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国家高技术研究发展计划(102-10-01-05)

作品数：14 被引量：110H指数：6
相关作者：李桂源李伟芳张小慧张必成向娟娟更多>>
相关机构：中南大学湖南医科大学中国人民解放军第一军医大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 14篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 12篇鼻咽
  • 8篇鼻咽癌
  • 7篇基因
  • 6篇咽肿瘤
  • 6篇肿瘤
  • 6篇鼻咽肿瘤
  • 4篇蛋白
  • 3篇转染
  • 3篇细胞
  • 3篇克隆
  • 2篇抑瘤
  • 2篇抑瘤基因
  • 2篇上调
  • 2篇染色
  • 2篇染色体
  • 2篇瘤基因
  • 2篇NPC
  • 2篇BRD7
  • 2篇CDNA
  • 2篇HNE1

机构

  • 10篇中南大学
  • 4篇湖南医科大学
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇湖南师范大学

作者

  • 14篇李桂源
  • 6篇李伟芳
  • 6篇张必成
  • 6篇余鹰
  • 6篇向娟娟
  • 5篇朱诗国
  • 5篇张小慧
  • 5篇周鸣
  • 5篇曹利
  • 5篇李忠花
  • 4篇唐珂
  • 4篇李小玲
  • 3篇向秋
  • 3篇谭琛
  • 3篇钱骏
  • 3篇周鸣
  • 2篇王洁如
  • 2篇王洁如
  • 2篇邱元正
  • 2篇李江

传媒

  • 9篇癌症
  • 1篇中国科学（C...
  • 1篇中国耳鼻咽喉...
  • 1篇生物技术
  • 1篇中华耳鼻咽喉...
  • 1篇Chines...

年份

  • 4篇2002
  • 8篇2001
  • 3篇2000
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
鼻咽癌细胞中表达上调的新基因NAG23(FBXO30)的克隆与分析被引量：9
2001年
目的:分离位于6号染色体长臂鼻咽癌高频等位基因不平衡位点D6S1581(6q25.3-27)附近与鼻咽癌相关的新基因。方法:运用差异RT-PCR检测定位于D6S1581附近的11个表达序列标签(expressedsequencetags,EST)在正常人鼻咽上皮细胞和鼻咽癌细胞系中的表达水平,并对其中一个表达上调的EST在鼻咽癌组织和正常鼻咽组织中的表达情况进行分析。用Northern杂交验证其表达差异并检测其在多脏器中的表达及其所代表基因的转录本大小。利用生物信息学资源克隆并获得其全长cDNA,对该序列进行初步分析。结果:获得了一个位于6q25.3-27的在鼻咽癌中表达上调的新基因,命名为NAG23(FBXO30)(GenBank收录编号:AF248640)。该基因在68.9%的鼻咽癌活检组织中表达上调,cDNA全长3301bp,预测其开放阅读框编码一个含390个氨基酸的胞浆蛋白,该蛋白含一个F-box基序。结论:NAG23基因是一个在鼻咽癌中表达上调的新基因,很可能编码一新的F-box蛋白。NAG23可能参与了鼻咽癌的发生发展。
李忠花曹利向娟娟张必成向秋唐珂周鸣李小玲李伟芳李桂源
关键词：鼻咽肿瘤基因克隆F-BOX蛋白
Detailed Deletion Mapping of Chromosome 9p21-22 in Nasopharyngeal Carcinoma
2000年
Objective: To further refine the extent of deletion on chromosome 9p21-22 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and provide evidence for discovering new tumor suppressor gene. Methods: Loss of heterozygosity (LOH) on chromosome 9p21-22 was analyzed in 25 paired blood and tumor samples by using 11 high-density microsatellite polymorphic markers. Results: 17 of 25 cases (68.0%) showed LOH at one or more loci. Higher frequencies of LOH were found at four loci: D9S161 (35.0%), D9S1678 (31.5%), D9S263 (33.3%) and D9S1853 (33.3%), where 6 cases had a contiguous stretch of allelic loss. Conclusion: The minimal common region of deletion might be defined between D9S161 and D9S1853 (estimated about 2.7 cM in extent) at 9p21.1, suggesting that inactivation of one or more tumor suppressor genes located in this region may be an important step in NPC.
阳剑波
应用酵母双杂交系统筛选BRD7相互作用的蛋白质被引量：14
2002年
BRD7基因是鼻咽癌组织表达下调/缺失的基因,有强烈的鼻咽癌细胞系HNE1生长抑制作用.利用酵母双杂交系统筛选与BRD7蛋白相互作用的蛋白,首先将BRD7基因的完整阅读框架部分亚克隆至pAS2载体（BRD7-BD）,然后以BRD7-BD为靶蛋白,筛选人胎脑cDNA文库,在4.8×106个转化子中筛选到11个阳性克隆,序列测定表明,分离到溴区包含蛋由3,溴区包含蛋白2,β-IκB激酶,KIAA1375蛋白,白介素7和接头相关蛋白复合物3δ-1亚单位等与BRD7相互作用蛋白,说明BRD7可能与BRD3或BRD2蛋白形成异源二聚体或三聚体发挥核内转录调节功能.
余鹰朱诗国张必成周鸣李小玲李桂源
关键词：酵母双杂交系统相互作用蛋白鼻咽癌
BRD7基因转染对鼻咽癌细胞生长的抑制作用被引量：25
2001年
目的：探讨鼻咽癌负相关基因ＢＲＤ７对鼻咽癌细胞系ＨＮＥＩ生长的影响。方法：构建ＢＲＤ７基因真核表达载体ｐｃＤＮＡ３.１（＋）／ＢＲＤ７重组体，采用脂质体介导转染技术，将ＢＲＤ７真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入鼻咽癌细胞系ＨＮＥ１，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＲＴ－ＰＣＲ分别检测外源性ＤＮＡ的整合和ＢＲＤ７基因的表达，并借助细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验、流式细胞计数和裸鼠接种方法对转染细胞的生物学行为进行了检测。结果：转染ＢＲＤ７基因的 ＨＮＥ１生长倍增时间为５３ ｈ，较ＨＮＥ１（２３．９ｈ）和空载体转染 ＨＮＥ１（２４.１ｈ）明显延长，流式细胞仪表明，ＢＲＤ７表达升高延缓细胞由Ｇ０－Ｇ１期进人Ｓ期，ＢＲＤ７转染ＨＮＥ１在软琼脂中集落形成率较对照组显著下降（Ｐ＜０．０１），裸鼠接种试验显示ＢＲＤ７基因转染细胞ＨＮＥ１生长速度受到抑制。结论：ＢＲＤ７基因重表达有助于ＨＮＥ１的恶性表型的逆转；ＢＲＤ７是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因良好的候选者。
余鹰朱诗国张必成李忠花向娟娟周鸣李小玲李桂源
关键词：鼻咽肿瘤BRD7抑瘤基因基因转染HNE1NPC
鼻咽上皮组织定向cDNA文库的快速构建被引量：6
2001年
目的　采用SMART (switchingmechanismat5′endofRNAtranscript)技术 ,快速构建了高质量的成人鼻咽上皮组织定向cDNA文库。方法　从成人正常鼻咽上皮组织分离总RNA ,利用经修饰的oligo(dT)引物 (含sfiIB酶切位点 )合成cDNA第一链 ,同时根据真核生物mRNA 5′端帽子结构特点 ,利用SMART核苷酸 (含sfiIA酶切位点 )作为cDNA第二链在mRNA 5′端延伸出去的模板 ,进而以此序列为引物利用LD PCR(Long distance PCR)合成双链cDNA ,双链cDNA经sfiI(IA&IB)酶切和过柱分级分离后 ,克隆入经sfiI酶切的λTripIEX2载体后经体外包装而成cDNA文库。结果　获得 1.5× 10 6个重组子 ,重组率达 10 0 %。文库扩增后 ,滴度达 3.8× 10 9pfu/ml,插入cDNA平均长度为 1.5kb。结论构建的成人鼻咽cDNA文库具有良好的质量 ,该cDNA文库为进一步筛选。
张必成余鹰邱元正钱骏周鸣李忠花张小慧向娟娟朱诗国李桂源
关键词：鼻咽肿瘤DNA重组基因文库遗传学技术CDNASMART
CK13基因与EB病毒DNA在鼻咽癌中的表达及临床意义被引量：3
2001年
目的探讨细胞角蛋白基因１３ （Ｃ １３）和ＥＢ病毒ＤＮＡ在人鼻咽癌（ＮＰＣ）组织中的表达及其意义。方法应用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交对３２例 ＮＰＣ和 ８例慢性鼻咽炎（ＣＩＮＥ）组织进行ＣＫ１３ｍＲＮＡ水平检测，同时应用ＰＣＲ方法进行ＥＢ病毒ＤＮＡ检测。结果ＣＫ１３基因在鼻咽炎组织中高表达，在ＮＰＣ组织中的表达显著下调，下调的频率达６５．６３％（２１／３２）。结论ＮＰＣ组织的分化可能与ＣＫ１３基因的表达下调有关。
邱元正文忠林功标肖健云田勇泉赵素萍陶正德李桂源
关键词：鼻咽癌EB病毒聚合酶链反应NORTHERN杂交
间隙连接蛋白Cx43、Cx45在鼻咽癌组织中的表达被引量：5
2002年
背景与目的:间隙连接在细胞间的营养物质、离子和细胞调节因子的交换中起重要作用。间隙连接异常,细胞间的物质交换障碍,往往导致细胞分裂失控。在有些癌组织和癌细胞中存在间隙连接的功能异常,恢复这些癌细胞的间隙连接功能,它们表现出正常细胞的生物学表型。因此,探讨细胞间隙连接蛋白在鼻咽癌中的表达,将有可能为临床诊断提供方法,为鼻咽癌的发病机理提供新思路。方法:采用免疫组化技术检测间隙连接蛋白Cx43、Cx45在鼻咽组织中的表达。结果:①Cx43、Cx45在鼻咽慢性炎症组织和鼻咽癌组织中有表达差异,在鼻咽癌中,Cx43、Cx45阳性率为44.8%、46.6%,与鼻咽慢性炎症柱状上皮细胞阳性率的86.5%和100%比较,显著性下降(P<0.01)。②鼻咽慢性炎症组织比鼻咽癌组织含鳞状细胞的百分率低(P<0.01),分别为29.7%和56.9%。③Cx43、Cx45在鼻咽癌旁柱状上皮细胞中的表达低于癌旁鳞状上皮细胞(P<0.001),高于癌细胞(P<0.01)。结论:Cx43、Cx45在鼻咽组织中的表达异常,可能与鼻咽组织鳞化和癌变有关。
向秋范松青李江谭琛向娟娟张秋红王蓉李桂源
关键词：间隙连接蛋白CX43CX45鼻咽癌
鼻咽癌上皮细胞株HNE1 cDNA文库的构建及鼻咽癌表达上调基因的筛选
2002年
张必成李忠花朱诗国曹利余鹰李伟芳李桂源
关键词：鼻咽肿瘤CDNA克隆NPC上调基因
NAG14基因结构域蛋白的原核表达被引量：1
2002年
董利王洁如钱骏张小慧谭琛聂新民李桂源
关键词：基因表达融合蛋白
染色体7q32-ter最小共同缺失区鼻咽癌抑瘤基因候选者的筛选被引量：4
2000年
目的：在明确 7q32- ter区域等位基因杂合性丢失最小共同缺失区位于以 D7S509为中心的 D7S500- D7S509- D7S495的基础上，筛选和克隆位于该区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：应用定位—候选克隆策略筛选位于该最小共同缺失区的 3′末端 ESTs(expressed sequence tags,ESTs),RT- PCR和 Northern杂交筛选出在鼻咽癌细胞株和活检组织中表达下调的 ESTs,采用 cDNA克隆测序和生物信息学资源获取候选 EST的全长 cDNA。 Southern杂交和甲基化分析研究候选基因表达下调的机制。结果：筛选 D7S500- D7S495区域内的 12个代表新基因的 3′末端 ESTs序列，发现一个 EST（ AI290024）在鼻咽癌细胞株及 50％（ 6/12）的鼻咽癌活检组织中表达下调， Multiple Tissue Northern(MTNTM) Blot杂交结果显示该 EST在心、肝、肾等多种组织中存在大小 2.0 kb的转录本。通过测定包含该 EST的 cDNA克隆，获得该新基因（命名为 NAG- 22基因） 2.3 kb转录本的全长 cDNA(GenBank登录号： AF247820),编码 77AA，含有 disintegrin的结构域。 NAG22在 NPC中表达下调的机制不是高甲基化和基因拷贝数的丢失。结论： NAG22是定位于 7q32- ter最小共同缺失区的一个与鼻咽癌相关的抑瘤基因候选者。
张小慧钱骏王洁如董利曹利周鸣唐珂李伟芳李桂源
关键词：鼻咽肿瘤
全选 清除 导出
共2页<12>
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