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Matrigel对羊水间充质干细胞成组织能力的影响: 2008年; 目的研究Matrigel对羊水间充质干细胞在裸鼠皮下成组织能力的影响。方法将羊水间充质干细胞与Matrigel混合,注入裸鼠皮下,14d后观察新生物的形态外观和组织结构。并以不混合Matrigel的羊水间充质干细胞注入裸鼠皮下作为阴性对照,单纯Matrigel注入裸鼠皮下作为空白对照。结果实验组和阴性对照组在裸鼠皮下均形成一长圆形瘤样组织,其形态外观基本一致,但组织结构有明显差异,在实验组组织血供丰富,主要为腺样结构,部分含管腔,向平滑肌细胞,上皮细胞和幼稚神经细胞分化。在阴性对照组血供较少,细胞呈单一平铺排列,未观察到明显组织结构,细胞未分化。空白对照组无新生组织形成。结论Matrigel能促使羊水间充质干细胞在裸鼠皮下向成熟的组织细胞分化并形成简单的腺样组织结构。; 杜玉峰耿红全潘骏朱哲齐隽康健谢华陈方; 关键词：MATRIGEL 细胞外基质

羊水来源胎儿间充质干细胞定向诱导为脂肪细胞的研究被引量：5: 2007年; 目的:研究体外诱导孕中期羊水来源胎儿间质干细胞(M SCs)分化为脂肪细胞。方法:机械手段挑取孕中期羊水细胞培养体系中的胎儿M SCs集落,培养扩增后,通过流式细胞仪检测表面抗原表达进行鉴定。取第3代胎儿M SCs,IBM X、胰岛素、氢化考的松等诱导其向脂肪细胞分化。倒置相差显微镜观察诱导后细胞形态的变化。诱导20 d后,油红O染色检测胞内中性脂肪并计算阳性细胞率,W estern Blot蛋白印记法检测PPA Rγ的表达。结果:机械手段分离出的胎儿M SCs为CD 44阳性,CD 34、CD 45、H LA-D R阴性,符合M SCs特点。诱导72 h后,细胞内有脂滴出现,随着时间延长,脂滴逐渐增加并融合为脂泡,细胞由梭形转变为圆形或多角性。20 d后85%以上胎儿M SCs变为油红O染色阳性,W estern Blot显示诱导20 d后,诱导组细胞PPA Rγ的表达量明显高于未诱导组。结论:经上述方法诱导20 d后,羊水来源胎儿M SCs可以分化为脂肪细胞。; 潘骏李现铎朱哲耿红全谢华陈方; 关键词：羊水细胞间充质干细胞脂肪细胞

羊水细胞作为组织工程种子细胞可能性的探讨被引量：18: 2005年; 目的探讨羊水细胞作为一种新的组织工程种子细胞的可能性.方法通过羊膜腔穿刺取得人孕16～23周的羊水,分离细胞,在添加10%胎牛血清(FBS)的F10培养液中,体外培养传代,观察其生物学特性.免疫细胞化学方法检测细胞的标准中间丝蛋白,分析细胞性质.收集第4代细胞,种植到PGA生物支架上,通过倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附、生长情况.结果羊水细胞在体外培养体系中增殖迅速.免疫细胞化学显示波纹蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、广谱角蛋白阳性;肌间线蛋白阴性,与间质细胞类似.羊水细胞能紧密的黏附在PGA生物支架上,呈汇合性生长,未发现细胞死亡的迹象.结论羊水细胞增殖能力强,表现间质细胞的特性,和生物支架有良好的相容性,具有作为组织工程种子细胞所需的条件.; 李现铎耿红全潘骏谢华陈方; 关键词：羊水细胞种子细胞间质细胞体外培养传代

孕中期羊水来源胎儿间充质干细胞的分离与培养及其生物学特性研究被引量：16: 2006年; 李现铎耿红全朱哲潘骏谢华陈方; 关键词：胎儿组织生物学特性研究孕中期组织工程学研究羊水 CELL

孕中期羊水来源胎儿间充质干细胞体外诱导为平滑肌细胞的研究被引量：7: 2006年; 目的探讨孕中期羊水来源的胎儿间充质干细胞(MSC)体外诱导为平滑肌细胞的可能性。方法通过超声引导下羊膜腔穿刺获取人孕18～22周羊水,分离细胞,体外培养传代,机械方法挑取MSC克隆,体外扩增,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达,以0．01 ng/ml、0．1 ng/ml、1 ng/ml和10ng/ml浓度的转录生长因子β(TGF-β)分别诱导第3代MSC 28 d,免疫组化染色检测各浓度TCF-β诱导后a-Actin在细胞内表达情况,透射电镜观察1 ng/mlTGF-β诱导28 d后细胞内肌丝含量,激光共聚焦显微镜测定该浓度组细胞在乙酰胆碱刺激下细胞内液钙离子浓度的变化。结果羊水来源的胎儿MSC在体外培养体系中增殖迅速,流式细胞仪检测结果显示CD44表达阳性,CD34、CD45和HLA-DR阴性。经1 ng/ml TGF-β诱导28 d后,细胞形态呈长梭形平滑肌样,融合后细胞分布形成特征性的“峰”和“谷”状,同时表达平滑肌细胞特异性蛋白标志a-Actin,细胞内出现黑色棒状肌丝,激光共聚焦显微镜显示该浓度TGF-β诱导后细胞内液钙离子基础值明显高于未诱导的细胞。在乙酰胆碱刺激下,细胞内液钙离子呈波峰样释放。结论羊水来源的胎儿MSC在体外可以定向分化为平滑肌细胞。; 朱哲潘骏李现铎耿红全陈方; 关键词：羊水干细胞平滑肌细胞

羊水作为间充质干细胞来源的可行性研究被引量：8: 2006年; 目的探讨孕中期羊水作为胎儿间充质干细胞（MSCs）来源的可行性。方法采用机械手段挑取孕中期羊水培养体系中类成纤维细胞的MSCs集落，体外培养扩增，观察细胞生长特性，流式细胞仪检测MSCs表面抗原表达及细胞周期，RT-PCR检测Oct-4、SCF、M-CSF、FL细胞因子的表达。结果用机械手段挑取出的细胞接种1～2d后贴壁，形态呈梭形，7～8d融合呈成纤维细胞状。体外扩增原代可获得（4～6）×10^6个细胞，10代可获得（1～5）×10^12个细胞，10代后细胞增殖能力下降。流式细胞仪检测结果显示：CD44表达阳性，CD34、CD45、HLA—DR不表达。RT-PCR检测结果显示：胎儿MSCs表达Oct-4、SCF、M-CSF、FL细胞因子。结论采用机械手段可从孕中期羊水培养体系中挑取出胎儿MSCs，与其他来源的MSCs特点相符。孕中期羊水可以作为一种新的胎儿间充质干细胞（MSCs）来源。; 李现铎耿红全朱哲潘骏谢华陈方; 关键词：羊水胎儿干细胞

孕中期羊水中细胞研究进展被引量：2: 2006年; 孕中期羊水中细胞培养和核型鉴定广泛应用于产前诊断领域,可以发现一系列胎儿发育异常。近来,许多研究表明羊水中含有胎儿的干细胞,这些细胞能否应用于干细胞和组织工程学领域成为研究热点。综述了羊水中细胞的组成、来源、生物学特性、干细胞特性及组织工程学应用等方面的内容,并对研究前景进行展望。; 李现铎陈方; 关键词：羊水细胞多能干细胞

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国家自然科学基金(30271351)