国家自然科学基金(81272660)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- 肿瘤相关成纤维细胞诱导乳腺癌分化细胞去分化为癌干细胞的研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察乳腺癌相关成纤维细胞（TAFs）在乳腺癌分化细胞去分化为肿瘤干细胞（CSCs）中的作用。方法用流式细胞仪从8例原代乳腺癌组织中分离TAFs并用免疫荧光鉴定；采用成球实验研究TAFs对乳腺癌腺上皮细胞自我更新能力的影响，并检测TAFs处理前后干细胞表型CD44^＋CD24^-1/low的比例变化，观察TAFs对去分化的影响。结果从新鲜乳腺癌组织中分离出TAFs，间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色呈阳性。TAFs与乳腺癌腺上皮细胞（BCCs）共接种能增强其自我更新能力，共接种组和对照组的成球数分别为（71．67±3．51）和（24．67±1．53）个（P〈0．01）。TAFs的条件培养基（CM）能增强乳腺癌腺上皮细胞自我更新能力，CM处理组和对照组的成球数分别为（74．67±3．06）和（30．33±3．21）个（P〈0．01）。TAFs能增强乳腺癌分化细胞的自我更新能力，分化细胞（non—CD44^＋CD24-／low）经CM处理后的成球数为（86．00±3．00）个，而对照组为（15．33±1．53）个（P〈0．01）；TAFs能促进乳腺癌分化细胞的去分化，13013-CD44^＋CD24^-1/low细胞经CM处理后，CD44^＋CD24^-1/low比例明显上升达（52．13±0．70）％，对照组为（17．07±0．65）％（P〈0．01）。结论TAFs能通过旁分泌的方式增强乳腺癌腺上皮细胞的自我更新能力，并促进分化细胞去分化为肿瘤干细胞。
- 罗智勇胡艺冰张哲覃吉超吴亚群
- 关键词：肿瘤相关成纤维细胞乳腺癌肿瘤干细胞去分化
- Twist沉默介导的间充质-上皮转化对乳腺癌干细胞特性的影响被引量：4
- 2016年
- 目的 观察Twist沉默介导的间充质-上皮转化（MET）对乳腺癌干细胞特性的影响.方法 小干扰RNA（siRNA）转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot法检测细胞中Twist及MET相关分子[Slug、Snail以及波形蛋白（Vimentin）]的mRNA和蛋白的表达;显微镜观察Twist沉默后细胞的形态变化;流式细胞仪检测CD44＋ CD24细胞比例;体外球体形成实验检测细胞自我更新能力;体内有限稀释实验检测细胞启动肿瘤能力.结果 si-Twist组与对照组比较,Twist基因的mRNA（0.24±0.04,P＜0.01）和蛋白表达量明显降低;细胞表现为上皮样形态,排列规则、细胞间连接紧密、成团生长;间质相关分子Slug、Snail、Vimentin mRNA（0.25±0.05,P＜0.01;0.34 ±0.03,P＜0.01;0.44±0.04,P＜0.01）和蛋白表达量明显降低;上皮标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA（58.71±1.27,P＜0.01）和蛋白表达量明显升高;肿瘤干细胞的百分比明显降低[（63.30±0.80）％比（86.50±0.70）％,P＜0.01];球体形成能力明显降低[（46.67±2.52）个比（109.67±2.52）个,P＜0.01];肿瘤起始细胞数目明显减少（1/122 851比1/20 064,P＜0.01）.结论 MDA-MB-231细胞中Twist沉默后,细胞发生MET,体外自我更新和体内成瘤能力下降.
- 殷茜胡艺冰罗智勇覃吉超
- 关键词：乳腺癌TWIST小干扰RNA肿瘤干细胞
