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南京医科大学科技发展基金(2011NJMU205)
作品数:
1
被引量:4
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相关作者:
顾晓峰
王俊芳
王琼
程力
夏仁云
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顾晓峰
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2012
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转化生长因子β1诱导永生化人前软骨干细胞向髓核样细胞分化的实验研究
被引量:4
2012年
目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)诱导永生化人前软骨干细胞(IPSCs)向髓核样细胞分化的可行性。方法将体外培养的IPSCs接种于温敏型壳聚糖水凝胶(C/GP)三维支架上,加人含TGF-β1的诱导培养基,低氧条件下进行诱导培养,观察三维支架上IPSCs的生长及分化情况。7d后行AlcianBlue染色,分析细胞外基质糖胺聚糖(GAG)合成情况,并收集细胞,提取RNA。RT-PCR检测诱导前后髓核样细胞标志基因Ⅱ型胶原(Collagen11)和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达情况,WesternBlot检测诱导前后细胞内B.catenin蛋白表达水平的变化。结果IPSCs在三维支架上生长状态良好,诱导7d后,AlcianBlue染色表明,细胞外基质GAG的合成明显增多,实验组(诱导培养基)明显多于对照组(普通培养基)。RT-PCR证实Ⅱ型胶原和Aggrecan的基因表达水平明显增高,实验组明显高于对照组;West-eYnBlot证实细胞内p-catenin蛋白表达水平明显上调,实验组明显高于对照组。结论IPSCs经TGF—β1诱导可在体外定向分化为髓核样细胞,诱导分化后的细胞具有良好的分泌功能,能够有效地分泌细胞外基质成分。TGF—β1可能通过上调细胞内B—catenin的表达诱导IPSCs向髓核样细胞分化。
顾晓峰
王琼
夏仁云
方煌
程力
王俊芳
关键词:
转化生长因子Β1
软骨细胞
干细胞
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