教育部“同步辐射博士生创新中心”研究生创新基金(20041216S)
- 作品数:4 被引量:30H指数:4
- 相关作者:姜绍通罗水忠郑志潘丽军李兴江更多>>
- 相关机构:合肥工业大学中国科学技术大学更多>>
- 发文基金:教育部“同步辐射博士生创新中心”研究生创新基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 米根霉乙醇脱氢酶(ADH)突变菌株的诱变选育被引量:10
- 2007年
- 米根霉发酵生产L-乳酸过程中,由于丙酮酸在丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶(ADH)催化下生成乙醇,使得丙酮酸向乳酸转化的流量减少。采用亚硝基胍(NTG)诱变米根霉AS3.3462孢子液,诱变剂量为0.15 mg/ mL时,致死率为70%~80%。在含丙烯醇的YPD筛选培养基上筛选获得两株ADH活力降低的突变株mut-1和mut-2,检测突变株mut-1和mut-2的最大ADH活力分别为35.67和43.09U/mL,是原始菌株的41.63%和50.29%。发酵72h后,原始菌株的乙醇与乳酸浓度分别为28.9g/L和40.31g/L,而mut-1和mut-2突变株的乙醇产量分别为4.87g/L和6.56g/L,乳酸产量为54.45g/L和44.07g/L。在相同的发酵条件下,米根霉ADH突变株mut-1和mut-2对还原糖的利用速率高于出发菌株,其生物量积累亦高于出发菌株。
- 郑志姜绍通罗水忠李兴江马林
- 关键词:米根霉ADHL-乳酸乙醇
- 限氧与通氧条件下米根霉ADH突变株的碳代谢特性被引量:7
- 2006年
- 目的乙醇脱氢酶(ADH)是米根霉发酵生产L-乳酸代谢途径中的支路关键酶,选育米根霉ADH突变株,降低ADH活力,可以提高乳酸转化率。方法利用亚硝基胍(NTG)诱变米根霉As3.3462,在含丙烯醇的YPD选择培养基上筛选获得ADH突变株,研究了突变菌株在限氧与通氧条件下的乙醇、乳酸、ADH与L-乳酸脱氢酶(LDH)的特性。结果获得11株ADH突变株,其中mut-2突变株在通氧和限氧条件下对乳酸的转化率比出发菌株分别提高了84.6%和175%,而对乙醇的转化分别下降了39.5%和59.8%。mut-2突变株的最大ADH活力在通氧和限氧条件下均比出发菌株降低,而LDH活力在限氧条件下显著增加,通氧条件下变化不明显。结论氧气的供给对米根霉发酵产L-乳酸的产物组成比例影响很大,限氧发酵条件下ADH活力提高,乙醇积累。结果还表明,通过筛选米根霉ADH突变株,是获得L-乳酸高产菌株的一种简单快速的有效手段。
- 郑志姜绍通罗水忠李兴江潘丽军赵辛
- 关键词:米根霉ADH乙醇L-乳酸
- 同步辐射C N O k软X射线对米根霉诱变效果比较分析被引量:4
- 2006年
- 同步辐射软X射线具有能谱宽且连续、精确可调、单色性好、可精确计算辐照剂量等特点,可提供生物分子所具有的C,N,O和k层电子吸收边波长的射线,在生物学领域有着广泛的用途。采用同步辐射2.3,3.2和4.4nm波长软X射线对米根霉3.819孢子进行辐射诱变,研究抽真空时间、不同吸收边射线、辐照剂量与诱变效果的关系。结果表明,抽真空时间对米根霉孢子的存活率有很大影响,时间越短存活率越高。YPD平板筛选结果显示:Ck软X射线诱变致死率最高,筛选得到的突变株最少,主要产生在高剂量区;Nk软X射线的效果较好,突变株产生在低剂量区;Ok诱变致死率最低,筛选得到的突变株最多,在不同剂量范围内均有产生。大平皿点样得到Nk软X射线诱变后的11号突变株H/C比值最大,其发酵液经高效液相色谱测定产物几乎为乳酸。
- 肖小发罗水忠姜绍通蒋诗平
- 关键词:米根霉诱变效果
- 米根霉乙醇脱氢酶突变株的筛选及其锌镁离子的调控研究被引量:20
- 2006年
- 利用亚硝基胍(NTG)对米根霉As3.3461进行诱变,在含丙烯醇0.6%的YPD平板上筛选获得21株乙醇含量降低的突变株,其中突变株HBF-12乳酸产量最高。与出发菌株相比,突变株HBF-12的乙醇产量和乙醇脱氢酶(ADH)活力分别降低了73.6%和76%,乳酸产量和乳酸脱氢酶(LDH)活力分别提高了41.2%和19.6%。研究Zn2+与Mg2+对HBF-12中ADH与LDH活性的调控,结果显示Zn2+对ADH有强烈的激活作用,但抑制LDH活性;Mg2+则轻微抑制ADH活性,促使LDH活性增强。考察两种离子影响末端产物乙醇与乳酸形成的实验说明:培养基中Zn2+浓度与乳酸积累基本上呈负相关性,与乙醇积累呈正相关性,浓度降低有利于生物量积累;Mg2+浓度增加可以促进乳酸积累和生物量增加,对于乙醇积累无明显作用。发酵培养基中添加0.01%Zn2+、0.04%Mg2+,突变株产酸可达96.21g/L。
- 潘丽军付萍郑志罗水忠姜绍通
- 关键词:米根霉乙醇脱氢酶乳酸脱氢酶锌离子镁离子