河南省基础与前沿技术研究计划项目(112300410070)
- 作品数：5 被引量：11H指数：3
- 相关作者：崔留欣张慧珍易丹李超锋张丰泉更多>>
- 相关机构：郑州大学河南省人民医院嵊州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省科技攻关计划河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微囊藻毒素对大鼠睾丸支持细胞凋亡相关蛋白表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的利用体外培养的大鼠睾丸支持细胞研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)对细胞中凋亡相关蛋白表达水平的影响。方法大鼠睾丸细胞分别染毒0(对照)、0.5、1、10、20μg/ml MC-LR溶液后培养24和48 h,采用MTT法检测细胞活性。调整细胞密度为4×106～5×106/ml,分别染毒含0(对照)、1、10μg/ml MC-LR无血清培养液后培养24和48 h,采用Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白[p53基因调节蛋白(P53)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、前凋亡蛋白(Bax)]表达水平的变化。结果与对照组比较,10和20μg/ml MC-LR染毒24和48 h后大鼠睾丸支持细胞活性均降低(P<0.05)。与对照组相比,1、10μg/ml MC-LR染毒24 h以及10μg/ml MC-LR染毒48 h时大鼠睾丸支持细胞中P53蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05),10μg/ml MC-LR染毒24、48 h大鼠睾丸支持细胞中Bax蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05),Bcl-2相对表达量显著降低(P<0.05)。结论较高剂量MC-LR能明显抑制支持细胞活性,凋亡相关蛋白P53、Bcl-2、Bax参与调控MC-LR诱导的支持细胞凋亡。
- 杨明峰张丰泉余晓齐郭大众易丹李超锋崔留欣张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LR睾丸支持细胞凋亡相关蛋白
- 微囊藻毒素-LR对中国仓鼠卵巢细胞凋亡的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)致中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的凋亡作用。方法调整CHO细胞密度约为1×105/ml,分别用终浓度为0(对照)、1、5、10、15μg/ml的MC-LR染毒24 h后,采用噻唑兰(MTT),法测细胞活性,计算半致死效应浓度(EC50)。分别用终浓度为0(对照)、2.5μg/m(l1/4 EC50)、5μg/m(l 1/2 EC50)、10μg/m(lEC50)的MC-LR染毒24 h后,测定活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的活力和细胞凋亡率。结果与对照组相比,各浓度MC-LR染毒组CHO细胞内ROS含量、caspase-3活力和细胞凋亡率均较高,线粒体膜电位降低,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着MC-LR染毒浓度的升高,CHO细胞内ROS含量、caspase-3活力和细胞凋亡率均呈上升趋势,线粒体膜电位呈下降趋势。结论 MC-LR暴露可诱导体外培养的CHO细胞发生凋亡。
- 付余杨明峰易丹程学敏刘伟崔留欣张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LR中国仓鼠卵巢细胞线粒体膜电位细胞凋亡天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3
- Caspase-3在微囊藻毒素-LR诱导大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)染毒对大鼠睾丸支持细胞凋亡形态以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活力的改变。方法自健康18～20日龄SPF级SD雄性大鼠体内分离、培养睾丸支持细胞。用含MC-LR终浓度分别为0(对照)、1、10μg/ml的培养液培养48 h。采用Hoechst荧光染色法检测睾丸支持细胞的凋亡情况;采用caspase-3底物切除法检测caspase-3的活力。结果随着MC-LR染毒剂量的增高,大鼠睾丸支持细胞凋亡率升高。与对照组比较,仅10μg/ml MC-LR染毒的睾丸支持细胞caspase-3活力升高,差异有统计学意义(P<0.05);而1μg/ml MC-LR染毒睾丸支持细胞caspase-3活力略有降低,但差异无统计学意义。结论 MC-LR能诱导睾丸支持细胞发生凋亡,caspase-3在MC-LR诱导睾丸支持细胞凋亡中起重要调控作用。
- 李超锋张丰泉辛红霞易丹赵仲麟袁超崔留欣张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LR睾丸支持细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
- 微囊藻毒素-LR对中国仓鼠卵巢细胞中过氧化氢酶活力和丙二醛含量的影响被引量：4
- 2012年
- 目的通过检测中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)含量的变化研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)对CHO细胞的氧化应激作用。方法调整CHO细胞密度约为1×105/ml,分别用终浓度为0(对照)、1、5、10、15μg/ml的MC-LR染毒24 h后,采用MTT法测细胞活性,计算半致死效应浓度(EC50)。调整细胞密度约为1×106/ml,分别用终浓度为0(对照)、2.5(1/4 EC50)、5(1/2 EC50)、10μg/m(lEC50)的MC-LR染毒24 h后,测定细胞中CAT活力和MDA含量。结果随着MC-LR染毒浓度的升高,CHO细胞活性呈下降趋势。与对照组相比,1μg/ml染毒组细胞活性降低,但差异无统计学意义;5、10、15μg/ml MC-LR染毒组CHO细胞活性较低,差异均有统计学意义(P<0.05),且10μg/ml MC-LR染毒组细胞活性为53.8%,接近50%,故EC50约为10μg/ml。与对照组相比,各浓度MC-LR染毒组CHO细胞内CAT活力较低,MDA含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MC-LR染毒可使CHO细胞中CAT活力降低,MDA含量升高,提示其对CHO细胞有氧化损伤作用。
- 易丹余晓齐辛红霞李超锋张丰泉崔留欣张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LR中国仓鼠卵巢细胞过氧化氢酶丙二醛
- N-乙酰半胱氨酸和微囊藻毒素-LR联合暴露对中国仓鼠卵巢细胞凋亡的影响
- 2013年
- 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)和微囊藻毒素-LR(MC-LR)联合暴露对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞凋亡的影响。方法取对数生长期细胞,分别加入0(对照)、1、5、10、20、30、40、50、60、80 mmol/L的NAC溶液以及终浓度为0、1、5 mmol/L的NAC溶液+终浓度为0、2.5、5、10μg/ml的MC-LR溶液培养24 h。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测细胞活性,采用2,7-二氯荧光乙酰乙酸盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量的变化,采用四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)荧光探针法检测线粒体膜电位的变化,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin VFITC/PI)双染法检测细胞凋亡率。结果 1、5 mmol/L NAC单独作用对细胞活性无明显抑制作用,且细胞存活率均在80%以上;NAC与MC-LR同时作用时,细胞活性增加,ROS含量减少,线粒体膜电位升高,凋亡率减少。结论 MC-LR可诱导CHO细胞产生大量ROS从而引起细胞凋亡,抗氧化剂NAC可拮抗MC-LR诱导ROS生成导致的细胞凋亡。
- 薛利剑李锦辉杨明峰崔留欣张成鹏焦建华张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LRN-乙酰半胱氨酸活性氧细胞凋亡中国仓鼠卵巢细胞
