国家自然科学基金(9910761946)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
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- 核受体辅活化子PNRC与孤儿核受体SF1相互作用位点的鉴定被引量：7
- 2002年
- 为了阐明核受体辅活化子 (proline richnuclearreceptorcoactivatorprotein ,PNRC)在孤儿核受体类固醇生成因子 1(steroidogenicfactor1,SF1)基因表达调控中的作用 ,采用酵母双杂合分析、缺失突变技术和瞬时转染等研究方法鉴定了PNRC与SF1的相互作用位点 .结果显示 ,PNRC中氨基酸 2 78～ 30 0区域是与SF1相互作用的位点 .该区域富含脯氨酸 ,其中有 1个SH3结合模体 (motif) ,单独的SH3模体不足以与SF1产生有效的相互作用 .瞬时转染分析表明 ,PNRC 2 70 32 7对野生型PNRC的辅激活功能具有负显性抑制效应 .研究结果表明 ,含SH3结合模体的PNRC 2 78 30
- 陈彬陈敏陈健李渝萍周度金
- 关键词：相互作用位点
- AF-2结构域突变的SF1酵母表达质粒的构建及其与PNRC相互作用分析
- 2003年
- 目的 探讨激活功能 2 (AF 2 )结构域在孤儿核受体辅活化富含脯氨酸的受体辅调节蛋白 (PNRC)相互作用的意义。方法 采用PCR和DNA重组技术构建了野生型SF1和AF 2结构域突变的SF1的酵母表达质粒pGBT9 SF1/HBDD和pGBT9 SF1/HBD/AF 2del并采用酵母双杂合分析比较了它们与PNRC的相互作用强弱。结果 SF1/HBD能与野生型PNRC及其N 末端缺失突变体PNRC2 70 3 2 7,PNRC2 78 3 0 0产生较强的相互作用 ,而AF 2缺失的SF1/HBD不与这些PNRC片段发生相互作用。结论 功能性的AF 2结构域是SF1与PNRC相互作用所必须的。
- 陈彬陈敏李渝萍陈健周度金
- 利用酵母双杂合系统筛选与hERRα1相互作用的蛋白质被引量：7
- 2003年
- 目的 利用酵母双杂合系统筛选乳腺组织中与人雌激素受体相关受体α1(Humanestrogenreceptorrelated receptorα1,hERRα1)相互作用的蛋白质 ,特别是新的核受体辅助活化因子 ,以进一步研究核受体辅助活化因子在乳腺癌发生、发展中如何参与ERR1调控基因的表达。方法 以质粒pGBT9 hERRα1 LBD为“诱饵” ,筛选人乳腺组织cDNA文库。结果 筛得有阳性相互作用的克隆共 17个。除 3种为已知核受体辅助调节因子外 ,其他为功能已经明确的蛋白 ,其中有3种与hERRα1有明显相互作用。结论 核受体辅助活化因子SRC 1,RIP14 0 。
- 李渝萍陈敏陈彬陈健李强周度金
- 关键词：酵母双杂合系统乳腺癌
- hERR1对乳腺癌细胞生长活性及ER转录激活功能的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 构建hERR1高表达的乳腺癌细胞株 ,研究hERR1对乳腺癌细胞株生长活性的影响及其机制。方法 PCR构建hERR1真核表达载体 ,转染乳腺癌细胞株 ,G418筛选稳定表达细胞株 ;MTT法研究hERR1高表达株的生长速率 ;瞬时转染结合CAT活性分析 ,研究hERR1对ER转录功能的影响。结果 筛选了hERR1高表达乳腺癌细胞株 ;局部高表达的hERR1在体外抑制乳腺癌细胞株的生长 ;hERR1以剂量依赖方式抑制ER转录激活功能。结论 局部高表达hERR1可能通过与ER竞争结合ERE ,抑制ER的转录活化功能 。
- 陈健陈敏陈彬周长保李渝萍彭家和李蓉芬钟小林周度金
- 关键词：乳腺癌基因表达调控
- 核受体辅活化子PNRC与孤儿核受体SF1的相互作用有赖于SF1的AF-2功能结构域被引量：3
- 2002年
- 核受体辅活化子PNRC(proline richnuclearreceptorcoregulatoryprotein ,富含脯氨酸的核受体辅调节蛋白 )可通过含SH3结合模体的PNRC2 78 30 0区域与孤儿核受体类固醇生成因子 1(steroido genicfactor 1,SF1)相互作用 .激活功能 2 (activationfunction 2 ,AF 2 )结构域在核受体配体依赖性转录激活中发挥了重要作用 ,为探讨AF 2结构域在SF1转录激活中的作用机制 ,采用酵母双杂合分析、缺失突变技术和瞬时转染等研究方法考察了AF 2结构域对SF1反式激活功能及SF1与PNRC相互作用的影响 .SF1的反式激活功能有赖于AF 2结构域 ,其机制是SF1AF 2结构域的突变严重影响了SF1与PNRC的有效相互作用 ,并消除了PNRC对SF1反式激活功能的辅激活作用 .结果表明 ,SF1与PNRC的相互作用有赖于AF
- 陈彬陈敏陈健李渝萍周度金
- 关键词：相互作用
