国家自然科学基金(30170785)
- 作品数：11 被引量：104H指数：7
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 富含多糖草莓果实总RNA提取方法的改进被引量：13
- 2004年
- 以草莓果实为模式实验材料,将Chomczynski提出的常规RNA提取方法与Kenneth等提出的改进方法相结合,并做了进一步改进,建立了一种简单实用的从富含多糖的植物材料中提取总RNA的方法。先利用冷的丙酮去除色素类物质,再利用乙二醇丁醚去除多糖,从而有效克服了从富含色素和多糖类物质的植物材料中提取RNA的困难;获取的RNA样品在纯度和浓度上都可以满足PCR及Northern杂交等分子生物学实验的要求。
- 周波张旸李玉花
- 关键词：多糖草莓果实总RNA
- 基因芯片技术在植物研究中的应用被引量：7
- 2004年
- 简述了基因芯片的原理、特点、分类及制作方法 。
- 许志茹李玉花
- 关键词：基因芯片植物研究
- ‘津田芜菁’花色素苷生物合成相关基因的表达被引量：12
- 2006年
- 利用黑暗、日光、人工恒定光处理花色素苷合成依光型的‘津田芜菁’试材。通过紫外-可见分光光度计测定恒定光处理下‘津田芜菁’块根皮中花色素苷的含量,结果表明,花色素苷含量与光处理时间成正相关。用从消减文库中筛选的花色素苷生物合成基因片段制备探针,Northern杂交结果显示,在所处理的48h之内,光可以诱导‘津田芜菁’中PAL、DFR、CHS、F3H和ANS基因的表达,这些基因的表达量随着光处理时间的延长而增加,而MYB基因的表达量在黑暗与光下基本相同。
- 许志茹李玉花
- 关键词：花色素苷基因表达
- 牡丹不同类型总酚含量与PPO活性研究被引量：27
- 2005年
- 以19个不同花型或花色的牡丹品种为试材,通过测定牡丹外植体总酚含量和多酚氧化酶(PPO)的活性,探讨了影响牡丹组培褐化的内在诱因,以期为牡丹的组织培养提供参考.
- 安佰义赵飞
- 关键词：总酚PPO活性
- 利用cDNA微阵列分离津田芜菁花青素生物合成相关基因被引量：19
- 2006年
- 花色素苷是植物的重要次生代谢产物,在植物体内行使多种生理功能。利用UV-A处理48h后津田芜菁块根变红,以黑暗处理条件下的白色块根为对照,与削减文库特异基因片段制备的cDNA微阵列进行杂交。UV-A处理条件下津田芜菁中表达上调的基因为81个,表达下调的基因为47个,表达上调的基因中包括与花青素生物合成直接相关的基因片段cytochromeP450,PAL,F3H,ANS,CHS,DFR和GST等。Northern杂交结果显示,UV-A处理48h的津田芜菁试材中,PAL、CHS、F3H、DFR和ANS基因的表达量明显高于黑暗条件下白色块根中这些基因的表达量,进一步验证了芯片杂交结果的可靠性。
- 许志茹李玉花
- 关键词：花色素苷津田芜菁块根UV-ACDNA微阵列
- 植物的隐花色素及其光信号转导被引量：10
- 2005年
- 介绍了近年来植物隐花色素介导的光信号转导分子机制的研究进展。
- 闫海周波李玉花
- 关键词：蓝光受体隐花色素光信号转导
- 津田芜菁直根皮cDNA文库的构建及ESTs测序质量的分析
- 2005年
- 利用Trizol法从津田芜菁中提取总RNA,分离纯化富含Poly(A)+的mRNA,反转录合成双链cDNA,并以λ-ZAP为载体,构建了津田芜菁cDNA文库.以XL1-Blue为受体菌,测定原始文库的滴度为4.3×106pfu/mL,重组率为96%,扩增后文库总滴度为6×1010pfu/mL.对随机提取的质粒进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5～2.0kb之间.文库质量鉴定结果表明,构建的津田芜菁直根皮cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段.对3020个克隆的序列测定表明,获得可用序列2718个,测序成功率为90%,首批共获得652个芜菁直根皮ESTs.
- 许志茹李玉花杨传平
- 关键词：芜菁CDNA文库EST测序
- 基因芯片技术在拟南芥研究中的应用被引量：2
- 2004年
- 基因芯片是研究生物大分子功能的新技术,目前此技术已经广泛地应用到植物研究中。拟南芥是植物分子生物学领域的模式植物,通过对其基因结构及功能的详尽研究,可以更好地理解和认识遗传上更为复杂的高等植物的生长和发育过程。本文综述了基因芯片在模式植物拟南芥研究中的应用。
- 许志茹李玉花杨传平
- 关键词：拟南芥模式植物植物分子生物学植物研究基因芯片技术基因结构
- 一种大规模筛选单克隆及提取质粒的改进方法被引量：1
- 2004年
- 利用α-互补(X-gal+IPTG)从cDNA文库中筛选特异克隆,以此去除含有未插入片段和插入片段小的克隆。运用展库的方法,通过辅助噬菌体对文库中多个载体的切割,将载体以质粒的形式转化到大肠杆菌中;同时对质粒DNA碱裂解提取方法做了改进,建立了一种简单实用的大量提取质粒DNA的方法。该方法利用特定的蛋白质吸附膜吸附提取过程中的蛋白质,从而去除了使用酚-氯仿抽提蛋白质的复杂过程,减少了质粒DNA的损失,是一次性获得大规模质粒DNA的有效方法。获取的质粒DNA样品在纯度和浓度上都可以满足测序、PCR及Southern杂交等分子生物学实验的要求。
- 许志茹李玉花
- 关键词：CDNA文库质粒克隆特异基因蛋白质
- ‘津田’芜菁消减cDNA文库的构建及分析被引量：3
- 2006年
- 以‘津田’芜菁红色块根和白色块根为材料，利用SSH技术成功构建了消减cDNA文库并富集相关基因片段。从消减文库中筛选到960个阳性克隆，PCR鉴定插入片段长度主要分布于300～800bp之间。克隆测序后与GenBank中的同源序列进行比较，特异基因片段为302个，其中99个与数据库中的序列具有相似区域且功能已知，与数据库中序列没有显著同源性及功能未知的序列为203条。
- 许志茹李玉花
- 关键词：芜菁SSH差异表达基因
