内多点注射和表面点滴法植于A组:Ⅱ型纤维胶原蛋白海绵(fibrin collagen sponge),B组:生物蛋白海绵(fibrin collagen sponge and bFGF);C组:明胶海绵(gelatin sponge)3种载体上,于4周取材进行组织学分析。[结果]纤维胶原蛋白海绵和生物蛋白海绵组均有软骨细胞形成,明胶海绵无细胞生长。利用SPSS10.0软件统计学处理,显示B组软骨细胞阳性数量(92.75±10.57)多于A组(36.45±8.34),有统计学差异(P<0.01),两组都明显多于C组(0),有统计学差异(P<0.01)。[结论]MSCs经分离扩增后种植于三维立体结构的纤维蛋白海绵载体上,在含有TGF-β1培养液中形成软骨;在TGF-β1和FGF的双重因子培养中,其软骨的形成能力明显增加。
- 宋世锋肖海涛武伟袁素谢瑶云吴多能白殿卿
- 关键词：骨髓基质细胞软骨形成
- 五种热带水果乙烯受体基因的SNP分析被引量：22
- 2003年
- 根据乙烯受体基因的保守序列设计引物 ,分别从荔枝、香蕉、木瓜、芒果和莲雾等五种热带水果的基因组DNA中克隆出的乙烯受体基因的保守序列 ,序列长度分别为 14 4 0bp、 14 4 1bp、 14 39bp、 14 4 0bp和 14 4 0bp ,序列分析表明 ,与栽培稻的ers基因相似性最高。五种热带水果乙烯受体基因保守序列存在明显的单核苷酸变异 ,在 19个核苷酸位点存在SNPs (singlenucleotidepolymorphisms) ,其中 12个SNPs存在于内含子中 ,7个SNPs存在于编码序列区。在编码序列区的SNPs ,荔枝与其他 4种热带水果相比具有较高的单核苷酸多态性 ,荔枝有 4个核苷酸的变异 ,其余 4种热带水果仅有一个核苷酸变异。编码区序列中的单核苷酸的改变 ,除了第 783位核苷酸的不同没有引起氨基酸改变外 。
- 韩继成方宣钧
- 关键词：热带水果乙烯受体基因保守序列基因克隆氨基酸
- 编码荔枝乙烯受体(LcERS1)的cDNA基因的克隆与分析被引量：12
- 2003年
- 利用RT -PCR和RACE方法获得了编码荔枝乙烯受体的cDNA序列 ,长度为 2 ,193bp ,该序列中包含一个ORF全长 1,84 8bp ,编码 6 15个氨基酸 ,推测的分子量为 6 8kD。由该序列推定的蛋白质氨基末端存在疏水区 ,羧基端存在组氨酸激酶区和GAF区。与拟南芥的五个乙烯受体比较 ,推定的荔枝乙烯受体的激酶区有乙烯受体所具有的 5个基序 (H ,N ,G1,F ,G2 )中的H和N基序 (motif) ,分别位于第4 2 3- 4 32和 5 32 - 5 4 3氨基酸 ,其保守序列H为 :MNHEMRTPM ;N为 :LMQTILNIMGNA。结构分析和功能预测表明 ,本研究获得的荔枝乙烯受体编码序列推定的氨基酸序列具有乙烯受体的典型特征 ,初步分析表明获得的荔枝cDNA序列包含了编码荔枝乙烯受体 ,LcERS1,的全长cDNA基因 (lcers1) ,GenBank登录号为AY311484。
- 韩继成方宣钧
- 关键词：荔枝乙烯受体RACE基因克隆
