国家教育部博士点基金(B200106)
- 作品数：3 被引量：28H指数：3
- 相关作者：董汉松王金生梁元存刘爱新张天宇更多>>
- 相关机构：南京农业大学山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金江苏省高技术研究计划(农业)项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 植物抗病性信号传导调控基因的克隆与表达检测方法的研究被引量：14
- 2003年
- 建立了从不同植物中克隆抗病性信号传导调控基因及检测其表达的方法 ,并优化了相关条件。用RT PCR和PCR方法从拟南芥、烟草、番茄、中华鳖中克隆了 7个信号传导通路中 18个调控基因的cDNA和DNA序列 ,它们分别是 :抗病基因Pto介导的蛋白激酶级联中的Pti4、Pti5和Pti6 ,细胞编程死亡通路中的Hin1和hsr2 0 3,水杨酸介导的系统性获得抗病性通路中的NPR1,乙烯信号通路中的ETR1、ERS1、CTR1、EIN2和ERF1,茉莉酸信号通路中的COI1,核黄素信号通路中的RFBP和LR ,脱落酸信号通路中的ABF3、ABF4和ABH1,以及调控不同信号通路的通调基因NDR1。进一步研究了这些基因表达的定量测定方法 :用细菌激发子harpinEa处理植物 ,提取RNA作为cDNA第1链合成的模板 ,以在真核生物中广泛同源和高度保守的细胞伸长翻译因子基因EF1α为内参 ,用半定量RT PCR法测定基因mRNA的积累 ,可以比较准确地检测不同基因的相对表达水平。
- 董宏平彭建令余晓江赵静王颖董汉松
- 关键词：抗病性信号传导调控基因基因克隆半定量RT-PCR
- Elicitin诱导烟草微敏反应和防卫基因的表达被引量：5
- 2007年
- 研究了一种α型elicitin—parasiticein对烟草微敏反应（microscopic hypersensitive response，micro-HR）和防卫反应分子表征基因表达的诱导作用。用150nmol/L的parasiticein喷洒烟草叶片12h后，经曲利本蓝（trypanblue）染色，光镜下可观察到有细胞坏死，说明parasiticein引起了micro—HR，而水和低浓度的parasiticein不能引起micro—HR。用parasiticein注射叶片可引起肉眼可见的HR，注射用parasiticein浓度远比喷洒引起micro-HR的浓度低。Parasiticein还可诱导对TMV的抗性，浓度在30nmol/L时比150nmol/L的效果好。用parasiticein注射烟草30min，HR表征基因hsr203J和hin1开始表达，在9h内逐渐降低，12—16h肉眼可观察到HR。Parasiticein喷洒烟草后，病程相关蛋白（pathogenesis-related，PR）基因PR-1b易在诱导的第1d到第5d都有一定量的表达。可见，parasiticein能同步诱导过敏反应和抗病性及其分子表征基因的表达。
- 梁元存刘爱新王金生张天宇董汉松
- 关键词：ELICITIN防卫反应
- 寄生疫霉parA1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：11
- 2004年
- 根据已报道的寄生疫霉 (Phytophthoraparasitica)parA1基因的序列设计引物 ,从 4株寄生疫霉中国菌株 (3株来自烟草 ,1株来自刺槐 )中克隆到此基因并进行了重组表达。序列分析表明 4株寄生疫霉parA1基因序列高度保守。对表达载体pET 30a(+)双酶切 ,构建表达Parasiticein蛋白的表达载体pET eli,用CaCl2 法转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL2 1,通过诱导在大肠杆菌中进行非融合表达 ,表达产物在烟草上引起过敏性反应。性质测定表明 ,表达产物有一定的耐热性 ,并对蛋白酶K敏感。
- 梁元存刘爱新董汉松王金生张天宇
- 关键词：寄生疫霉克隆大肠杆菌耐热性烟草黑胫病
- 寄生疫霉ParA1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 根据已报道的寄生疫霉(Phytophthora parasitica)parA1基因的序列设计引物,从4株寄生疫霉中国菌株(3株来自烟草,1株来自刺槐)中克隆到此基因并进行了重组表达。序列分析表明4株寄生疫霉parA1基...
- 梁元存刘爱新王玉军董汉松张天宇
- 关键词：寄生疫霉克隆
- 文献传递
