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动物传染病研究中PCR引物设计的技巧及相关软件介绍被引量：11: 2008年; 引物设计是PCR技术中最重要的一环。本文就引物设计前的准备工作、引物设计原则、引物设计软件和方法等相关问题,介绍在动物传染病研究中设计PCR引物的一些应用体会。; 磨美兰甘书钻; 关键词：聚合酶链式反应引物设计

IBV广西分离株GX-YL5在鸡体内动态分布和排毒规律及组织嗜性研究被引量：5: 2010年; 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL5通过滴鼻点眼人工感染14日龄健康非免疫雏鸡,对接毒后1、3、5、7、10、14、21、28、35和42 d试验鸡的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏等组织及泄殖腔棉拭子进行IBV的反转录巢式PCR检测,同时对接毒后不同时间的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、法氏囊、脾脏和肝脏进行组织病理学观察。结果表明接毒后的3～21 d,气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏的病毒检测均为阳性,接毒后42 d肾脏和气管检测结果仍为阳性;接毒后3～42 d泄殖腔棉拭子检测结果为阳性。组织病理学观察见到气管黏液,气管和细支气管纤毛脱落,炎症细胞浸润,肺充血,淋巴细胞浸润,肾脏间质性肾炎以及法氏囊水肿。研究结果表明,GX-YL5株对雏鸡具有广泛的组织嗜性,主要脏器带毒时间21 d或更长,泄殖腔排毒持续至少39 d。; 磨美兰陈秋英韦英益朗亚辉黄柏成韦子才李孟韦平韦天超; 关键词：传染性支气管炎病毒排毒规律组织嗜性

IBV地方分离株GX-YL5在鸡体内动态分布和排毒规律及组织嗜性研究: 鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)是由冠状病毒科冠状病毒属的鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)引起的鸡急性高度接触传染性呼吸道疾病。I...; 磨美兰陈秋英朗亚辉黄柏成侯金莲韦平韦天超; 关键词：传染性支气管炎病毒排毒规律组织嗜性; 文献传递

鸡传染性支气管炎病毒广西流行株3种主要结构蛋白基因的遗传变异分析被引量：11: 2010年; 为了解鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西流行株的遗传变异情况,应用RT-PCR方法对2004-2007年的7株广西IBV分离株的纤突蛋白S1基因、核(N)蛋白和膜(M)蛋白基因进行扩增、克隆、测序和同源性比较及系统进化分析。结果显示广西IBV分离株S1基因存在广泛的基因点突变,部分毒株出现基因插入和缺失,分离株之间氨基酸同源性为74.2%～98.7%;N基因无插入和缺失,但存在基因点突变,分离株之间氨基酸同源性为91.7%～99.3%;M基因存在点突变和插入现象,分离株之间氨基酸同源性为90.7%～98.2%。以疫苗株H120为参照,广西IBV分离株的S1、N和M基因都出现了变异,其中S1基因变异程度最大。7株广西IBV在S1、N和M基因氨基酸序列系统进化树中分别集中在2、3和3个基因群中,其中4株的S1、N和M基因分型结果不一致。结果表明广西IBV分离株的S1、N和M基因已发生变异,广西IBV存在广泛的基因突变、缺失或插入现象。研究的结果提示流行株的遗传变异可能是目前影响疫苗免疫效果的主要原因。; 磨美兰李孟韦平范文胜黄柏成郎亚辉陈秋英侯金莲韦天超; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 N基因 M基因系统进化分析

引起免疫失败的IBV分离株的生物学特性及结构基因分析被引量：5: 2009年; 本研究应用鸡胚尿囊腔接种的方法,从广西患传染性支气管炎的免疫失败的病鸡中分离到一株传染性支气管炎病毒(IBV)(命名GX-YL5),通过间接血凝试验、动物回归试验和气管环交叉中和试验对该毒株进行鉴定和主要生物学特性的研究,同时利用RT-PCR技术扩增克隆该病毒的S1基因和N基因并测定其核苷酸序列。结果表明:该病毒株有间接血凝性;致病性较强;血清型不同于常用疫苗株H120、Ma5、4/91。同源性分析表明,S1基因核苷酸和氨基酸序列与参考株的同源性分别为63.5%～81.2%和50.7%～78.8%;N基因核苷酸和氨基酸序列与参考株的同源性分别为85.7%～87.2%和89.5%～91.7%;S1基因和N基因系统进化分析表明分离株与其它参考毒株的亲缘关系较远。S1基因和N基因分型与血清学试验结果相吻合。本研究结果提示了广西分离株GX-YL5可能是一个新的变异株,这可能是目前免疫失败的重要因素,同时也为研制适合本地使用的IBV疫苗提供了科学依据和物质基础。; 磨美兰李孟陈秋英王秀英范文胜韦正吉韦平韦天超; 关键词：生物学特性结构基因

鸡传染性支气管炎病毒抗原性的研究进展被引量：6: 2010年; 李孟孙蓉梁远东韦平; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒抗原性 VIRUS 呼吸道症状上呼吸道

广西不同时期IBV分离株S1和N基因的序列和系统进化分析: 为了解广西传染性支气管炎病毒（IBV）的纤突蛋白S1基因高变区Ⅰ（HVRⅠ）和核（N）蛋白基因变异情况及S1和N基因变异间的相关性,本研究应用RT-PCR方法扩增了广西1985—2008年的21株IBV的S1基因HVRⅠ...; 磨美兰李孟韦正吉陈秋英范文胜郎亚辉黄柏成韦平韦天超; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒 N基因系统进化分析基因突变基因重组; 文献传递

广西鸡传染性支气管炎病毒地方分离株核蛋白基因的遗传变异分析被引量：4: 2009年; 应用RT-PCR方法扩增了广西1985～2008年的24株传染性支气管炎病毒(IBV)分离株的核(N)蛋白基因,并对此24株IBV的N蛋白基因进行了克隆、序列测定及分析。结果发现24株IBV分离株N蛋白均含有一个长1230bp的开放阅读框,编码由409个氨基酸残基组成的多肽,未发现碱基的缺失和插入,但存在较多点突变现象。与疫苗株H120核蛋白的3个保守碱性氨基酸区序列进行比较分析发现,大多数毒株在183～232位存在较多的氨基酸替代现象,部分毒株在334～363位也存在较多的氨基酸替代现象。与GenBank中的13个IBV参考毒株N蛋白基因序列进行比较分析,发现2004～2008年的21个分离株中有19个分布于第Ⅰ群中;1985～1988年的3个分离株之间N蛋白核苷酸及其推导氨基酸的同源性均达99%以上,均属于第Ⅲ群中,可见广西不同时期的IBV分离株在N基因进化关系上形成了自己独立的进化群。同时研究还发现GX-NN5分离株可能为基因重组病毒。以上结果表明了广西IBV毒株存在基因突变和基因重组现象。; 磨美兰李孟范文胜陈秋英黄柏成郎亚辉林俊韦平韦天超; 关键词：传染性支气管炎病毒核蛋白基因基因重组

变异型鸡传染性支气管炎病毒对肉鸽的致病性试验: 2010年; 本研究选用与鸽源冠状病毒S1基因高变区氨基酸序列同源性很高的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL2和对鸡致死率较高的广西分离株GX-YL5对非免疫幼鸽进行人工感染试验,并同时设参考毒株M41组和空白对照组。结果显示,感染后4 d M41、GX-YL5组试验鸽出现呼吸道症状。感染后7 d GX-YL2组试验鸽子出现呼吸道症状。与空白组相比,感染后8 d GX-YL2组鸽子气管内有大量黏液,胰脏充血肿大,肺脏和肾脏充血;GX-YL5组鸽子气管有大量黏液,肺充血,胰脏充血肿大;M41组鸽子气管粘膜肿胀并有黏液,肾脏充血。感染后8 d组织病理学观察见到鸽子气管纤毛上皮细胞肿胀但纤毛完整不脱落,轻微胰腺炎,肺脏充血和出血。感染后28 d未观察到明显的临床、解剖和组织病理学变化。对感染后1、3、7、10、14、21和28 d的泄殖腔棉拭子进行反转录套式PCR扩增,结果表明除了GX-YL2组的一个样品在感染后10d检测结果为阳性外,其余泄殖腔棉拭子检测结果全为阴性。对感染后8和28 d鸽子气管、肺、肾脏、胰脏病毒分离物进行反转录套式PCR扩增,结果表明感染后8 d,M41组的气管、肺、肾脏、胰脏全部阳性,GX-YL2和GX-YL5组的气管、肺、肾脏、胰脏部分阳性;感染后28 d,3个组鸽的气管、肺、肾脏、胰脏病毒检出率均降低,尤其GX-YL2和GX-YL5组更低。整个试验过程未见到致鸽子死亡。研究表明了对鸡具有较强致病能力的鸡源IBV可以感染肉鸽,能在肉鸽体内进行增殖,但对鸽子致病力不强。; 陈秋英磨美兰莫艺基梁海仙叶新慧黄文丽阙久翔韦平韦天超; 关键词：变异型鸡传染性支气管炎病毒冠状病毒致病性试验

鸡肾型IBV分离鉴定及S1基因序列分析: 2008年从河南省某肉用鸡场疑似感染肾型IB的病鸡中分离到一株IBV,对该分离毒株进行鸡胚矮小化试验、动物回归试验和血清学鉴定,试验表明分离株HeNan10/08为肾型IBV。采用RT-PCR技术扩增分离株的S1基因,并...; 胡来根毛火云吴亮潘玲许秀梅尹秀凤张小飞; 关键词：肾型传染性支气管炎病毒 S1基因序列分析; 文献传递

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国家自然科学基金(30700599)

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