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B型流感亚系单碱基延伸终止荧光偏振快速检测的研究: 2013年; 目的建立一种利用单碱基延伸终止结合荧光偏振技术(Fluorescence polarization,FP)快速检测B型流感By(B/Yamagata)和Bv(B/Victoria)亚系的新方法。方法从GenBank下载By和Bv血凝素(HA)基因各50条序列,通过MEGA软件进行分析,利用Primer Premier 5.0设计B型流感病毒亚系特异性引物和单标记延伸引物,建立单碱基延伸终止法与荧光偏振检测方法。结果 40株Bv和40株By病毒用单碱基延伸终止法与荧光偏振检测,与传统的基因测序结果一致性达100%。结论本方法操作简便、敏感性及特异性高、判读结果直观明确、检测费用低,适合于流感监测实验室对流感病毒的快速分子诊断。; 王敬忠刘涛房师松王昕程小雯张仁利程锦泉; 关键词：B型流感病毒荧光偏振亚系

B型流感单碱基延伸终止荧光偏振法分型分析: 2013年; 目的了解2010-2012年深圳市B型流感的流行状况,应用单碱基延伸终止荧光偏振法快速诊断,为制定预防控制措施提供依据。方法从GenBank随机下载By和Bv HA基因,通过MEGA分析,利用Primer Premier软件设计特异引物和通用探针,应用单碱基延伸终止法与荧光偏振技术对流感哨点监测医院随机采集流感样病例的咽拭子或咽漱液标本进行快速检测,用HA（IHemagglutination inhibition）实验确认的B型流感病毒亚系分离毒株进行特异性验证。结果 2010-2012年共采集并检测流感样病例咽拭子4 630份,快速诊断B型流感病毒阳性189例,与HAI分离并鉴定结果一致,总阳性率为4.08%;以2012年第7周阳性率最高,达51.61%;病毒阳性者平均年龄为（13±15）岁,其中小于10岁组的阳性率最高,达4.70%。结论 2010-2012年深圳市B型流感病毒的监测中,Victoria亚型为主要流行株。深圳B型流感病毒主要累及青少年和老年人群。应继续加强监测工作,并在流行季节及时采取预防控制措施以保护公众的身体健康。; 王敬忠刘涛王昕房师松程小雯; 关键词：B型流感病毒荧光偏振

深圳市2009-2011年乙型流感病毒流行特征分析被引量：3: 2013年; 目的了解2009-2011年深圳市乙型流感的流行状况,为制定预防控制措施提供依据。方法在流感哨点监测医院随机采集流感样病例的咽拭子或咽漱液标本,用犬肾传代细胞进行病毒分离,分离阳性的病毒用血凝抑制实验进行流感病毒株型别鉴定。结果 2009-2011年共采集并检测流感样病例咽拭子5 353份,其中分离并鉴定出乙型流感病毒阳性139例,总阳性率为2.60%;以2009年第11周阳性率最高,达33.33%;病毒阳性者平均年龄为(13±15)岁,其中大于60岁组的阳性率最高,达4.21%。结论 2009-2011年深圳市乙型流感病毒的监测中,Victoria亚型为主要流行株。深圳乙型流感病毒主要累及青少年和老年人群。应继续加强监测工作,并在流行季节及时采取预防控制措施以保护公众的身体健康。; 王敬忠刘涛房师松王昕程小雯; 关键词：乙型流感病毒

单标记延伸结合荧光偏振技术快速检测B型流感亚系方法的建立及应用被引量：1: 2013年; 目的建立一种单标记延伸(OLE)结合荧光偏振技术(FP)快速检测B型流感By和Bv亚系的新方法。方法从GenBank下载By和Bv血凝素(HA)基因各50条序列,通过MEGA软件进行分析,利用Primer Premier 5.0设计B型流感病毒亚系特异性引物和单标记延伸引物,RT-PCR扩增目的片段,用OLE引物添加亚系特异性荧光标记的双脱氧核糖核苷酸,建立单碱基延伸终止荧光偏振检测方法。结果 RT-PCR扩增产物的大小分别为349、397和713 bp。OLE sense引物检测Bv亚系双脱氧三磷酸胸苷(ddTTP)的FP值高于双脱氧三磷酸胞苷(ddCTP)的FP值(P<0.01),而By亚系则正好相反,ddCTP的FP值高于ddTTP(P<0.01);OLE anti-sense引物检测Bv亚系和By亚系ddGTP和ddATP的FP值均差别不大(均P>0.05)。Bv样品毒株ddTTP的FP值均值为(159±10)mp,与Bv参照株(162 mp)相近;By样品毒株ddCTP的FP值均值为(163±10)mp,与By参照株(165 mp)相近。结论该方法操作简便、敏感性及特异性高、判读结果直观明确、检测费用低,适合于流感监测实验室对流感病毒的快速分子诊断。; 王敬忠房师松刘涛王昕程小雯张仁利程锦泉; 关键词：流感病毒脱氧核糖核苷酸

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深圳市科技计划项目(201202090)