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黑龙江省卫生厅科研项目(2005-159)
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相关作者:
焦治兴
麻立
王长林
赵忠山
刘兴汉
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相关机构:
哈尔滨医科大学附属第四医院
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重组人内皮抑素提取方法的优化及其对膀胱癌的抑制作用
2009年
目的摸索重组人内皮抑素(rhES)蛋白的最佳表达条件。探索内皮抑素(ES)对膀胱癌实体肿瘤及细胞系的抑制作用。方法分别从不同异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、加IPTG时机、表达时间等几个方面对rhES的蛋白表达条件进行摸索和优化。活性检测:(1)动物实验:观察内皮抑素对裸鼠皮下移植瘤的生长情况的影响。(2)细胞实验:MTT法、肿瘤细胞生长曲线观察内皮抑素对T-24膀胱癌细胞系的作用。结果rhES在大肠杆菌中的表达量占总菌体蛋白的58.65%,纯化后的蛋白纯度为96.22%。动物实验:rhES的抑瘤率为66.8%。细胞实验:MTT实验中rhES的半数抑制浓度IC50=22μg/ml;肿瘤细胞生长曲线表明第7天时rhES组的细胞数比对照组减少了58.75%。结论本实验所优化的最佳表达条件可获得高表达、高活性的rhEs蛋白,Es不但对裸鼠接种的膀胱癌有抑制作用,对膀胱癌细胞系也有抑制作用。
任明华
倪少滨
陈起引
徐万海
王长林
付宜鸣
焦治兴
麻立
赵忠山
刘兴汉
关键词:
内皮抑素类
膀胱肿瘤
蛋白表达
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