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国家自然科学基金(30571825)

作品数：4 被引量：3H指数：1
相关作者：赵刚吴志勇张志奇邱江锋陈炜更多>>
相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
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相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 3篇星状细胞
  • 3篇细胞
  • 3篇纤维化
  • 3篇肝纤维化
  • 3篇肝星状细胞
  • 2篇基因
  • 1篇抑制剂
  • 1篇鼠肝
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇特异性抑制
  • 1篇特异性抑制剂
  • 1篇子机
  • 1篇细胞培养
  • 1篇细胞外
  • 1篇细胞外基质
  • 1篇慢病毒
  • 1篇慢病毒载体
  • 1篇库普弗细胞
  • 1篇基因治疗

机构

  • 4篇上海交通大学...

作者

  • 4篇吴志勇
  • 4篇赵刚
  • 3篇张志奇
  • 2篇陈炜
  • 2篇邱江锋
  • 1篇兰斓
  • 1篇陈波
  • 1篇张斌

传媒

  • 2篇中华消化外科...
  • 1篇中华外科杂志
  • 1篇肝胆胰外科杂...

年份

  • 4篇2009
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
组织转谷氨酰胺酶基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞的影响
2009年
目的构建组织转谷氨酰胺酶（tTG）RNA干扰（RNAi）慢病毒载体，研究其对肝星状细胞（HSC）的影响。方法设计、合成tTG基因RNAi有效靶序列，与慢病毒载体系统进行连接、转染，获得表达tTG基因的RNAi慢病毒载体质粒（Lenti—siRNA—tTG）；将大鼠活化HSC分成阴性对照组（CON）、siRNA—GFP对照组（GFP）和siRNA—tTG组（rtTG）。应用real—timePCR、Western blot和MTT法检测Lenti-siRNA—tTG感染后HSC中tTG、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原（collagen-1）的mRNA和蛋白表达情况以及HSC的增殖情况。结果成功构建siRNA-tTG慢病毒载体；Lenti—siRNA-tTG感染后，HSC中tTG和collagen-1的mRNA表达水平降低（P〈0．05），HSC中tTG、lysine和collagen-1的蛋白表达水平下降（P〈0．01），HSC的增殖能力降低（P〈0．05）。结论Lenti-siRNA-tTG能通过抑制HSC中tTG基因的表达而抑制HSC的增殖，并降低HSC中collagen-1合成和交联的形成，具有潜在的抗纤维化形成的功能。
赵刚张志奇吴志勇陈波张斌
关键词：肝细胞RNA干扰慢病毒载体
大鼠肝星状细胞和库普弗细胞的分离培养及鉴定被引量：2
2009年
目的应用改良的方法同步分离、培养和鉴定原代大鼠肝星状细胞（HSC）和库普弗细胞（KC）。方法采用Ⅳ型胶原酶肝脏灌注消化及Percoll密度梯度离心体外同步分离、纯化及培养HSC和KC，并用光学显微镜、免疫组织化学染色、电子显微镜等方法进行鉴定。结果每只大鼠HSC和KC的细胞获得率分别为（1．8～2．9）×10^7和（0．8～1．4）×10^7，平均纯度分别为94．7％±1．7％和95．2％±1．5％，活力分别为95．5％±1．3％和96．4％±2．4％。结论Ⅳ型胶原酶肝脏灌注消化及Percoll密度梯度离心体外同步分离培养HSC和KC方法简单，细胞获得率、活力和纯度高。
张志奇邱江锋赵刚陈炜兰斓吴志勇
关键词：肝星状细胞库普弗细胞细胞培养肝纤维化
肝纤维化基因治疗研究进展被引量：1
2009年
肝纤维化是肝脏受到损害因子长期刺激的结果,并将最终演变为肝硬化。肝纤维化是一个可逆的过程。现代基因治疗技术的进步为肝纤维化和肝硬化的治疗带来了新的希望。本文着重就肝纤维化的分子机制研究和载体技术在肝纤维化基因治疗中的应用作一综述。
赵刚吴志勇
关键词：肝纤维化分子机制基因治疗
组织转谷氨酰胺酶特异性抑制剂预防肝纤维化的实验研究
2009年
目的观察组织转谷氨酰胺酶（tTG）特异性抑制剂六甲烯胺对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝纤维化形成的影响。方法雄性SD大鼠100只，按随机数字表法分成正常对照组（20只）、肝纤维化组（40只）、六甲烯胺组（40只）。用腹腔内注射CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，在注射CCl4的前2d开始腹腔内注射六甲烯胺（112mg·kg^-1·d^-1），直到注射CCl4的第4、8周处死大鼠，摘取肝脏并提取血清，应用RT—PCR检测tTG、α-平滑肌抗体（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）等基因的mRNA表达情况，应用Western blot检测tTG和α-SMA蛋白的表达，肝功能和肝脏组织中羟脯氨酸的含量，同时取大鼠肝脏行组织学检查，并对肝纤维化程度进行半定量计分系统分级评分。采用单因素方差分析检测结果。结果CCl4注射8周后，肝纤维化组肝损伤明显，ALT、总胆汁酸、TBil、羟脯氨酸、tTG、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白酶、TIMP-1分别为（1313±157）U／L、（99．9±18．5）μmol／L、（10．9±1．6）μmol／L、（55±12）μg／g、145．6±51．2、130．3±44．6、211．3±75．1、162．4±53．5；而六甲烯胺处理后，肝纤维化程度、肝功能指标均显著降低，ALT、总胆汁酸、TBil、羟脯氨酸、tTG、α—SMA、Ⅰ型胶原蛋白酶、TIMP-1分别为（378±87）U／L、（61．0±12．7）μmoL／L、（9．8±1．7）μmol／L、（70±14）μg／g、48．6±12．3、40．7±12．3、63．9±16．0、59．2±23．4。结论六甲烯胺能通过抑制tTG途径显著改善CCl4诱导的大鼠肝纤维化程度。
邱江锋张志奇赵刚陈炜吴志勇
关键词：肝星状细胞细胞外基质肝纤维化
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