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转海蓬子Na^+/H^+逆向运输蛋白基因番茄的耐盐性研究被引量：4: 2007年; 以转海蓬子Na+/H+逆向运输蛋白基因(Nhap)的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)阳性植株和对照植株为材料,测定叶片相对含水量、质膜透性、K+/Na+比值和叶绿素含量4项耐盐指标.结果表明:在盐胁迫条件下,转基因植株的相对含水量、K+/Na+比值和叶绿素含量明显高于对照植株,而叶片质膜透性明显低于对照植株,说明Nhap基因已经在番茄转化植株体内表达,提高了转基因植株的耐盐性.; 张桂和郭建春叶妙水; 关键词：转基因番茄耐盐指标

双向凝胶电泳的实验操作及进展被引量：6: 2006年; 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳是研究蛋白质组的核心技术,本文重点介绍了双向凝胶电泳的原理、实验操作过程中的具体步骤以及近年来在实验过程中发展的一些新方法和进展。; 叶妙水钟克亚胡新文郭建春; 关键词：双向凝胶电泳蛋白质组等电聚焦

柱花草nptII、hpt和bar基因优化转化体系的建立被引量：2: 2005年; 以热研5号柱花草(Stylosanthes guianensis cv.Ryan No.5)为材料,系统地研究了不同选择标记基因NptII,hpt和bar的柱花草转化体系.研究发现柱花草最适合基因转化的外植体是幼苗下胚轴.最佳愈伤组织形成和愈伤组织分化培养基为M S+NAA 1.0m g/L+6B-A4.0m gL/+3%蔗糖,pH6.最适宜外植体生根培养基是MS+N AA0mg/L+3%蔗糖(pH6).Glufosinate选择压力为0.15m g/L,Kanam ycin选择压力为20mg/L,Hygrom ycin选择压力为15m g/L.在以上的优化转化系统中,柱花草幼苗下胚轴分别侵染带NptII,hpt和bar基因的农杆菌(GV 3101)后,可获得30%愈伤组织具有kanamycin抗性,5%愈伤组织具有Hygromycin抗性,50%的愈伤组织具有Glufosinate抗性.; 段瑞军胡新文符少萍郭建春; 关键词：柱花草 BAR

基因功能研究的加速器——高通量克隆表达系统被引量：2: 2006年; 大规模基因测序已经完成了多个重要物种的基因组序列分析,功能基因组学研究的序幕已经拉开。大规模的体外克隆获得全长或部分的开放阅读框是蛋白质表达、干扰分析和定位分析、相互作用分析的必经环节,对使用简便、成本低廉、保真度高和易于在不同体系中穿梭的高通量克隆体系的了解、评价和使用已经成为基因组水平研究的重要问题。为此,对目前存在的多种高通量克隆体系进行了系统的介绍和比较。; 孙健刘国振; 关键词：开放阅读框同源重组位点特异性重组

盐生经济作物北美海蓬子与盐渍地生态环境改造被引量：17: 2006年; 北美海蓬子Salicornia bigelovii属于藜科海蓬子属植物,是一种耐盐性极强的真盐生植物,它最佳生长的Na+浓度范围很广,同时又是一种极具开发潜力的经济作物。大面积种植北美海蓬子不但可以恢复和改造海岸带生态环境、治理沙漠化、充分利用盐碱地、实现资源的可持续利用,而且由于北美海蓬子本身所具有的巨大经济价值,将为农民发展生态产业脱贫致富创造极好的机会。为此就北美海蓬子经济价值,北美海蓬子种植技术、耐盐机理和分子生物学方面的研究进展,北美海蓬子开发前景作一综述。; 叶妙水钟克亚张桂和胡新文郭建春; 关键词：北美海蓬子经济作物海水农业盐渍地

转录因子CBF在植物抗寒中的重要作用被引量：35: 2006年; 低温能够诱导植物许多基因的表达,从而使植物具有抗寒性,这种现象称为冷驯化。对于植物冷驯化的分子机理,目前研究得最多的是CBF转录因子调控的信号转导途径,其作用途径可归纳为:CBF(CrepeatBindingFactor)转录因子→CRT/DRE(Crepeat/DehydrationResponsiveElement)基序→COR基因表达→植物抗寒性增加。研究CBF转录因子在抗寒中的作用机制,能为提高植物的抗寒性,培育抗寒作物品种提供新方向。; 钟克亚叶妙水胡新文郭建春; 关键词：CBF转录因子植物抗寒

几种海洋微藻基因组DNA的分离提取及PCR检测被引量：19: 2007年; 用改良CTAB法分别提取6种海洋微藻的基因组DNA,发现提取的DNA纯度、产率高(>100μg.g-1鲜重),DNA完整性好。以6种海洋微藻的基因组DNA为模板,并以5'TTCGAGCCAG3'(OPC-01)为随机引物,对PCR反应条件进行研究。结果表明,25μl反应体系中,Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP 5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:2.0mmol.L-1、1.6U、20pmol.L-1、50ng和2.5mmol.L-1。扩增程序优化为:94℃预变性5min,94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,循环45次,最后于72℃再延伸10min。酶切实验结果表明,6种海洋微藻的基因组DNA都能被EcoRⅠ酶切,酶切图谱呈弥散状,满足分子水平操作的要求,可直接应用于进一步的分子生物学实验。; 张桂和徐碧玉王珺; 关键词：海洋微藻 DNA提取 CTAB 酶切 PCR检测

与拟南芥抗寒性相关的CBF3和AtGolS3基因克隆及其表达载体的构建被引量：3: 2006年; 用RT-PCR技术从拟南芥(Arabidopsisthaliana)中克隆到抗寒相关基因CBF3、AtGolS3,序列分析后用BLAST软件作同源序列分析的结果显示,它们的核苷酸序列与GenBank中登录的拟南芥CBF3(AF074602)、AtGolS3(AB062850)核苷酸序列完全相同。CBF3和AtGolS3基因分别与植物表达载体pVKH相连构建pVKH-35S-CBF3-pA、pVKH-35S-AtGolS3-pA以及通过中间载体pRT101,将AtGolS3连接到pVKH-35S-CBF3-pA上,成为各自带有35S启动子及PolyA终止子的双价植物表达载体pVKH-35S-CBF3-pA-35S-AtGolS3-pA。; 钟克亚叶妙水胡新文符少萍郭建春

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海南省自然科学基金(30406)