国家自然科学基金(30571511)
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
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- 相关机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 毛白杨PtSEP2基因启动子克隆和瞬时表达特性分析被引量：1
- 2011年
- 利用PCR技术从毛白杨基因组DNA中扩增获得花器官发育相关的SEPALLATA2类似基因PtSEP2 5'侧翼约2.3kb的一段序列,经PlantCARE序列分析表明,该序列中含有启动子特征的保守序列及多种光应答元件,初步推测其为PtSEP2基因启动子。进一步以GUS为报告基因,构建了pPtSEP2 promoter∷GUS的植物表达载体,命名为PtSEP2p∷GUS。以烟草根、茎、叶、花芽为受体,通过农杆菌介导转化植物表达载体PtSEP2p∷GUS进行瞬时表达研究,结果表明该启动子能够驱动GUS报告基因在烟草花药中表达,而其表达活性弱于组成型表达的花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子。该启动子的获得对于杨树及其他开花调控基因工程研究具有重要的应用价值。
- 崔东清叶梅霞刘军梅李昊张志毅安新民
- 关键词：毛白杨GUS活性
- 一种消除转基因植物潜在风险的新技术被引量：8
- 2010年
- 多年来,科学家们一直为寻求解决转基因植物安全性问题的有效工具而不懈努力。美国康涅狄格大学华人科学家李义教授领导的研究小组,经过6年多的深入研究,在此领域实现了重大突破,2007年发表了"外源基因清除"技术(Gene-deletor)。该技术整合了Cre/LoxP和FLP/FRT双重组系统,用器官或组织特异启动子驱动FLP/Cre,在外源基因发挥功能之后,可将其从转基因植物的花粉、果实和种子中彻底清除,可有效防止转基因植物的外源基因向非转基因植物或杂草的逃逸,从而消除公众对转基因植物生态和食品安全的担忧。着重介绍了"外源基因清除"技术(Gene-deletor)的概念、作用机制及其潜在应用。
- 安新民荆艳萍刘军梅张志毅
- 关键词：转基因植物生态风险食品安全
- 毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。
- 刘军梅李昊崔东清叶梅霞张志毅安新民
- 关键词：毛白杨克隆
- 毛白杨PtLFY在花芽发育中的表达模式与花芽形态分化被引量：7
- 2010年
- 以毛白杨花芽为材料,采用RT-PCR技术分离克隆毛白杨PtLFYcDNA序列,测序结果表明该序列全长1314bp,包含1个开放阅读框,编码377个氨基酸。Alignment分析显示该基因与拟南芥等物种LFY/FLO同源基因所编码的氨基酸相似性达到68%～75%。蛋白结构预测分析表明,在PtLFY蛋白N-端和C-端具有2个高度保守的区域,其中PtLFY-C端由7个α-helix组成Helix-turn-helix结构。采用Real-time qRT-PCR技术检测PtLFY在雌雄花芽发育过程中的表达模式,结果显示从9月13日到翌年1月25日,PtLFY在毛白杨雌雄花芽中持续稳定表达,到2月25日表达量少许下调,但该基因在雄花芽中的相对表达量明显高于雌花芽。解剖分析结果表明,雄花芽形态分化进程明显早于雌花芽,这种差异可能与PtLFY在雌雄花芽发育过程的差异表达存在密切联系。研究结果对于阐明PtLFY在毛白杨雌雄花芽发育和开花中的分子作用机制具有重要的理论意义,为进一步开展毛白杨开花调控研究奠定基础。
- 安新民王冬梅王泽亮王静澄曹冠琳薄文浩张志毅
- 关键词：毛白杨花芽形态分化QRT-PCR
- 毛白杨PtSEP3-1基因启动子的克隆分析及其表达载体构建被引量：10
- 2010年
- SEP(SEPALLATA)类基因属于花器官发育ABCDE模型中的E类基因,拟南芥中的研究表明该类基因可能具有控制花器官形态发育以及激活其它类型基因的功能,是一类花发育过程中的关键基因。因此,研究杨树SEP类基因启动子表达特性对于杨树的开花调控研究具有重要意义。本文根据毛白杨SEP3基因和毛果杨基因组序列设计引物,通过PCR获得了PtSEP3-1基因上游2000bp的序列。序列分析结果表明该序列具有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box,还包含大量光响应元件ACE、Box I和Box4等,此外还有脱落酸响应元件ABRE,赤霉素响应元件GARE-motif以及胁迫响应元件HSE、TC-richrepeats等。进一步构建了一个以PtSEP3-1启动子驱动GUS基因的植物表达载体pPtSEP3-1protest,为该启动子的功能鉴定奠定了基础。
- 王静澄李昊崔东清刘军梅叶梅霞张志毅安新民
- 关键词：毛白杨启动子
