哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2010RFQXN101)
- 作品数:2 被引量:11H指数:2
- 相关作者:张明辉仇有文高学军刘营袁肖寒更多>>
- 相关机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:哈尔滨市科技创新人才研究专项资金国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 抗除草剂转基因大豆插入拷贝数及其旁侧序列分析被引量:7
- 2011年
- 目的:确定抗除草剂转基因大豆外源基因拷贝数和其插入位点侧翼序列。方法:采用绝对定量PCR法测定转EPSPS基因大豆中外源基因拷贝数,内参照基因标准曲线选用大豆凝集素(Lectin)基因为标准品,外源基因标准曲线以含EPSPS基因的阳性质粒为标准品。采用基因组步移技术和巢式PCR方法确定抗除草剂转基因大豆插入位点旁侧序列。结果:抗除草剂转基因大豆外源基因的拷贝数为1。CaMV35S上游扩增887bp,NOS下游扩增1 340bp。结论:明确了EPSPS外源基因在转基因大豆中为单拷贝,转基因大豆插入位点附近大豆基因组发生了DNA重排。
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- 关键词:旁侧序列拷贝数基因组步移
- 实时荧光定量PCR技术在转基因大豆A5547-127检测中的应用被引量:4
- 2013年
- 采用实时荧光定量PCR技术检测耐除草剂转基因大豆A5547-127,并对检测方法的精确度和准确度指标进行评估,分析检测方法的特异性和适用性。结果表明,定量PCR检测方法的LOD和LOQ分别是1和10copies.μL-1,检测方法试验得到的所有偏差值均在允许范围之内,表明建立的定量PCR检测方法能够为转基因大豆A5547-127提供科学的定量检测依据,为转基因作物的鉴定、检测提供新方法。
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- 关键词:大豆实时荧光定量PCR