国家自然科学基金(30600620)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 生育酚结合蛋白通过磷酸肌醇3激酶途径抑制前列腺癌的生长被引量：6
- 2007年
- 【目的】探讨生育酚结合蛋白(TAP)对前列腺癌细胞的生长调节及其分子机制。【方法】四甲基偶氮唑盐生长试验(MTT)测定细胞增殖情况,体外集落形成试验测定各细胞的致癌能力,高效液相层析法检测细胞内维生素E的浓度,利用基因转染、基因沉默、免疫印迹、Northern blot,RT-PCR、荧光定量PCR、免疫沉淀等方法研究TAP对前列腺细胞生长的作用及机制。【结果】TAP mRNA水平在前列腺癌细胞LNCaP、PC-3、DU-145、CWR22R中均较正常前列腺细胞RWPE-1低。TAP可促进癌细胞保留维生素E并增强其抗前列腺癌增殖的效应。无维生素E作用下,转染TAP可抑制前列腺癌细胞LNCaP、DU-145的生长,第6天细胞数比对照组分别减少35.8%与42.4%;LNCaP细胞克隆形成率下降54.3%(P<0.05)。利用siRNA在良性前列腺细胞HPr-1中沉默TAP基因,培养9d后,细胞数比对照组增加124.3%(P<0.01)。TAP通过抑制磷酸肌醇PI3激酶信号,而非通过影响细胞周期或雄激素受体信号发挥作用。免疫沉淀实验表明TAP通过抑制PI3K的亚单位p110与p85的相互作用,进而干扰PI3K-Akt信号通路;持续激活Akt的活性可削弱TAP对前列腺癌细胞生长的抑制能力。【结论】TAP不仅能促进前列腺癌细胞摄取和增强维生素E的抗前列腺癌效应,还可通过非维生素E途径发挥作用,可能是防治前列腺癌的有价值的分子靶点。
- 温星桥李小娟罗云王林周祥福蔡育彬温机灵高新
- 关键词：磷酸肌醇3激酶
- 沉默PAK6基因可抑制前列腺癌生长并增强多烯紫杉醇的作用被引量：5
- 2008年
- 目的观察沉默p21活化激酶6（PAK6）基因对前列腺癌生长及联用多烯紫杉醇的作用。方法转染siRNA（30nmol／L）前列腺癌细胞PC-3和DU145中，检测细胞增殖、集落形成能力、侵袭性能力、细胞周期及凋亡。以3×10^6个PC-3细胞（100μl）注射裸鼠皮下成瘤，观察siRNA及联用多烯紫杉醇对肿瘤生长效应。结果PAK6-siRNA能有效沉默PAK6并抑制前列腺癌细胞的生长、集落形成能力和侵袭力、使细胞周期停滞在G2／M期。还可抑制裸鼠体内移植瘤生长。PAK6-siRNA治疗组瘤体重为（146．0±8．5）mg，低于对照组（451．0±22．3）mg（P〈0．01）。PAK6-siRNA在体内外均可增强多烯紫杉醇作用。结论沉默PAK6可抑制前列腺癌生长并增强多烯紫杉醇的化疗作用。
- 温星桥李小娟欧阳斌唐录英何丹吴杰英袁小旭孙其鹏何盛泉高新
- 关键词：前列腺癌多烯紫杉醇RNA干扰
- 维生素E对前列腺癌微小染色体维持蛋白4的抑制作用及信号通路被引量：1
- 2007年
- 目的探讨维生素E调节前列腺癌细胞DNA复制的新分子机制及信传导通路。方法利用基因转染、免疫印迹、实时定量聚合酶链反应(PCR)、免疫沉淀等方法研究不同浓度、不同时间琥珀酸维生素E(VES)对前列腺癌细胞内的微小染色体维持蛋白4(MCM4)的mRNA及蛋白表达水平的影响。结果VES可抑制前列腺癌MCM4 mRNA的表达,并存在时效与量效关系,20μmoL/L VES处理LNCaP细胞36 h,MCM4的mRNA表达水平较对照组下降24.5%(P<0.05),作用96 h下降达60.3%;随着VES浓度的增加,MCM4 mRNA的表达水平受抑制的程度逐步加深。Western blot表明VES可抑制MCM4蛋白的表达。过表达E2F1可拮抗VES对MCM4的抑制作用。VES抑制Rb磷酸化,增加Rb与E2F1的结合程度。BrdU摄入试验表明20μmol/L与40μmol/L VES处理LNCaP细胞24h后,癌细胞内DNA合成较对照组下降63.4%与71.6%(P<0.05);48 h后分别达74.8%与81.5%(P<0.05)。结论我们识别了维生素E抑制前列腺癌细胞DNA复制的一种新机制是下调MCM4的表达,E2F1-Rb蛋白参与这一信号传导通路。
- 温星桥李小娟王德娟温机灵张嘉希高新
- 关键词：维生素E前列腺癌DNA复制染色体
