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hERα-LBD原核表达载体的构建及蛋白表达活性鉴定: 2017年; 目的构建人雌激素受体α亚型配体结合区(hERα-LBD)的原核表达载体,并进行表达蛋白的活性鉴定。方法以hERα-LBD质粒为模板,采用PCR方法扩增hERα-LBD基因,PCR扩增产物鉴定后与T载体(pGEM-T-easy)连接,将连接物转化到感受态细胞中,阳性菌落经酶切和测序鉴定,和pET-28a(+)质粒分别进行双酶切,T4DNA连接酶连接,构建重组表达载体pET-28a(+)-hERα-LBD,转化到大肠杆菌JM109和BL21感受态细胞中。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导细胞表达hERα-LBD融合蛋白;将雌二醇-牛血清白蛋白(BSA)偶联抗原(E2-BSA)与融合蛋白混合,通过电泳法鉴定hERα-LBD的雌激素配体结合活性。结果 PCR扩增的hERα-LBD基因片段约为1.9kb,与预期目的片段大小一致。与T载体连接,形成pGM-T-hERα-LBD重组质粒,转化到感受态细胞,阳性菌落酶切和测序鉴定正确,与pET-28a(+)质粒酶切后连接,成功构建原核重组表达载体pET-28a(+)-hERα-LBD;在大肠杆菌中异源表达人雌激素受体ERα的配体结合区hERα-LBD蛋白。经亲和色谱法纯化后,hERα-LBD蛋白的表达量可达250mg/L。电泳法证实hERα-LBD具有雌激素结合活性。结论成功构建原核重组表达载体pET-28a(+)-hERα-LBD,hERα-LBD具有雌激素结合活性。; 王艳芳赵继军田再民郭彦峰

Biodegradation of methyl parathion by Acinetobacter radioresistens USTB-04被引量：19: 2007年; 甲基对硫磷( MP )的 Biodegradation ，广泛地使用的 organophosphorouspesticide ，用在 1200 mg/L 的起始的集中的 Acinetobacter radioresistensUSTB-04.MP 能完全是的最新孤立的细菌紧张被调查简历作为唯一的碳由 A.radioresistensUSTB-04 降级了面对是的磷酸盐和脲采购不到 4 d 磷和氮来源， MP 的 respectively.Biodegradation 也在 mg/L 是的 130 的起始的集中用没有房间的摘录 ofA.radioresistens USTB-04.MP 被完成完全，简历与 148.0 mg/L 的蛋白质集中面对没有房间的摘录在 2h 降级了，它从 5.0～8.0 随 pH 的增加被增加。与出版报告相反， MP 的中间或最后的降级代谢物都不能被观察。因此，我们建议除 P-O 债券以外的苯戒指上的 C-C 债券的劈开可以是由 A.radioresistensUSTB-04 的 MP 的简历降级小径。; LIU Fang-yao HONG Ming-zhang LIU Dan-mei LI Ya-wen SHOU Pei-shun YAN Hai SHI Guo-qing; 关键词：生物降解甲基对硫磷有机磷杀虫剂环境污染

雌激素受体ERβ配体结合区的异源表达与纯化被引量：1: 2007年; 为研究环境化合物与雌激素受体的相互作用,在大肠杆菌中异源表达了人雌激素受体ERβ的配体结合区(hERβ-LBD)蛋白。在诱导剂(IPTG)浓度为0.2mmol.L-1,培养温度25℃,诱导时间为8h的优化表达条件下,经亲和色谱法纯化后,hERβ(LBD蛋白的产量可达236mg.L-1.; 时国庆郭彦峰魏巍宋青张怀钟广蓉; 关键词：雌激素受体纯化

双酚A对泥鳅卵黄蛋白原的诱导被引量：7: 2007年; 研究了不同浓度[(0．1-500)μg/L]、不同时间(7d,14d)BPA暴露对雄性泥鳅卵黄蛋白原的诱导效应。结果表明,雄性泥鳅血清Vtg含量随BPA暴露时间和暴露浓度的增加而显著增加。暴露14d后,诱导雄性泥鳅血清Vtg显著性增加的最低BPA浓度为1μg/L。; 赵岩时国庆孙春宝佟明阳; 关键词：双酚A 泥鳅卵黄蛋白原

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国家自然科学基金(20507002)