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贵州省科学技术基金([2005]2053)

作品数:2 被引量:13H指数:2
相关作者:田晓滨孙立杨述华张宇坤唐欣更多>>
相关机构:华中科技大学贵州省人民医院更多>>
发文基金:贵州省科学技术基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 2篇形态发生蛋白
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇真核表达质粒
  • 2篇质粒
  • 2篇双基
  • 2篇体外
  • 2篇体外表达
  • 2篇骨形态
  • 2篇骨形态发生蛋...
  • 2篇骨形态发生蛋...
  • 2篇核表达
  • 2篇表达质粒
  • 2篇成骨
  • 2篇成骨能力
  • 1篇血管
  • 1篇血管内皮
  • 1篇血管内皮生长...
  • 1篇血管内皮生长...
  • 1篇异位成骨

机构

  • 4篇贵州省人民医...
  • 4篇华中科技大学

作者

  • 3篇孙立
  • 3篇田晓滨
  • 2篇张宇坤
  • 2篇杨述华
  • 1篇傅德皓
  • 1篇郜勇
  • 1篇冯建军
  • 1篇唐欣

传媒

  • 1篇中华骨科杂志
  • 1篇中国临床康复

年份

  • 1篇2007
  • 3篇2006
2 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
基因活化纳米骨浆异位诱导成骨能力的实验观察被引量:8
2007年
目的观察纳米骨浆经成骨基因-人骨形态发生蛋白2(human bone morphogenetic protein 2,hBMP2)活化后是否具有异位诱导成骨能力。方法昆明种小鼠24只,4周龄,体重(20±2)g,随机分为两组。两组小鼠右侧大腿后群肌袋均注射纳米骨浆+hBMP2质粒,作为实验侧;1组:左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆+空白质粒,作为对照侧1;2组:左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆,作为对照侧2。术后2、4周,采用放射学、分子生物学和组织形态学等方法检测成骨基因hBMP2表达和诱导成骨效应。结果术后所有动物均存活,饮食活动正常。RT-PCR和Western blot检测发现术后2、4周实验侧注射材料组织有hBMP2表达。术后2周,实验侧植入材料出现大量软骨组织和呈岛状散在分布的骨组织,对照侧未见骨组织形成。术后4周,实验侧可见大量骨化组织,新生骨相互融合生长并形成较为成熟的板层骨和骨小梁结构;对照侧植入材料外周有较多纤维结缔组织,未见骨或软骨形成。术后2、4周,实验侧碱性磷酸酶活性均明显高于对照侧(P〈0.01),差异有统计学意义。结论纳米骨浆在hBMP2基因质粒活化后具有显著的骨诱导活性。
田晓滨孙立杨述华唐欣冯建军张宇坤傅德皓
关键词:骨形态发生蛋白质类羟基磷灰石类
人BMP2、VEGF165双基因真核表达质粒的构建及体外表达
目的:构建人BMP2与VEGF165双基因真核表达质粒。方法:对pcDNA3.1-BMP2及pUC- CAGGS-VEGF165的目的基因片段亚克隆并引入新的酶切位点,将其分别定向连入真核双表达载体pIRES, 构建同时...
孙立田晓滨张宇坤郜勇杨述华
关键词:共表达
文献传递
基因活化纳米骨浆异位诱导成骨能力的实验观察
目的:观察纳米骨浆经成骨基因hBMP2活化后是否具有异位诱导成骨能力。方法:昆明种小鼠24只分为两组。两组小鼠右侧大腿后群肌袋均注射纳米骨浆+hBMP2质粒作为实验侧;1组:左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆+空白质粒,作为对...
田晓滨孙立胡如印杨述华唐欣冯建军张宇坤傅德皓
关键词:异位成骨
文献传递
人骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子165双基因真核表达质粒的构建及体外表达被引量:8
2006年
目的:构建人骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子165双基因真核表达质粒。方法:实验于2005-03/2005-10在华中科技大学同济医学院公共实验平台完成。①通过聚合酶链反应对pcDNA3.1-BMP2及pUC-CAGGS-VEGF165的目的基因片段亚克隆并引入新的酶切位点,将其分别定向连入真核双表达载体pIRES,构建同时表达两个目的基因的双顺反子,通过聚合酶链反应、酶切分析及DNA序列测定鉴定重组质粒。②重组质粒经脂质体介导体外转染小鼠骨髓基质细胞,通过反转录-聚合酶链反应检测骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165mRNA的表达。结果:①pIRES-BMP2-VEGF165双基因表达质粒的构建和鉴定:将重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165分别作XhoI/MluI和XbaI/NotI双酶切,经10g/L琼脂糖凝胶电泳可见1.2kbp的人骨形成蛋白2条带和592bp的血管内皮生长因子165条带,酶切条带与聚合酶链反应产物电泳带处于相同位置。经聚合酶链反应、酶切分析及DNA序列测定证实,目的基因插入片段方向正确,DNA序列无突变。②骨形成蛋白2、血管内皮生长因子165mRNA的表达:以转染pIRES空质粒为阴性对照,48h后提取转染细胞的RNA分别用P1,P2和P3,P4作为引物进行反转录-聚合酶链反应。结果表明转染pIRES-BMP2-VEGF165的小鼠骨髓基质细胞扩增出1.2kbp及592bp两条带。证实该重组质粒能在体外同时表达骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165mRNA。结论:成功构建了可同时表达骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165的双基因真核表达质粒,为进行联合基因治疗骨缺损的实验研究奠定了基础。
孙立田晓滨张宇坤郜勇杨述华
关键词:骨形态发生蛋白质类
共1页<1>
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