国家自然科学基金(30872851)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 喉癌中Par-4与hTERT的表达及相关性被引量：1
- 2010年
- 目的探讨前列腺凋亡反应因子(prostate apoptosis response-4,Par-4)和人端粒酶逆转录酶(human telome rasereverse transcriptase,hTERT)两种蛋白在靶向hTERTmRNA干扰前后的喉癌中的表达及其相关性。方法基于RNAi技术原理,用质粒pEGFPshTERT干扰体外培养的喉癌Hep-2细胞,免疫细胞化学分别检测干扰前、后12、24、36、48小时的喉癌细胞中hTERT和Par-4的表达情况;用质粒pEGFP-shTERT治疗喉癌裸鼠模型,量子点超敏荧光检测治疗前,治疗后6、10、14天的喉癌组织中hTERT和Par-4的表达情况。结果用质粒pEGFP-shTERT干扰前喉癌中hTERT呈高表达,Par-4仅在胞浆表达,干扰后hTERT表达降低,Par-4胞核表达增多,各组间的蛋白表达差异有统计学意义;相关性分析显示:RNAi干扰前后,喉癌中Par-4和hTERT的表达成负相关(P<0.05,r=-0.908)。结论在喉癌中,靶向敲除hTERT mRNA后,伴随hTERT表达降低和细胞凋亡的发生,Par-4表达逐渐增多,提示Par-4与hTERT相互作用可能对hTERT的非端粒酶依赖的抗凋亡途径有影响。
- 余艳陈伟盛建飞陈始明王燕肖伯奎陶泽璋
- 关键词：凋亡调节蛋白质类喉肿瘤RNA干扰
- 腺病毒介导的shRNA沉默hTERT基因表达对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨靶向人端粒酶反转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA)对人鼻咽癌细胞株CNE-2 hTERT表达的影响,及其对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的效应。方法构建表达绿色荧光蛋白(EGFP)基因和靶向hTERT基因短发夹RNA的重组腺病毒质粒,观察其对鼻咽癌细胞株(CNE-2)的转染效果,RT-PCR检测hTERT mRNA表达水平,Western blot检测hTERT蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡状况。结果 Adv-EGFP-shTERT重组腺病毒质粒转染率可达90%以上,成功转染CNE-2细胞24 h后,hTERT mRNA的表达水平显著下降,转染48 h后,hTERT蛋白表达明显下调,细胞增殖活性受到显著抑制,细胞凋亡率可达23.0%。结论腺病毒载体介导靶向hTERT基因的RNA干扰,能显著抑制端粒酶反转录酶表达,进而抑制端粒酶活性,抑制CNE-2细胞增殖并诱导其凋亡,为鼻咽癌的基因治疗研究提供了理论基础。
- 宋玉姣韩继波陈始明肖伯奎陈晨陶泽璋
- 关键词：RNA干扰腺病毒载体HTERT基因
- RNAi沉默TRF2基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞生长增殖的影响
- 2010年
- 目的:探讨采用RNA干扰技术沉默端粒重复序列结合因子2(TRF2)基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞生长增殖的作用情况。方法:构建特异性表达TRF2mRNA且含有荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA,并将其转染Hep-2细胞,采取PCR琼脂糖凝胶电泳检验靶基因TRF2表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡,cell counting kit-8(CCK-8)法观察细胞增殖活性。结果:Hep-2细胞被转染后,TRF2基因表达明显受抑,细胞凋亡发生,增殖活性明显降低。结论:RNA沉默TRF2可明显抑制人喉鳞状癌细胞的增殖,促进细胞发生凋亡。
- 焦路燕徐勇陶泽璋
- 关键词：喉肿瘤
