国家自然科学基金(30472037)
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
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- 相关机构：中山大学广州中医药大学中国科学院更多>>
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- 二萜类化合物excisanin A诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及机制研究被引量：15
- 2006年
- 目的本文研究大萼香茶菜有效单体exc isan in A诱导人结肠癌SW 620细胞株凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖抑制作用,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,W estern b lot法检测exc isan in A对PARP、caspase-3、caspase-9剪切片断的影响,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38、p38、c-Jun表达的影响。结果Excisanin A对结肠癌SW620细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,其IC50值为8.22μmol.L-1。用8.71μmol.L-1excisanin A处理SW620细胞12、24、36 h,AnnexinV/PI双染检测细胞的早期凋亡,其凋亡率分别为17.2%、20.5%、13.8%,而对照组细胞的凋亡率仅为1.9%(P<0.05)。不同浓度的excisanin A作用于SW620细胞48h后,Western blot法检测发现PARP、caspase-3,caspase-9 3种蛋白均出现断裂片断,并随着浓度的增加断裂更明显。进一步研究发现,excisanin A处理SW620细胞后,JNK、p38的磷酸化水平明显升高,c-Jun的表达亦增高。结论Excisa-nin A具有明显的细胞毒作用,能诱导SW620细胞凋亡,JNK和p38途径的激活可能是其诱导凋亡的分子机制之一。
- 邓蓉朱孝峰周军民高幼衡冯公侃梅玉屏王一谢冰芬刘宗潮
- 关键词：SW620细胞细胞凋亡信号转导
- 西米特酸诱导人急性白血病HL-60细胞凋亡作用及其机制初探被引量：2
- 2007年
- 背景与目的:西米特酸是从我国南海分布广泛的黄色海绵Rhabdastrella sp.中发现的一种异臭椿三萜类化合物。前期研究表明,西米特酸可抑制多种肿瘤细胞的增殖且较安全。本研究探讨西米特酸对人急性白血病细胞HL-60凋亡的影响,及其可能的促凋亡机制。方法:MTT法检测不同浓度西米特酸作用后HL-60细胞的增殖情况,琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带,荧光显微镜观察细胞形态学变化。Westernblot法检测西米特酸作用后,细胞中Caspase-3、Poly(ADP-ribose)polymerase(PARP)、Bcl-2、Bax、P73蛋白变化;基因芯片检测凋亡相关基因的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对一些凋亡相关基因进行验证。结果:不同浓度西米特酸作用72h可抑制HL-60细胞的增殖,IC50为(0.64±0.21)μg/ml。1μg/ml西米特酸处理36h后,HL-60细胞出现核染色质浓集和DNA梯形条带,并且Caspase-3和PARP出现明显的断裂片段。凋亡相关基因芯片检测发现,P73、JunD、TNFAIP3、GADD45A、PPP1R15A等基因表达增强,MAP2K5、IGF2R等基因表达降低。RT-PCR法检测发现P73、JunD表达上调,MAP2K5、IGF2R表达下调。Westernblot法进一步检测发现P73蛋白表达增高,而Bcl-2和Bax蛋白无明显改变。结论:西米特酸可诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能与P73、JunD等基因表达上调和MAP2K5、IGF2R等基因表达下调有关。
- 郭经锋周军民冯公侃刘宗潮肖定军邓松之邓蓉朱孝峰
- 关键词：HL-60细胞细胞凋亡CASPASE-3P73
