国家自然科学基金(39700143) 作品数:10 被引量:17 H指数:3 相关作者: 张积仁 张健 张宗城 汪森明 陈一招 更多>> 相关机构: 中国人民解放军第一军医大学 中山大学 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
EFFECTS OF p16^(INK4) GENE ON CHEMOSENSITIVITY OF HUMAN GLIOMA U251 CELL LINE TO TENIPOSIDE 2000年 Objective: To determine the effects on the cell growth, tumorigenicity and chemosensitivity of p16/CDK4I in human glioma. Methods: p16 gene was transfected into U251 cells by lipofectin. Expression of exogenous p16 gene was confirmed by immunohistochemistry and Northern blot. The effects of exogenous p16 gene on the growth and chemosensitivity to teniposide were examined. Results: Expression of exogenous p16 gene inhibited the growth dramatically in vitro. G1 arrest of tumor cells was observed. However, wt p16-positive U251 was less sensitive than control cell lines and the number of apoptotic cells after chemotherapy was reduced. Conclusion: The expression of exogenous p16 gene could inhibit the growth of glioma. On the other hand, the chemosensitivity to teniposide of p16-positive U251 was decreased. 陈祎招关键词:GLIOMA TENIPOSIDE CHEMOSENSITIVITY p16基因对脑胶质瘤细胞顺铂化疗敏感性的影响 被引量:3 2000年 目的探索p16基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及其与脑胶质瘤细胞顺铂化疗敏感性的关系。方法采用脂质转染的方法.将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U251,观察p16基因长期稳定转染对胶质瘤细胞的作用,并筛选阳性克隆。同时以空载体质粒PCDNA3为对照。免疫组化、Northern杂交检测p16基因表达,对转染后细胞生长情况、细胞周期及细胞对顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)敏感性的变化进行分析。结果外源p16基因的高水平表达显著掏了胶质瘤U251细胞的生长,克隆形成率减少,克隆形成率减少,肿瘤细胞发生了G1期阻滞,同时,细胞对顺铂的敏感性降低,化疗药物诱导的凋亡细胞数减少。结论外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖,同时降低U251细胞对顺铂的化疗敏感性。p16基因转染后对顺铂诱导凋亡作用的抑制可能是其主要机制。 陈一招 徐如祥 张世忠 邹玲关键词:P16基因 顺铂 脑胶质瘤 p16基因对脑胶质瘤细胞生长及化疗敏感性的影响 被引量:2 2000年 目的 :探讨p16基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及其与脑胶质瘤细胞对鬼臼噻吩苷、顺铂化疗敏感性间的关系。方法 :将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U2 5 1,观察p16基因长期稳定转染对胶质瘤细胞的作用 ,并筛选阳性克隆。同时以空载体质粒PCDNA3为对照。Northern杂交检测p16基因表达 ,对转染后细胞生长情况、细胞周期、裸鼠致瘤能力的变化及细胞对鬼臼噻吩苷和顺铂敏感性的变化进行分析。结果 :外源p16基因的高水平表达显著抑制了胶质瘤U2 5 1细胞的生长 ,克隆形成率减少 ,肿瘤细胞发生了G1期阻滞 ,同时 ,细胞对鬼臼噻吩苷和顺铂的敏感性降低 ,其诱导的凋亡细胞数减少。结论 :外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖 ,同时抑制了鬼臼噻吩苷和顺铂对U2 5 1细胞的诱导凋亡作用进而降低了U2 5 1细胞对鬼臼噻吩苷和顺铂的化疗敏感性。 陈一招 徐如祥 张世忠 邹玲 张积仁 张健关键词:脑胶质瘤 P16基因 顺铂 药物疗法 N-糖基化抑制反应诱导胶质瘤细胞的早期凋亡 被引量:2 2000年 目的研究N-糖基化抑制对胶质瘤细胞生长状态的影响。方法以依霉素(tunicamycin)为N-糖基化抑制剂,作用于人脑胶质瘤细胞株SWO-38,运用电镜技术及琼脂糖电泳,观察N-糖基化抑制对胶质瘤细胞生长的影响。结果依霉素作用于SWO-38细胞后,透射电镜下细胞出现线粒体等细胞器增殖,核仁消失,细胞团缩。琼脂糖电泳出现DNA梯形条带。结论N-糖基化抑制可以诱导胶质瘤细胞的早期凋亡。 张健 张宗城 李鹏 张积仁关键词:N-糖基化 神经胶质瘤 细胞凋亡 脑肿瘤 牛脑中性鞘糖脂Glob-N的分离鉴定 被引量:3 2000年 为了探索一种新的中性鞘糖脂 (neutral glycosphingolipids,N- GSL s)单一组分的纯化分离鉴定方法 ,将通过改良的 Hakomori方法提取的牛脑中性鞘糖脂经过加压柱层析 ,梯度甲醇 /氯仿溶液洗脱。所得到的产物行 1 H- NMR(核磁共振 )和 1 3C- NMR测定。结果发现含甲醇 6 0 %的甲醇 /氯仿溶液的洗脱物为纯化 Glob- N (红细胞糖苷脂 ) ,层析展开后呈单一清晰条带 ,Rf值 0 .45。初步结构分析表明牛脑 Glob- N含 N-乙酰半乳糖 ,共 3个糖基 ,其神经酰胺部分含有 2 6个碳。结果表明柱层析分离中性鞘糖脂单一组分效果好 ,纯度高。牛脑 Glob- N结构中含 张宗城 张积仁 张健 林永成 汪森明关键词:中性鞘糖脂 纯化 脑胶质瘤中性鞘糖脂抗原的研究 被引量:4 1999年 目的 为了解脑胶质瘤中性鞘糖脂(NGSLs) 表达的规律及发现脑胶质瘤相关胚胎鞘糖脂抗原。 方法 本实验运用改良的Hakomori 的方法提取、纯化了脑胶质瘤及胚胎脑的中性鞘糖脂,并行高效薄层层析(HPTLC) 。 结果 胶质瘤的NGSLs 以CDH( 二己糖神经酰胺)及CTH( 三己糖神经酰胺) 的表达较正常人脑强,胚胎脑NGSLs 以CMH(单己糖神经酰胺)及CTH表达为主,与正常人脑组织NGSLs 相比,胶质瘤及胚胎脑均不含有Globoside( 红细胞糖苷脂) 。 结论 脑胶质瘤及胚胎脑的NGSLs 表达具有一定程度上的相似性。 张健 张积仁 周殿元关键词:脑胶质瘤 中性鞘糖脂 胚胎 抗原 Glob-N对胶质瘤细胞株SWO-38生长的体外实验研究 被引量:2 2000年 目的 :为了探讨正常及肿瘤相关中性鞘糖脂 (N GSLs)对肿瘤细胞生长的调控作用。方法 :采用改良的Hakomori方法提取、纯化正常人脑、牛脑、正常人“O”型血红细胞膜的N GSLs ,运用柱层析的方法分离正常人脑、牛脑、红细胞膜的红细胞糖苷脂 (Glob N)及人脑二己糖神经鞘氨醇 (CDH) ,MTT法检测各种来源的Glob N及人脑CDH对胶质瘤细胞株SWO 38生长的影响。结果 :三种不同来源的Glob N均能抑制SWO 38细胞的增殖。其中以正常人脑的作用最强 ,红细胞来源的作用次之 ,牛脑来源的最弱 ,而人脑CDH则缺乏抑制作用。结论 :Glob N是一种胶质瘤细胞的生长抑制因子 。 张健 张宗城 张积仁 汪森明关键词:脑胶质瘤 中性鞘糖脂 SWO-38 正常人脑Glob-N的分离及其结构的初步分析 2000年 目的 探索一种新的脑胶质瘤生长抑制因子Glob-N的分离鉴定方法。方法 人脑中性鞘糖脂经过加压柱层析,梯度甲醇/氯仿溶液洗脱。对所得到的产物行1H-NMR和13C-NMR测定。结果 含甲醇60%的甲醇/氯仿溶液的洗脱物为纯化Glob-N,层析展开后呈单一清晰条带,Rf值0.45。初步结构分析表明人脑Glob-N含N-乙酰半乳糖,共3个糖基,其神经酰胺部分共有33个碳原子。结论 柱层析分离中性鞘糖脂单一组分效果好,纯度高;人脑Glob结构中含3个糖基。 张宗城 张积仁 张健 林永成 汪森明关键词:柱层析 纯化 脑胶质瘤 生长抑制因子 N糖基化抑制对脑胶质瘤细胞株SWO-38 N-GSLs合成的影响 被引量:2 2000年 目的 探讨N糖基化抑制对肿瘤细胞中性鞘糖脂 (N GSLs)合成的影响。方法 以衣霉素 (Tunicamycin)为N 糖基化抑制剂 ,观察其对胶质瘤细胞株SWO 38糖蛋白及N GSLs合成的影响。结果 当衣霉素浓度≥ 5ug ml,作用时间≥ 8小时 ,它可以在体外选择性地抑制N糖蛋白的合成 ,同时也抑制N GSLs的合成 ,而对N GSLs单一组分的相对百分含量无明显影响。结论 N 糖基化抑制剂在抑制细胞N糖蛋白合成的同时 ,对细胞N GSLs的合成也有抑制作用。 张健 张积仁 汪森明关键词:中性鞘糖脂 脑胶质瘤 脑胶质瘤p16基因转染对细胞生长及放射敏感性的影响 被引量:3 2000年 目的 探索p16基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及p16基因与肿瘤细胞放射敏感性间的关系。方法 将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U251、C6,筛选阳性克隆。同时以空载体质粒pCDNA3为对照,免疫组化检测p16基因表达,用MTT法测定细胞生长曲线及肿瘤杀伤率。结果 转染p16基因的U251、C6细胞有外源p16基因的整合及表达,克隆形成率减少,生长速度明显减慢,对辐射的敏感性增强。结论 导入外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖,提高胶质瘤细胞对辐射的敏感性。 陈一招 徐如祥 张世忠 郑景熙 张云 邹琳关键词:脑胶质瘤 P16基因 放射疗法