国家自然科学基金(30170843) 作品数:6 被引量:31 H指数:4 相关作者: 刘杞 孙航 石小枫 张艳 王志毅 更多>> 相关机构: 重庆医科大学附属第二医院 四川省人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 重庆市科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
肝细胞移植联合肝再生增强因子治疗大鼠急性肝功能衰竭的研究 被引量:9 2007年 目的探讨同种异体肝细胞腹腔移植联合肝再生增强因子(augmenter of liver regenration,ALR)对D-氨基半乳糖(D-gal)诱导的急性肝功能衰竭大鼠的治疗作用。方法采用D-gal诱导大鼠急性肝功能衰竭,诱导后24h,59只大鼠随机数字表法分成4组。Ⅰ组15只:腹腔注射生理盐水;Ⅱ组15只:经腹腔移植2×107肝细胞,以后腹腔注射生理盐水;Ⅲ组15只:经腹腔移植2×107肝细胞,同时腹腔注射ALR50μg.kg-1.d-1;Ⅳ组14只:腹腔注射ALR50μg.kg-1.d-1。观察大鼠的存活率、肝脏功能、移植肝细胞存活情况、病理变化。结果Ⅱ组、Ⅲ组大鼠存活率(46.7%、66.7%)显著高于Ⅰ组(0.0%)(P=0.006;P=0.0002),Ⅲ组(66.7%)与Ⅳ组(14.3%)有显著差异(P=0.008),其他组间无明显差异(P>0.05)。移植后第1、2天Ⅱ组腹水AST高于Ⅲ组(P=0.001),Ⅱ组第1、2天腹水ALT高于Ⅳ组,Ⅱ组、Ⅲ组第1、2天腹水TBil高于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅲ组肝脏病理改变轻于其他组。Ⅲ组大鼠腹腔移植的肝细胞存活数多于Ⅱ组。结论同种异体肝细胞经腹腔移植联合ALR可明显改善D-gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率,促进移植肝细胞存活和增殖,促进肝组织及功能恢复。 王志毅 张艳 石小枫 刘杞关键词:肝细胞移植 肝再生增强因子 急性肝功能衰竭 新生大鼠肝细胞脾内移植联合鼠肝再生增强因子治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制 被引量:2 2007年 目的探讨新生大鼠肝细胞脾内移植联合重组鼠肝再生增强因子(rALR)治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制。方法采用D-氨基半乳糖(1.2 g/kg)诱导并建立大鼠急性肝衰竭模型,36 h后随机分为6组:Ⅰ组:模型对照组;Ⅱ组:经脾脏注射等渗盐水1 ml,腹腔注射等渗盐水1 ml/d;Ⅲ组:经脾脏注射rALR 1 ml(50μg/kg),腹腔注射rALR 1 ml(50μg·kg^-1·d^-1);Ⅳ:经脾脏移植2×10^7同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射等渗盐水1 ml/d;Ⅴ组:经脾脏移植2×10^7同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射rALR 1 ml(50μg·kg^-1·d^-1);Ⅵ组:经脾脏移植2×10^7同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射环孢菌素1 ml(10 mg·kg^-1·d^-1)。观察大鼠每天存活率;术后第1、5天及2周处死大鼠以获取肝、脾组织,观察脾内移植肝细胞的组织学改变;在术前、术后第1、2、5、12天采集静脉血,采用放射免疫法测定血清IL-1β和TNFα的浓度。结果Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组大鼠存活时间差异无统计学意义,Ⅳ组有部分大鼠长期存活,2周存活率为33%,Ⅴ组大鼠2周存活率显著高于Ⅳ组,而与Ⅵ组大鼠2周存活率比较差异无统计学意义。Ⅳ、Ⅵ组脾内移植的肝细胞可存活5~7 d,Ⅴ组脾内移植肝细胞可存活至2周以上。术后第1天,Ⅳ组血清IL-1β水平显著高于Ⅴ组和Ⅵ组(P〈0.05);术后第5天,Ⅳ组血清IL-1β水平仅与Ⅵ组差异有统计学意义(P〈0.05)。术后第1天,TNFα的浓度在Ⅱ组显著高于Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组(P〈0.05)。结论新生大鼠肝细胞脾内移植与rALR联合治疗大鼠急性肝衰竭有一定疗效,可提高D-氨基半乳糖诱导肝衰竭大鼠的存活率;移植肝细胞在脾脏可存活2周以上,其机制可能与促进肝细胞再生、预防移植肝细胞凋亡及轻微抑制细胞免疫有关。 陈曜 袁刚 孙航 刘杞关键词:肝细胞 肝再生增强因子 肝再生增强因子在肝癌细胞中的表达及意义 被引量:14 2005年 目的 研究肝再生增强因子(ALR)对肝癌细胞和原代大鼠肝细胞增殖作用的影响及在肝细胞癌(HCC)中的表达。 方法 将不同种属的ALR分别与原代大鼠肝细胞和人肝癌细胞株QGY和HepG2共同培养后,用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定这些细胞的增殖情况。并应用免疫组织化学法对9例正常肝组织和21例HCC组织中ALR的表达进行了研究。 结果 不同种属的ALR在体外均能刺激人肝癌细胞株QGY和H epG2增殖,并呈剂量依赖关系,但对原代大鼠肝细胞均无刺激增殖作用。在正常肝组织中ALR不表达,但在HCC肝组织中ALR均表达,且ALR的表达程度与HCC分化程度和大小均无关。 结论 ALR可能在HCC的发生发展中起着重要作用。 孙航 余慧峰 吴传新 管小琴 刘杞关键词:大鼠肝细胞 人肝癌细胞株 肝再生增强因子 QGY 种属 增殖作用 肝细胞移植的新进展及存在的问题 被引量:4 2003年 袁刚关键词:肝细胞移植 肝移植 同种肝细胞移植细胞排斥反应机理及肝再生增强因子的作用 被引量:8 2007年 目的探讨同种异体肝细胞腹腔内移植治疗急性肝衰竭大鼠的细胞排斥反应机制及肝再生增强因子(ALR)的免疫作用。方法采用D-氨基半乳糖诱导大鼠急性肝衰竭(ALF),诱导后24h,随机分成5组。Ⅰ组:注射生理盐水;Ⅱ组:单纯移植肝细胞;Ⅲ组:肝细胞移植联合CsA;Ⅳ组:肝细胞移植联合ALR;Ⅴ组:注射ALR;肝细胞和药物均腹腔内注射。观察大鼠的存活率、组织学改变、移植肝细胞存活情况,检测大网膜CD4、CD8、CD68。结果Ⅳ组存活率显著高于Ⅰ组(66.7%vs0%,P=0.001),余组间无差异。Ⅳ组移植肝细胞存活时间更长。d1-2大网膜CD68阳性率Ⅱ组高于Ⅰ、Ⅳ组;CD4、CD8阳性率Ⅰ、Ⅱ组均高于Ⅳ、Ⅴ组,且Ⅱ组CD4阳性率高于Ⅲ组。d14大网膜CD4、CD8、CD68阳性率各组间无差异,但Ⅳ组CD4、CD8、CD68阳性率d1-2均低于d14的,Ⅱ组CD68阳性率d1-2高于d14的。结论同种肝细胞腹腔内移植联合ALR能提高ALF大鼠的存活率,同种肝细胞移植能引起CD4、CD8、CD68介导的细胞免疫,ALR能有效的抑制同种异体细胞免疫,促进移植肝细胞存活和增殖。 张艳 王志毅 石小枫 孙航 李红 刘杞关键词:肝再生增强因子 肝细胞移植 细胞免疫 抗人肝再生增强因子单克隆抗体对人肝癌细胞株HepG2增殖活性的影响 被引量:2 2005年 目的:检测人肝癌细胞株HepG2细胞有无人肝再生增强因子(hALR)的表达,利用hALR特异性的单克隆抗体(anti-hALR McAb)结合hALR,观察其阻断hALR的作用后,对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖活性的影响。方法:用免疫细胞化学以及RT-PCR的方法检测HepG2细胞hALR蛋白及mRNA的表达;用3H-TdR掺入法检测hALR特异性单克隆抗体中和hALR后HepG2细胞的增殖情况。结果:①HepG2细胞有hALR的表达。②抗hALR单克隆抗体特异性地阻断hALR的作用后可部分抑制肿瘤细胞自主性生长。结论:抗hALR单克隆抗体能部分抑制肿瘤细胞自主性生长;hALR通过自分泌方式参与了肝癌细胞的自主性生长。 唐琳 孙航 张林 郭晖 陈雪华 邓建川 刘杞关键词:人肝再生增强因子 单克隆抗体 肝癌 细胞株