福建省科技计划项目(2001Z020)
- 作品数：5 被引量：30H指数：3
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- 大鼠脑神经干细胞系(RNSC-FMU 1)的建立和鉴定被引量：2
- 2004年
- 采用无血清培养液分离和培养新生SD 大鼠脑的神经干细胞,以机械分散的方法传代,成功地建立了大鼠脑神经干细胞系(RSNC-FMU 1)。该细胞系可在体外长期传代,至今已在体外连续生长超过21个月(>100代),保持了神经干细胞的特性和正常的核型,经诱导可分化成为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,具有较旺盛的自新能力,倍增时间约为20h,并可冷冻保存,裸鼠体内移植证实其不具有成瘤性。该细胞系为神经干细胞研究提供了一个良好的工具。
- 郑志竑胡建石林玲游晓青张琦林建银
- 关键词：核型分化
- 神经营养因子对培养不同时间的大鼠神经干细胞的定向诱导分化被引量：7
- 2006年
- 采用BDNF、GDNF、PDGF和forskolin对培养不同时间的大鼠脑神经干细胞(NSC)进行诱导分化,通过免疫荧光染色观察这些诱导剂对NSC分化为神经元的作用,以RTPCR和Westernblot检测体外培养不同时间的NSC表达TrkB受体的水平,探讨它与NSC诱导分化反应性的关系。结果表明,各种神经营养因子诱导的MAP2阳性细胞数均高于未加神经营养因子的对照组(P<0.001)。在所使用的神经营养因子中,以BDNF促进NSC分化成神经元的效果为著,MAP2阳性细胞数约为空白对照组的6倍。而体外培养3个月的NSC单用BDNF诱导分化后未见MAP2阳性细胞,仅在联合使用BDNF和forskolin时方可诱导出少数MAP2阳性细胞。RTPCR和Westernblot检测结果显示,体外培养3个月的NSC表达TrkB受体的mRNA及蛋白的量较培养1个月的NSC减少3倍,提示培养3个月的NSC对BDNF诱导反应性的减弱可能与TrkB受体表达下调有关。
- 林玲郑志竑胡建石蔡良知林建银
- 关键词：神经干细胞分化神经营养因子
- 体外培养的神经干细胞球几种离散方法的探讨被引量：9
- 2004年
- 目的探讨一种新的有效离散体外培养的神经干细胞球的方法.方法采用单纯玻璃吸管机械分散,胰蛋白酶消化,不锈钢滤网研磨,单纯滤网吸管分散和滤网吸管结合短时间胰酶消化等五种方法离散神经干细胞球,比较其各自的离散效果和离散后细胞存活情况.结果单纯玻璃吸管吹打不能完全离散神经球;胰蛋白酶消化在30min内不能完全离散神经球,延长酶消化时间虽可离散细胞,但细胞难以存活;不锈钢滤网研磨或单纯滤网吸管吹打离散对细胞损伤大,存活率低(分别为64.1%和71.9%);滤网吸管结合短时间(3～5min)胰酶消化离散细胞效果好,存活率(92.1%)显著高于上述其它方法(P＜0.05).结论滤网吸管结合短时间胰酶消化法离散神经干细胞球,离散效果好,细胞存活率高,是一种新的有效离散体外培养的神经干细胞球的好方法.
- 张琦胡建石林玲郑志竑
- 关键词：神经干细胞酶消化神经球胰酶胰蛋白酶细胞存活
- 细胞移植术对大鼠纹状体内谷氨酸和多巴胺的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨细胞移植过程中麻醉以及细胞植入等操作对中枢神经递质谷氨酸和多巴胺的影响。方法体外培养的新生大鼠大脑神经干细胞定位植入正常成年大鼠大脑纹状体，采用脑微透析术结合高效液相色谱（HPLC）动态检测探针置入、麻醉剂氯胺酮和戊巴比妥钠以及移植细胞等操作对谷氨酸和多巴胺水平的影响。结果探针置入大鼠纹状体后15min，纹状体内谷氨酸和多巴胺的水平均明显高于基础值，5～6h后方恢复至基础水平。戊巴比妥钠或氯胺酮腹腔麻醉后15min均可使大鼠纹状体内谷氨酸和多巴胺水平呈一过性升高。细胞植入本身对大鼠纹状体内谷氨酸和多巴胺水平无明显影响。结论常规剂量的戊巴比妥钠或氯胺酮腹腔麻醉均可使脑内谷氨酸和多巴胺水平短暂升高，进行脑微透析术检测谷氨酸和多巴胺应在探针置入至少6h后进行。
- 林玲郑瑜宏郑志竑
- 关键词：细胞移植脑微透析神经递质
- 不同配方的神经营养因子对神经干细胞存活和增殖能力的影响被引量：12
- 2004年
- 目的:探讨由营养因子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)及N2添加剂所组成的配方中最适合神经干细胞存活和增殖的组合。方法:分离培养大鼠脑神经干细胞,免疫荧光细胞染色加以鉴定,采用不同组合配方的培养液培养细胞,通过计数神经干细胞球数,判定其对神经干细胞存活和增殖的影响。结果:在bFGF,EGF和N2组成的8种不同配方培养液中,bFGF组是神经干细胞存活和增殖的最适配方,是8周中与对照组比较所有P<0.05的惟一配方;EGF具有促进神经干细胞分化的作用,而促增殖能力不如bFGF;相比之下,N2对神经干细胞增殖的影响最弱。结论:bFGF对神经干细胞增殖及较长期存活具有重要的作用,其作用较EGF和N2强,EGF还具有促神经干细胞分化的作用。
- 游晓青张琦林玲胡建石姜芬郑志竑
- 关键词：神经营养因子神经干细胞细胞分化细胞增殖
