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国家自然科学基金(31371979)

作品数:3 被引量:5H指数:1
相关作者:陈月华蔡峻边强汪婷婷潘锦华更多>>
相关机构:南开大学教育部更多>>
发文基金:天津市自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇生物学
  • 1篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇芽胞
  • 3篇芽胞杆菌
  • 3篇苏云金芽胞杆...
  • 3篇几丁质
  • 3篇几丁质酶
  • 2篇组成型
  • 2篇组成型表达
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白诱导
  • 1篇凋亡
  • 1篇芽孢
  • 1篇芽孢杆菌
  • 1篇疫霉
  • 1篇生防潜力
  • 1篇苏云金芽孢
  • 1篇苏云金芽孢杆...
  • 1篇启动子
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞凋亡
  • 1篇辣椒

机构

  • 4篇南开大学
  • 1篇教育部

作者

  • 4篇蔡峻
  • 4篇陈月华
  • 2篇边强
  • 2篇姜昆
  • 2篇汪婷婷
  • 1篇谢池楚
  • 1篇罗洋
  • 1篇史进
  • 1篇张娜
  • 1篇潘锦华
  • 1篇袁宇

传媒

  • 3篇微生物学通报
  • 1篇中国植物保护...

年份

  • 2篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2014
3 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
组成型表达chi基因的Bt工程菌株构建及其特性被引量:1
2014年
【目的】通过构建能够组成型高效表达几丁质酶的苏云金芽胞杆菌工程菌株,以提高其抑真菌活性。【方法】首先通过PCR扩增获得Bti75菌株chiB全长及系列缺失启动子片段,与本室构建的启动子探测型载体pCB连接,转化Bti75菌株,通过β-半乳糖苷酶活性检测及β-半乳糖苷酶mRNA的Real time-PCR检测,确定了一段长度为190 bp的组成型高效表达启动子。将这一启动子分别与Bti75自身几丁质酶基因chiA以及地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)的几丁质酶基因chiMY连接构建了组成型高效表达的工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)。应用几丁质酶酶活检测、SDS-PAGE及酶谱分析检测了工程菌几丁质酶的表达情况。最后,通过检测工程菌发酵粗酶液对真菌孢子萌发和菌丝生长的影响,评估了工程菌对3种植物病原真菌的抗真菌活性。【结果】在没有诱导物存在的情况下,Bti75(pBPΔ7)菌株表达的β-半乳糖苷酶酶活和β-半乳糖苷酶mRNA的转录量分别是Bti75(pBP)菌株的7倍和2.5倍左右。在没有几丁质诱导的情况下,与野生株Bti75相比,工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)的几丁质酶活性均提高了3.5倍左右。SDS-PAGE及酶谱分析证明目的几丁质酶在非诱导条件下达到组成型高效表达,抑真菌实验显示工程菌Bti75(pDA)和Bti75(pDM)抑制3种植物病原真菌的活性明显提高。【结论】发现190 bp的缺失启动子能够组成型高效表达不同来源的几丁质酶,无需诱导物的诱导,工程菌株就能展现良好的抗真菌能力。
李蓬飞罗洋谢池楚蔡峻边强陈月华
关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶组成型表达
转异源chi基因的Bt工程菌株的生防潜力评价被引量:1
2016年
【目的】构建增强抑制真菌能力兼杀虫的苏云金芽胞杆菌多功能生防菌株。【方法】将含有组成型高效表达启动子、地衣芽胞杆菌chi MY基因的重组质粒p DM,转化进杀虫活性高且有一定抑菌活性的Bt519-1菌株。酶谱分析方法确认Bt519(p DM)组成型异源表达几丁质酶。室内测定工程菌株抑菌谱,计算抑菌效率,确定最敏感的植物病原真菌,进行植物盆栽病害防治的应用潜力评价。将不同浓度的Bt粗酶液灌入甜椒幼苗根部,12 h后接种辣椒疫霉孢子液,接种2 d后开始观察,记录发病株数。自7 d起调查植株发病情况统计并分析防治效果。【结果】SDS-PAGE及酶谱分析证明,Bt519(p DM)能够特异表达68 k D蛋白,该蛋白为异源几丁质酶Chi MY。抑菌谱测定证明,工程菌抑制效率达到90%以上的有5种真菌,其中最明显的是辣椒疫霉。盆栽实验证明,Bt519(p DM)7 d的防效为73.2%。工程菌株对棉铃虫的半致死浓度(LC50)为121.26 mg/L。【结论】Bt519(p DM)是一株有应用潜力的生防菌株。
张娜李蓬飞陈月华蔡峻史进边强
关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶组成型表达辣椒疫霉
苏云金芽胞杆菌CcpA蛋白对几丁质酶基因chiA和chiB的表达调控作用被引量:3
2016年
【目的】研究苏云金芽胞杆菌Bti75中糖代谢蛋白Ccp A对两种几丁质酶基因chi A和chi B的表达调控。【方法】利用PREDetector软件分析Bti75 chi A和chi B的基因上游区序列,EMSA方法在体外验证Ccp A是否能与chi A和chi B基因的启动子区域片段特异性结合。构建ccp A基因敲除载体以获得敲除突变株Δccp A,运用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术比较有无葡萄糖存在的情况下,Ccp A对chi A和chi B基因表达的影响。【结果】计算机分析显示,chi B上游启动子区存在一个潜在的Ccp A结合位点crechi B,而chi A上游启动子区未发现类似序列。体外实验表明,Ccp A蛋白在共阻遏蛋白Hpr-Ser45-P的参与下可与chi B基因启动子区特异性结合,而与chi A基因启动子区没有特异性结合;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,Bti75中ccp A基因敲除后,同样在葡萄糖存在下chi B的表达量提高而chi A的表达量变化不明显。【结论】在葡萄糖存在的情况下,Ccp A蛋白能抑制苏云金芽胞杆菌中几丁质酶chi B的表达,而chi A的表达不受Ccp A调控。
潘锦华姜昆汪婷婷陈月华蔡峻
关键词:苏云金芽胞杆菌几丁质酶
Vip3A蛋白诱导昆虫细胞凋亡
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)营养期分泌产生的Vip3A蛋白与Bt芽胞期产生的杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICPs)没有同源性,尤其他对...
姜昆汪婷婷袁宇陈月华蔡峻
关键词:苏云金芽孢杆菌SF9细胞细胞凋亡
共1页<1>
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